Применение иммуностимуляторов для повышения напряженности иммунитета против болезни Ньюкасла

В птицеводческих хозяйствах промышленного типа на организм птиц действует ряд отрицательных факторов, обусловленных особенностями технологии содержания и кормления. К ним относятся низкий уровень инсоляции, шум работающих механизмов, высокая влажность воздуха, повышенное содержание вредных веществ в воздухе, однообразный рацион с большим количеством различных премиксов и биологически активных веществ, продукты жизнедеятельности микрофлоры кормов, лекарственные вещества, обладающие иммунодепрессивными свойствами. Хроническое воздействие стресс-факторов ведет к ослаблению естественной резистентности и иммунобиологической реактивности организма птицы, приводящее к тому, что в стаде не всегда создается достаточный иммунный фон, возможно снижение напряженности иммунитета и, как следствие, возрастает опасность возникновения инфекционных болезней. Это приводит к значительным экономическим потерям, необходимости разработки средств и способов аттеинуации негативных последствий [1, 2].

Различные инфекционные заболевания широко распространены и наносят значительный экономический ущерб птицеводству. Важное значение в профилактике инфекционных болезней птиц принадлежит изысканию средств, повышающих резистентность и иммунобиологическую реактивность птицы. С этой целью предложено много различных иммуностимулирующих средств, однако до настоящего времени они имеют ограниченное применение из-за недостаточной изученности механизма их действия и отсутствия научнообоснованных способов и схем применения [3].

Успешное развитие отрасли в нашей стране возможно лишь при условии внедрения современных технологических процессов производства продукции, внедрение в производство системы эффективной профилактики болезней птиц. Основным показателем оценки эффективности применения средств специфической профилактики инфекционных болезней является напряженность иммунитета. И в последние годы значительно возрос интерес многих исследователей и практических специалистов к проблеме иммуномодуляции, что связано прежде всего с усилением экологического неблагополучия и возрастающей нагрузкой на организм птицы неблагоприятных факторов, возникающих с участием человека и, соответственно в итоге существенным                 ростом иммунодефицитного состояния [4, 5].

Особую опасность для птицефабрик представляет возникновение вторичных иммунодефицитов, сопровождающихся нарушением иммунологической реактивности, чреватой, прежде всего снижением устойчивости организма птиц к возбудителям вирусных инфекций.

На таких предприятиях лекарственная профилактика и терапия с использованием сильнодействующих антибиотиков приводят к снижению иммунологической реактивности птицы, что отрицательно сказывается на выработке антител после специфической профилактики, и тем самым создаются условия вирусоносительства и распространения возбудителя. С учетом вышеизложенного весьма актуальной является проблема активации факторов неспецифической резистентности и специфического иммуногенеза с использованием иммуностимулирующего препарата. Таким препаратом в нашем опыте является АСД фракция–2 (антисептик стимулятор Дорогова), являющийся продуктом сухой перегонки тканей животного происхождения.

АСД оказывает нейротропное холиномиметическое действие на центральную и вегетативную систему. Он стимулирует моторику желудочнокишечного тракта, секрецию и активность пищеварительных желез и ферментов, улучшает процессы пищеварения и усвоения питательных веществ, повышает активность ферментов, которые принимают участие в транспорте ионов и питательных веществ через клеточные мембраны, в процессах фосфорилирования, а также синтезе белковых веществ. В результате такого воздействия препарат улучшает трофику тканей, нормализует обменные процессы в организме животных и способствует восстановлению до нормы при различных дистрофических состояниях.

Для правильного составления смеси биологически активного вещества (АСД-фракция 2) и получения наибольшего эффекта в стимуляции роста птицы необходимо установить влияние различных сочетаний этого вещества на продуктивность и физиологическое состояние организма.

В связи с этим целью наших исследований стало изучение состояния реактивности организма птиц на введение иммунологического препарата и определение его дозы с целью получения напряженного иммунитета против болезни Ньюкасла.

Материал и методы исследований. В задачу наших исследований входило изучение действия иммуностимулятора на формирование напряженности иммунитета против болезни Ньюкасла. Работа выполнена в условиях ОАО ПФ «Моргаушская» Моргаушского района Чувашской Республики в птичниках с клеточным содержанием на четырех аналогичных группах по 200 голов в каждой с постановкой научнохозяйственного опыта на клинически здоровой птице яичного направления породы Хай-Лайн. Для выбора эффективной дозы препарата иммуностимулятор использовали в разведении 1/40 с 30-дневного возраста в дозах 0,05; 0,1; 0,15 мл/кг живой массы 1-й, 2-й, 3-й опытным группам, тщательно перемешав с утренней порцией комбикорма, в рацион кормления птице 4-й контрольной группы препарат не добавлялся.

