Препарат на основе иммуноглобулинов, обладающий иммуностимулирующим действием

В крови животных содержится множество белковых компонентов, которые трансформируют продукты обмена веществ, обеспечивают постоянство онкотического давления и состава циркулирующей крови, образуют комплексные соединения, поддерживают баланс свободных аминокислот в крови. Главная же их функция проявляется в защите организма от патогенных микроорганизмов, токсинов и чужеродных антигенов.

Среди защитных белков центральное место принадлежит иммуноглобулинам. Последние оказывают стрессорное воздействие на органы иммунной системы и тем самым «включают» ее в более ранние сроки. Субъединицы иммуноглобулинов после парентерального введения в организм под действием тканевых протеиназ распадаются до полипептидов и аминокислот. Полипептиды обладают регуляторными функциями и стимулируют рост организма, а образующиеся аминокислоты включаются в межуточный обмен. Таким образом, обеспечивается своеобразная передача гуморальных факторов защиты между поколениями животных определенного вида.

В основе технологии изготовления препаратов иммуноглобулинов лежит разделение белков сыворотки (плазмы) крови на фракции путем селективного их выделения. Специфические препараты иммуноглобулинов готовятся из гипериммунной сыворотки после иммунизации животных заведомо известным антигеном и содержат специфические антитела, неспецифические - из сыворотки (плазмы) клинически здоровых животных. Они содержат широкий спектр антител, создают у животных пассивный иммунитет. Иммуноглобулины препятствуют сенсибилизации клеток и тканей аллергическими антителами, нейтрализуют действие медиаторов (гистамина, серотонина, ацетилхолина), активируют иммуногенез и т.д.

Бессистемное применение антибиотиков, повышение устойчивости патогенных и условно патогенных возбудителей к широкому кругу противомикробных средств, используемых в ветеринарии, нарушение нормального соотношения анаэробных и аэробных бактерий в желудочнокишечном тракте животных в результате неблагоприятных воздействий окружающей среды, стрессы, обусловленные интенсификацией животноводства, механизацией трудоемких процессов, ведут к снижению активности иммунной системы, иммунодепрессии, иммунодефицитам, развитию дисбактериозов. Снижается естественная резистентность организма. Поэтому наряду с внедрением организационно-хозяйственных мероприятий необходима разработка средств, обладающих неспецифическим и специфическим иммуностимулирующим или иммунозаместительным действиями, противовоспалительными и антимикробными свойствами.

Цель исследований – наработка препарата иммуноглобулинов из плазмы крови здоровых лошадей и испытание эффективности наработанных серий препарата в производственных условиях.

Материалы и методы. Для наработки опытных партий препарата использовали кровь здоровых лошадей. Количество забираемой крови зависело от живой массы (1 л с каждых 50 кг живой массы), привычки животного к кровопусканиям, высоты титра антител, общего состояния животного-донора.

Первое кровопускание проводили через 3ч-3 сут после окончания иммунизации, второе – через 48 ч после первого (на 1 л меньше по сравнению с первым кровопусканием), третье – через 48 ч после второго (на 2 л меньше по сравнению с первым кровопусканием). Взятие крови проводили под контролем уровня гемоглобина: при содержании гемоглобина меньше 50 % кровопускание не назначали. В качестве антикоагулянта использовали 10%-ный раствор лимонно-кислого натрия из расчета 35 мл на 1 л крови.

Высаливание иммуноглобулинов из плазмы крови проводили сернокислым аммонием при 50%-ном насыщении с последующей фильтрацией через миллипоровые пластины и фасовкой во флаконы.

Контроль по физико-химическим и биологическим свойствам проводили согласно ТУ 9380-033-00492374-1998.

Для изучения влияния неспецифических препаратов в опытах использовали белых крыс, которым одно-, двух- и трехкратно подкожно вводили иммуноглобулины в дозах 0,3; 0,4 и 0,5 мл на животное.

Результаты исследований. В ходе гематологических исследований не выявлено изменений изучаемых показателей. Отмечались лишь незначительные сдвиги в морфологической картине крови к 21 суткам, которые характеризовались увеличением количества сегментоядерных нейтрофилов на 15,7 % и лимфоцитов – на 9,7 %. Выявлялась определенная тенденция к увеличению на 10 сут процента фагоцитоза, фагоцитарного числа и индекса завершенности фагоцитоза, что свидетельствовало о повышении уровня неспецифической резистентности организма.

Производственные испытания препарата иммуноглобулинов проведено на трех группах телят по 30 животных в каждой:

1-я группа – в первые сутки после рождения внутримышечно вводили иммуноглобулин из расчета 1 мл на 1 кг живой массы, но не более 15 мл + выпойку 2 мл лактобактерина; 2-я группа – иммунная сыворотка внутримышечно из расчета 2 мл/кг живой массы + в выпойку 2 мл лактобактерина; 3-я группа – контрольная.

За всеми телятами вели клиническое наблюдение, на 15 сут брали кровь и определяли показатели гомеостаза.

Установлено, что в 1-й группе содержание общего белка составило 7,69 г/л, фагоцитарная активность – 30 %, бактерицидная активность – 29 %, лизоцимная – 16 %, содержание иммуноглобулинов – более 15 мг/мл.

Аналогичные показатели были и во 2-й группе. У контрольных телят указанные показатели были значительно ниже: общий белок – 6,1 г/л, фагоцитарная активность – 24 %, бактерицидная – 22 % и лизоцимная – 14 %. Содержание иммуноглобулинов составляло 5-7 мг/мл.

