Применение кормовой добавки винивет в птицеводстве. Сообщение I. Развитие специфического иммунитета у цыплят

Нарушения обмена веществ (в частности, минерального) относятся к широко распространенным незаразным болезням (1). Минеральные элементы, входящие в состав биологически активных соединений и генетического аппарата клеток, способствуют нормальному функционированию органов и тканей (2, 3), включаются в структурные образования и участвуют в синтезе таких сложных органических соединений, как нуклеопротеиды. Недостаток или избыток некоторых элементов в корме приводит к снижению продуктивности и плодовитости, ухудшает усвоение кормов, вызывает заболевания. Если корма бедны минеральными компонентами или содержат их не в необходимых организму соотношениях, то минеральный состав крови поддерживается за счет соответствующих депо, что ведет к истощению последних.

Для проявления генетически обусловленной способности организма синтезировать качественный белок необходимы условия кормления и содержания, обеспечивающие оптимальное течение обменных процессов. Способность иммунной системы к предупреждению заболеваний также находится под влиянием пищевого статуса: недостаточное и неполноценное питание ведет к нарушению регуляции иммунного ответа.

В последнее время возрос интерес к использованию натуральных кормовых добавок на основе сырья растительного и животного происхождения для профилактики и лечения заболеваний, сопровождающихся повышенной чувствительностью генома к повреждениям. Такие биокомплексы служат источниками разнообразных биоактивных соединений (витамины, полисахариды, гликопептиды, аминокислоты, сульфиды, сапонины, полифенолы, терпеноиды, флавоноиды, индолы и др.), обладающих антиоксидантными, антимутагенными, антиканцерогенными и иммуномодулирующими свойствами (4, 5). Помимо этого они также проявляют тонизирующую и иммуностимулирующую активность, антисептическое действие и могут использоваться в качестве лекарственных средств.

В частности, продукты пчеловодства имеют выраженные гемопоэтические свойства, способствуют повышению содержания в крови эритроцитов, ретикулоцитов и гемоглобина, нормализуют число лейкоцитов и лейкоцитарную формулу (6), а также обладают антимутагенным, антистрессовым и иммуномодулирующим эффектом (7).

Зарегистрированная кормовая добавка винивет (№ РОСС RU ПО 96, НО 6184 № 104176) получена на основе возобновляемых вторичных продуктов пчеловодства (8). Технология производства и рецептура препарата разработаны впервые в мире и защищены патентами РФ (8-10). Добавка содержит практически полный комплекс всех жизненно необходимых нутриентов — микро- и макроэлементов, заменимых и незаменимых аминокислот, витаминов, предопределяющих физиологически нормальное состояние иммунитета.

Целью нашей работы была оценка влияния кормовой добавки винивет на развитие специфического иммунитета при вакцинации против болезни Ньюкасла.

Методика . Опыты проводили на цыплятах кросса Бованс в условиях племенного репродуктора ООО «Юдинский» (Зеленодольский р-н, Республика Татарстан). Рацион молодняка кур содержал (%): зерносмесь (пшеница + ячмень, 1:1) — 76,6; рыбную муку — 7,0; белково-минеральные витаминные добавки — 9,0; жмых рапсовый — 5,0; рапсовое масло — 1,5; ракушки — 0,9; винивет (опыт) — 2 % от массы кормовой смеси.

Для изучения иммунореактивности цыплят в возрасте 30 сут вакцинировали сухой вирус-вакциной против болезни Ньюкасла (штамм ЛаСота) (опытная и контрольная группы — по 490 гол.).

Выработку специфических антител детектировали в реакциях нейтрализации вируса (РНВ) и гемагглютинации (РГА). Кровь для гематологических исследований отбирали из подкрыльцовой вены утром до кормления, для иммунологических анализов — после убоя (у трех особей из каждой группы). По цитопатогенному действию через 72 ч в культуре клеток почек поросят (КПП) определяли титр вируснейтрализующих антител в контролируемой дозе сыворотки крови (разность титров в опыте и контроле, выраженная в логарифмах, показывала степень подавления размножения вируса иммунной сывороткой). Содержание церулоплазмина как неспецифического фактора резистентности оценивали по методу Н. Равина (11), сульфгидрильных групп — амперометрическим титрованием (12). НСТ-тест (восстановление нитросинего тетразолия) ставили согласно описанию в руководстве А.С. Козлюк с соавт. (13). В стимулированном варианте НСТ-теста в качестве антигена использовали суспензию вакцины против болезни Ньюкасла.

Статистическую обработку данных выполняли с помощью пакета программ Microsoft Excel (2000).

Результаты . После вакцинации специфические вируснейтрали-зующие антитела обнаруживались у цыплят на 3-и сут, гемагглютинирую-щие — на 5-е сут (табл. 1). Динамика формирования антител в обеих группах была сходной, однако у цыплят, получавших винивет, титры антител оказались несколько выше в обеих реакциях, хотя наблюдаемые различия не были статистически достоверными (Р > 0,05). Гемагглютини-рующие антитела в отличие от вируснейтрализующих появлялись лишь на 5-е сут после вакцинации, и значения их титров в опыте превышали таковые в контроле во все сроки исследования (см. табл. 1).

Количество сульфгидрильных групп и концентрация церулоплазмина — показатели гуморальной резистентности. При этом церулоплазмин представляет собой единственный компонент плазмы крови, который катализирует окисление некоторых полиаминов.