На протяжении опытов птицу содержали в одинаковых условиях, все группы получали одни и те же комбикорма с одинаковым набором компонентов. Микроклимат помещения соответствовал допустимым зоотехническим нормам. Все мероприятия проводили в соответствии с противоэпизоотическим планом, согласно разработанной и утвержденной схемы.

Для оценки опытов применили следующие методы исследований:

• 1.    Гематологические – в крови цыплят определяли содержание гемоглобина, количество лейкоцитов, эритроцитов, определение лейкоцитарной формулы; бактерицидной активности сыворотки крови, лизоцимной активности.

• 2.    Биохимические исследования сыворотки крови – содержание общего

• 3.    Иммунологические – определение в сыворотке крови специфических антител к вирусу болезни Ньюкасла согласно методическим указаниям.

• 4.    Зоотехнические – определение среднесуточных приростов птицы, учет заболеваемости и сохранности.

• 5.    Клинические – проведение ежедневного клинического осмотра птицы

белка, определение белковых фракций, кальция, фосфора.

с целью определения общего состояния здоровья.

Полученные данные нашего опыта обработаны методом вариационной статистики (По Плохинскому), с выведением достоверности различия сравнимых показателей.

Результат исследований. Данные о влиянии иммуностимулятора на основе АСД – фракции 2 на рост и развитие птицы приведены в таблице (Таблица 1).

Таблица 1 – Среднесуточные приросты молодняка птицы

Показатели	Исследуемые группы
	контрольная	1-ая опытная группа	2-ая опытная группа	3- тья опытная группа
Живая средняя масса цыплят, г. - 30-дневного возраста - 90-дневного возраста	251 ±0,5 901 ±0,4	249 ±0,5 939 ±0,5	249 ±0,43 970 ±0,52	251 ±0,7 992 ±0,45
Среднесуточный прирост, г.	10,8	11,5	11,9	12,1
Процент сохранности	94	96	98,5	97,9

Из выше приведенных данных в таблице видно, что динамика изменений среднесуточного прироста живой массы молодняка птицы всех опытных групп зависела от дозы иммуностимулирующего препарата. Наиболее высокие результаты при применении данного препарата получены в дозе 0,15 мл/кг живой массы. В возрасте 90 дней цыплята опытных групп по среднесуточному приросту превзошли контрольную группу птиц: 1 – 6,5 %, 2 – 10,2 %, 3 – 12 % соответственно. По сравнению с контрольной, у аналогов в опытных группах птиц лучше развито оперение, повышена сохранность на 3,4 %, процент выбраковки снизился на 2,3 %. Результаты взвешивания свидетельствовали о нормальном течении процессов роста и развития цыплят. Это подтверждает благоприятное действие препарата на обменные процессы в организме птиц.

Иммуностимулятор на основе АСД – фракции 2 влияет также на морфологические, биохимические, иммунологические показатели крови птиц.

Мы можем отметить, что определенные изменения произошли и по морфологическим показателям крови. При сравнении данных гематологических исследований установлено достоверное превосходство по многим показателям в опытных группах. Применение препарата в дозе 0,15 мл/кг живой массы способствовало повышению уровня эритроцитов на 19,4 %, лейкоцитов – 24,5 %, гемоглобина – 11,8 % в опытных группах, когда в контрольной – данные показатели находились на уровне 11,5%, 6,0 %, 1,0% соответственно, а применение препарата в дозе 0,05 мл/кг и 0,1 мл/кг не вызвало заметных изменений морфологической карты крови.

В лейкоцитарной формуле по мере роста птицы отмечено количественное увеличение отдельных видов белых кровяных телец, особенно лимфоцитов, являющихся одним из основных звеньев иммунной защиты организма птицы. При этом наблюдали преобладание крупных зрелых клеток, что, по нашему мнению, может быть связано со становлением функциональной деятельности лимфоидных органов в 90-дневном возрасте.

Также нужно отметить, что изучение морфобиохимических показателей крови цыплят показало наличие значительных отклонений от физиологической нормы характерной именно для каждой возрастной группы птицы. С возрастом в крови цыплят содержание красных кровяных телец увеличилось, что характерно для раннего постнатального периода развития птицы, однако оно было ниже нормы.