В течение 1 мес в первой группе были зарегистрированы желудочнокишечные расстройства у 9 телят (30 %), все они после диетического лечения выздоровели. Среднесуточный привес в данной группе составлял 0,445 кг. Во второй группе желудочно-кишечные расстройства были зарегистрированы у 12 телят (40 %), 11 из них после соответствующего лечения выздоровели, 1 теленок пал. Среднесуточный привес составил 0,415 кг. В контрольной группе желудочно-кишечные расстройства были зарегистрированы у 24 телят (80 %), из них пало – 6 (20 %). У сохранившихся телят среднесуточный привес составлял 0,192 кг.

Анализируя полученные данные, можно сделать вывод, что сочетанное применение иммуноглобулина и лактобактерина обуславливало эффективную стимуляцию общей резистентности организма новорожденных телят, т.е. препарат проявлял иммунные свойства, а лактобактерин восстанавливал кишечную микрофлору и активизировал функцию желудочно-кишечного тракта.

Другая серия опытов была проведена на новорожденных поросятах. Иммуноглобулин вводили животным в первые часы жизни внутримышечно в объеме 1-2 мл 1 раз в день в течение двух дней подряд, предварительно подогрев его. Иммунная сыворотка применялась также внутримышечно в дозе 5 мл 1 раз в день в течение первых двух суток. Третья группа служила контролем, животным вышеперечисленные препараты не применяли. По истечении 14 сут у животных была взята кровь и проведено ее исследование по следующим показателям: общий белок, бактерицидная и фагоцитарная активность, содержание иммуноглобулинов. Фиксировали все случаи заболеваний и гибели животных.

Установлено, что новорожденные поросята, получавшие препараты, имели более высокие показатели естественной резистентности организма по сравнению с контрольными животными (таблица).

Сравнительная эффективность применения иммунных препаратов новорожденным поросятам

Показатель	Препарат		Контроль
	иммуноглобулин	иммунная сыв-ка
Сохранность, %	80	70	60
БАСК, %	31,6±0,7	23,3±0,6	20,1±0,4
ФА, %	60,4±0,1	52,1±0,1	50,8±0,9
Общий белок, г/л	84,6±0,1	66,8±0,6	62,4±0,9
Глобулины (γ 1 +γ 2 +β), г/л	38,4±0,7	26,8±0,8	25,9±0,6

Как видно из результатов исследований, наивысшее содержание белка и иммуноглобулинов отмечалось у животных 1-й группы – 84,6±0,1

и 38,4±0,7 г/л соответственно. Под воздействием препарата иммуноглобулина повышалась и бактерицидная активность: по сравнению с животными, получавшими иммунную сыворотку – на 8,3; с контрольными – на 11,5 %. Фагоцитарная активность нейтрофилов в 1-й группе оказалась наиболее высокой – 60,4 %, что на 9,6 % больше, чем у поросят контрольной группы.

Выводы. Экспериментальные данные свидетельствуют о том, что применение неспецифического препарата иммуноглобулина активирует как гуморальные, так и клеточные факторы иммунитета, оказывает как местное, так и общее воздействие на организм, способствует повышению сохранности животных до отъема по сравнению с контролем.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Апатенко, В.М. Иммунодефицит у животных /В.М.Апатенко //Ветеринария. – 1992. - № 5. – С. 29-30. 2. Семенова, И.Б. Принципы коррекции вторичных иммунодефицитов двумя различными по своей природе иммуномодуляторами – анатоксином стафилококковым очищенным и ликопидом /И.Б.Семенова //Журнал микробиологии. – 1998. - № 1. – С. 100-104. 3. Ширинский, В.С. Проблемы иммуностимулирующей терапии /В.С.Ширинский, Е.А.Жук //Иммунология. – 1991. - № 3. – С. 7-10. 4. Тарасова, Н.Б. Иммуноглобулины и Т-клетки при острых и хронических радиационных поражениях /Н.Б.Тарасова, Р.Н.Низамов, Л.М.Сургучева //Матер. межд. симп. - Казань, 2005. - Ч. 1. - С. 383-385. 5. Тарасова, Н.Б. Оценка радиопрофилактических свойств сывороточных глобулинов /Н.Б.Тарасова, Р.Н.Низамов, Г.В.Конюхов и др. //Матер. межд. научно-практ. конф. – Покров, 2000. – С. 295-296.

ПРЕПАРАТ НА ОСНОВЕ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ, ОБЛАДАЮЩИЙ ИММУНОСТИМУЛИРУЮЩИМ ДЕЙСТВИЕМ

Сычев К.В., Тарасова Н.Б., Конюхов Г.В., Вагин К.Н.

Резюме

Ухудшение экологической обстановки, содержание животных в неблагоприятных условиях, кормление, не отвечающее биологическим особенностям организма, приводят к снижению естественной резистентности, нарушению нормального соотношения анаэробных и аэробных бактерий в желудочно-кишечном тракте и т.д. Сочетанное применение иммуноглобулина и лактобактерина способствовало повышению сохранности животных, обуславливало эффективную стимуляцию общей резистентности организма новорожденных телят и поросят, восстанавливало кишечную микрофлору и активизировало функцию желудочно-кишечного тракта.

IMMUNOGLOBULIN BASED PREPARATIONS POSESSING IMMUNOSTIMULATING EFFECT

Sychov K.V., Tarasova N.B., Konyukhov G.V., Vagin K.N.