• 1.    Динамика формирования специфических антител против болезни Ньюкасла после вакцинации у цыплят кросса Бованс на фоне применения кормовой добавки винивет ( n = 5, X ± х , племенной репродуктор ООО «Юдинский», Республика Татарстан, 2011 год)

• 2.    Содержание сульфгидрильных групп и церулоплазмина в сыворотке крови у цыплят кросса Бованс после вакцинации против болезни Ньюкасла на фоне применения кормовой добавки винивет ( n = 5, X ± х , племенной репродуктор ООО «Юдинский», Республика Татарстан, 2011 год)

  Группа	Количество сульфгидрильных групп, мкмоль/мл		Церулоплазмин, ед. ОП450
  	общие	белковые
  Опыт	21,3±1,0	До вакцинации 24,2±1,0	3,1±0,3
  Контроль	19,2±1,0	23,1±3,0	3,0±0,2
  Опыт	Через 20,1±0,8	21 сут после вакцинац 38,2±1,4	и и 6,7±1,0
  Контроль	18,3±0,6	34,3±1,1	6,5±0,9
  П р и м е ч а	н и е. ОП — оптическая плотность.

• 3.    Состав белков сыворотки крови у цыплят кросса Бованс после вакцинации против болезни Ньюкасла на фоне применения кормовой добавки винивет ( n = 5, X ± х , племенной репродуктор ООО «Юдинский», Республика Татарстан, 2011 год)

  Фракция	До вакцинации		Через 15 сут после вакцинации
  	контроль	опыт	контроль	опыт
  Общий белок, г/л	36,3±0,99	37,9±0,78	37,7±0,99	39,1±1,01
  Фракция белков, %:
  альбумины	49,0±1,31	46,0±0,91	48,8±0,83	42,2±0,87
  а -глобулины	17,4±0,31	16,0±0,21	17,7±0,27	15,7±0,18
  в -глобулины	17,9±0,19	17,0±0,31	17,6±0,18	17,4±0,21
  Y -глобулины	15,7±0,21	21,0±0,18	15,9±0,17	24,7±0,22

• 4.    Функциональная активность полиморфно-ядерных клеток крови у цыплят кросса Бованс после вакцинации против болезни Ньюкасла на фоне применения кормовой добавки винивет ( n = 5, X ± х , племенной репродуктор ООО «Юдинский», Республика Татарстан, 2011 год)

  Показатель	До вакцинации		Через 15 сут после вакцинации
  	контроль	опыт	контроль	опыт
  Доля формазан-положительных клеток, %:
  в спонтанном тесте	5,8±0,09	6,0±0,11	6,1±0,21	6,9±0,12
  в стимулированном тесте	6,3±0,08	6,8±0,14	10,7±0,11	13,4±0,13
  Показатель резерва	1,09	1,13	1,59	1,95
  Коэффициент метаболической активности	0,09	0,13	0,59	0,94

П р и м е ч а н и е. РНВ и РГА — соответственно реакции нейтрализации вируса и гемагглютинации; прочерки означают, что антитела не выявлялись.

В опыте содержание сульфгидрильных групп и церулоплазмина в сыворотке крови перед вакцинацией было немного выше по сравнению с контролем (табл. 2). Через 21 сут после вакцинации в обеих группах эти показатели возрастали. Так, количество белковых сульфгидрильных групп у особей в опытной группе увеличилось на 58,3 %, в контрольной — на 47,8 % (Р < 0,001). Количественные показатели по церулоплазмину после вакцинации в обеих группах возросли почти в 2,2 раза (Р < 0,05).

Результаты исследований белкового состава крови (табл. 3) свидетельствуют о положительном влиянии винивета на иммуногенез у цыплят. До вакцинации количество общего белка и его фракций в обеих группах цыплят были почти одинаковыми. Через 15 сут после вакцинации первый показатель незначительно увеличился в обеих группах. На фоне снижения концентрации альбуминов наблюдалось заметное нарастание количества Y -глобулиновой фракции: в контроле — на 25,2 % (Р < 0,05), в опыте — на 55,3 % (Р < 0,05). Нарастание количества Y -глобулинов коррелировало с титрами специфических антител в обеих группах, однако на фоне применения винивета оно было в 2,0 раза выше контрольного.

НСТ-тест (табл. 4) нагляднее всего демонстрирует функциональное состояние полиморфно-ядерных клеток крови. В качестве антигена в стимулированном тесте мы использовали суспензию вакцины против болезни Ньюкасла. Полученные данные позволяют констатировать более высокую активность нейтрофилов крови у цыплят из опытной группы, что сильнее выражено в стимулированном тесте. Количество активных клеток у особей в опыте в стимулированном тесте было на 25,7 % выше, чем в контроле (Р < 0,05).

Аналогичная тенденция также отмечалась по показателям резерва и коэффициенту метаболической активности нейтрофилов (см. табл. 4).

Итак, включение в рацион цыплят кормовой добавки винивет способствует повышению показателей гуморального и клеточного иммунитета. Стимуляция иммуногенеза подтверждается более интенсивным нарастанием титров специфических антител, количества сульфгидрильных групп, Y -глобулинов и выраженной активизацией функции нейтрофилов крови после вакцинации.