Также менялись основные биохимические показатели крови птиц по сравнению с контрольной группой. По нашему мнению, увеличение общего белка в крови происходило за счет накопления альбуминов и гамма - глобулинов, что являлось благоприятным фактором, свидетельствующим о том, что назначение препарата АСД – фракция 2 активизирует интенсивность течения обменных процессов, улучшает физиологическое состояние и укрепляет защитные силы организма птиц и тем самым повышается их резистентность.

В крови опытных и контрольных групп концентрация общего кальция и неорганического фосфора колебалась в пределах принятых физиологических норм.

В следующей таблице приводятся данные об иммунобиологических показателях крови птиц (Таблица 2).

Таблица 2 – Иммунологические показатели крови птиц

Группы птиц	Возраст цыплят	Лизоцимная активность, %	Бактерицидная активность, %
1-ая опытная группа	30	32,9±0,8	53,5±0,7
	90	44,5±1,3	58,9±1,1
2-ая опытная группа	30	32,8±1,6	57,2±1,2
	90	49,1±1,5	59,8±1,8
3-ья опытная группа	30	36,1±2,2	56,7±1,1
	90	49,9±0,8	59,3±1,4
Контрольная группа	30	33,2±0,8	44,5±0,9
	90	33,5±1,0	52,6±1,2

Таблица 3 – Динамика напряженности иммунитета против болезни Ньюкасла

О s В s < c О ц a о ^ о к	И s н с н о св о m	Титры антигемагглютинов											н о к о U и s с 2 к
				ОО	<о	СП	3	00		Г4	о	00 о
Контроль	45	-	20	22	45	46	1	2	10	4	-	-	86,6
ная	90	5	28	49	50	13	3	2	-	-	-	-	78
1-ая опытная	45	-	12	12	30	27	20	21	5	10	15	13	92
	90	1	8	37	37	46	10	5	5	-	-	-	87,3
2-ая опытная	45	3	-	5	39	23	20	23	9	6	10	-	88
	90	-	4	26	42	35	33	12	6	-	-	-	97,3
3-ья опытная	45	-	-	17	25	22	24	15	14	10	15	8	100
	90	-	1	24	28	25	39	20	12	1	-	-	99

Если учитывать, что естественная резистентность организма является функцией иммунной системы, то по увеличению бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови можно судить об иммуностимулирующем свойстве препарата и об улучшении деятельности иммунной системы организма. И надо отметить, что у опытных групп, которым применяли препарат АСД – фракция 2, увеличение бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови было наибольшим, причем более высоким оно было при использовании препарата в дозе

0,15 мл/кг живой массы.

Далее мы определяли влияние препарата АСД – фракция 2 на иммунологическую реактивность птицы при использовании вакцины из штамма Ла –Coта против болезни Ньюкасла. Напряженность иммунитета выявляли в возрасте 45 и 90 дней после вакцинации по титру специфических вируснейтрализующих антител в РЗГА.

Коррекция иммунного ответа при вакцинации цыплят против болезни Ньюкасла характеризовался повышением в крови уровня противовирусных антигемагглютинов. Данные приведены в нижеследующей таблице (Таблица 3).

Полученные результаты свидетельствуют об активизации иммунного ответа птицы на введение иммуностимулирующего препарата. Повышение титра антител в РЗГА было весьма ощутимо в разведениях сыворотки крови 1:256-1:1024, т. е. в опытных группах по сравнению с контрольной увеличились количество проб, имеющих титр 1:2561:512.

В 1-ой опытной группе титры антител были выше по сравнению с контрольной группой на 6,6-9,3 %, во 2-ой -10,4 - 19,3 %, в 3-й -13,4- 22 %. К 90-дневному возрасту уровень титра антител постепенно снижался во всех группах, но в опытных они остались на более высоком уровне.

Эффективность иммунизации при применении иммуностимулирующего препарата контролировали в реакции иммуноферментного анализа (ИФА).

Заключение. Результаты проведенной научной работы дают возможность сделать вывод о том, что:

• 1.    Препарат, приготовленный на основе АСД, не обладает токсичными кумулятивными свойствами.

• 2.    Научно-производственными опытами установлено, что препарат стимулирует рост и развитие птицы, увеличивает ее сохранность. Живая масса цыплят опытных групп превышает на 6,5; 10,2; 12,0 % по сравнению аналогов из контрольной группы.

