Преконцепционный молекулярно-генетический скрининг молодых здоровых женщин на предикцию осложнений беременности

Выявление молекулярно-генетических предикторов заболеваний служит базисом для развития персонализированной (индивидуальной) медицины. В этом аспекте большой научнопрактический интерес представляют исследования генетического полиморфизма. Метаанализ проспективных когортных исследований свидетельствует о наличии взаимосвязи между полиморфными вариантами генов FVL -1691G>A и FII -20210G>A матери и такими осложнениями беременности, как невынашивание, задержка роста плода, преэклампсия/эклампсия и преждевременная отслойка плаценты [6-8, 12-15]. Обнаружена взаимосвязь между мутантными аллелями полиморфизма генов ангиотензиногена AGTR1 -1166A>C, и эндотелиальной синтазы окиси азота NO3 -894G>C с возникновением преэклампсии [3-5, 11].

Цель работы: изучение распространенности молекулярно-генетических предикторов тромбофилии и артериальной гипертензии у молодых здоровых женщин, планирующих беременность.

1691G>A, FII-20210G>A, AGTR1-1166A>C, NO3-

Материалы и методы. На этапе прекон-цепционной подготовки было проведено генотипирование 130 здоровых женщин жительниц Забайкальского края в возрасте от 19 до 29 лет (средний возраст составил 24,6±3,8 года), которые не имели в прошлом беременностей, семейного или индивидуального анамнеза артериальной гипертензии, тромбозов и/или тромбоэмболий. Все пациентки дали добровольное информированное согласие на проведение генетического картирования и обработку полученных результатов.

Исследование генетического полиморфизма фактора V Лейдена (FVL-1691G>A), протромбина (FII-20210G>A), эндотелиальной синтазы оксида азота (NO3-894G>C), рецептора 1-го типа ангиотензиногена-2 (AGTR1-1166A>C) проведено на ДНК, полученной из лейкоцитов периферической крови («Проба-РАПИД генетика», ЗАО «НПФ ДНК-Технология», Москва). В качестве метода использована полимеразная цепная реакция с детекцией продукта амплификации в режиме реального времени (Амплифи-катор «ДТ-96») с использованием комплектов реагентов «КардиоГенетика тромбофилия», «КардиоГенетика Гипертония» (ЗАО «НПФ ДНК-Технология», Москва) [9]. Качественные данные представлены в виде числа n и % (число пациенток – носителей данного аллеля и процент от их количества в группе исследуемых) или десятичной доли единицы (Р). Выявленные генотипы проверяли на соответствие закону Харди-Вайнберга. Межгрупповые различия по качественным бинарным признакам оценивали по критерию χ2 с помощью программы Statistica 6.0 («StatSoft»). Значения считали статистически значимыми при р≤0,05, при величине χ2>3,84.

Результаты исследования и их обсуждение. В ходе работы обнаружены все искомые аллельные варианты в гомо- и гетерозиготном состоянии, распределение генотипов которых соответствовало равновесию Харди-Вайнберга (HWE, p>0,05). В когорте здоровых молодых женщин нами не обнаружено гомозиготное состояние генотипа по мутантному аллелю FVL- 1691G>A и FII -20210G>A (популяционные показатели для женщин в Забайкалье – 2,7% и 2,2%, соответственно [2]). Частота FVL- 1691GG и FVL- 1691GA составила: 99,2% (129/130) и 0,8% (1/130) соответственно. Распространенность аллелей 1691А и 1691G полиморфизма FVL- 1691G>A была 0,996 и 0,004, соответственно. Среди исследуемых 98,5% (128/130) были гомозиготными (20210GG), а 1,5% (2/130) гетерозиготными (20210GA) носителями полиморфизма FII -20210G>A. Показатели частоты аллелей 20210А и 20210G полиморфизма FII -20210G>A составили 0,992 и 0,008, соответственно (табл. 1). Таким образом, частота гетерозиготного носительства варианта FVL- 1691GA 0,8% и FII- 20210GA 1,5%, ассоциированных с риском тромбозов, в обследованной когорте пациенток была в 3 раза меньше, чем популяционные показатели в Забайкалье – 2,5% и 4,5%, соответственно (р<0,05) [2].

1166A-аллель гена рецептора 1-го типа ан-гиотензиногена-2 в гомо- либо гетерозиготном состоянии идентифицирован у 120 из 130 (92,3%) пациенток. Частота встречаемости нормального генотипа AGTR1-1166АА составила 71,5% (93/130), гетерозиготного генотипа AGTR1-1166AC – 20,8% (27/130). Гомозиготных носительниц по мутантному аллелю AGTR1-1166СC, ассоциированному с артериальной гипертензией [2, 6], выявлено лишь 7,7% (10/130), что статистически значимо отличается от показателя в европейских популяциях 21,5% (р<0,05) [10].

Активное участие окиси азота (NO) в регуляции сосудистого тонуса, кровотока и артериального давления позволяет рассматривать функционально-значимые полиморфизмы гена eNOS как возможные маркеры риска развития артериальной гипертензии, тяжелой преэклампсии, эклампсии [1, 4, 5]. Преконцепционный скрининг на носительство полиморфизма гена NO3 -894G>C показал, что 90% (117/130) молодых здоровых женщин имели нормальный гомозиготный (894GG) или гетерозиготный (894GС) генотип заявленного полиморфизма эндотелиальной синтазы окиси азота. Распространенность нормального генотипа 894GG составила 57,7% (75/130), гетерозиготного генотипа 894GС – 32,3% (42/130). Гомозиготных носительниц по мутантному аллелю 894СС, связанного с риском артериальной гипертензии, идентифицировано значительно меньше 10,0% (13/130). В целом в исследуемой когорте частота встречаемости аллеля C полиморфизма NO3 -894G>C была в 2,8 раза меньше, чем аллеля G (0,261 и 0,739, соответственно), а мутантные гомозиготы с генотипом NOS3 -894СС идентифицировались кратно реже (10%), чем в европеоидных популяциях (30-40%, p<0,05) [1, 10].

Таблица 1. Частота аллелей и генотипов изучаемого генетического полиморфизма у молодых женщин, планирующих беременность (n=130)

Выводы: отсутствие мутантных гомозиготных генотипов FVL G1691A и FII G20210A, меньшие, чем в популяции, показатели встречаемости гетерозиготных генотипов FVL-1691GA (0,8%) и FII-20210GA (1,5%), ассоциированных с осложнениями беременности; мутантных генотипов AGTR1-1166СC (7,7%) и NO3-894СС (10,0%), связанных с риском артери- альной гипертензии, позволяют заключить, что преконцепционное обследование пациенток на молекулярно-генетические предикторы тромбофилии и артериальной гипертензии должны проводиться избирательно – при наличии индивидуального и/или семейного анамнеза артериальной гипертензии, преэклампсии, эклампсии и/или венозных тромбозов/тромбоэмболий.