• 3.    Иммунитет птиц на фоне

• 4.    Препарат оказал действие на повышение показателей крови. Достоверное повышение получено во 2-ой и 3-й опытных группах, максимальный уровень достигнут в дозе 0,15 мл/кг живой массы. Препарат положительно влияет на уровень метаболитических процессов в организме, улучшает показатели белкового обмена, ускоряет окислительновосстановительные процессы, что является основополагающим условием для формирования напряженного иммунитета против болезни Ньюкасла, тем самым, создавая невосприимчивость организма на действие вирусного агента и благополучие хозяйств по данному виду вирусной инфекции.

применения препарата АСД - фракция 2 в дозе 0,15 мл/кг живой массы сопровождается повышением напряженности поствакционального иммунитета против болезни Ньюкасла на 6,6-9,3 %; 10,4-19,3 %; 13,4-22 % в зависимости от возраста, соответственно по сравнению с контрольной группой.

Для повышения роста, развития, сохранности, увеличения напряженности иммунитета против болезни Ньюкасла предлагаем использовать иммуностимулятор АСД - фракция 2, приготовленный на дистиллированной воде в разведении 1/40 в дозе 0,15 мл/кг живой массы с кормом в течение 5 дней с перерывами 2 дня до перевода птицы в цех промышленного стада.

Резюме

В данной статье рассматриваются вопросы применения иммуностимуляторов для повышения напряженности иммунитета против болезни Ньюкасла. Опыты проводили в птичниках с клеточным содержанием на четырех аналогичных группах по 200 голов в каждой, с постановкой научно-хозяйственного опыта на клинически здоровой птице яичного направления породы Хай-Лайн. Для выбора эффективной дозы препарата, иммуностимулятор использовали в разведении 1/40 с 30-дневного возраста в дозах 0,05; 0,1; 0,15 мл/кг живой массы 1-й, 2-й, 3-й опытным группам, тщательно перемешав с утренней порцией комбикорма, в рацион кормления птице 4-й контрольной группы препарат не включали. Для оценки опытов применяли гематологические, биохимические, иммунологические, зоотехнические и клинические методы исследований. В крови цыплят определяли содержание гемоглобина, количество лейкоцитов, эритроцитов, выводили лейкоцитарную формулу, определяли бактерицидную и лизоцимную активности сыворотки крови. Определяли содержание общего белка, белковых фракций, кальция, фосфора. Проводили определение в сыворотке крови специфических антител к вирусам болезни Ньюкасла согласно методическим указаниям. В работе приводятся данные о состоянии реактивности организма птиц на введение иммунологического препарата и определения дозы с целью получения напряженного иммунитета против вирусной болезни Ньюкасла. Также приводятся данные влияния иммуностимулятора на основе АСД фракции–2 на рост и развитие птицы. Приведены данные влияния препарата на морфологические, биохимические, иммунологические показатели крови птиц. В статье представлена динамика напряженности иммунитета против вышеназванной вирусной болезни птиц. Отмечено, что препарат способствует повышению иммунологических показателей неспецифической резистентности организма.

Tikhonov V.K., Tikhonova G.P., Sofronov V.G., Grigorieva V.V., A.P. Nikitina Summary

This article addresses the use of immunostimulants to increase the strength of immunity against Newcastle disease. Experiments were carried out in poultry houses with a cell content of four similar groups of 200 heads each, with the setting of scientific and economic experience on a clinically healthy bird of the High-Line egg direction. To select an effective dose of the drug, the immunostimulant was used in a 1/40 dilution from 30 days of age at doses of 0.05; 0,1; 0.15 mL/kg live weight of the 1st, 2nd, 3rd experimental groups, thoroughly mixed with the morning portion of combined feed, the drug was not included in the diet of feeding the poultry of the 4th control group.

Hematological, biochemical, immunological, zootechnical and clinical methods were used to evaluate the experiments. In the blood of chickens, hemoglobin content was determined, the number of white blood cells, red blood cells, leukocyte formula was excreted, and serum bactericidal and lysozyme activities were determined. The content of total protein, protein fractions, calcium, phosphorus was determined. Specific antibodies to Newcastle disease viruses were determined in serum according to the guidelines. The study provides data on the state of reactivity of birds to the administration of an immunological drug and the determination of the dose in order to obtain intense immunity against Newcastle virus disease. Data on the effect of the ASD-2 immunostimulant on poultry growth and development are also provided. Data on the effect of the drug on morphological, biochemical, immunological parameters of avian blood are presented. The article presents the dynamics of the tension of immunity against the above-mentioned viral disease of birds. It was noted that the drug contributes to an increase in immunological indicators of non-specific resistance of the body.