Применение препарата GS-441524 (производство КНР) при лечении инфекционного перитонита кошек

Инфекционный перитонит кошек широко распространен во всем мире. Инфекционный перитонит кошек (ИПК) – подостро или хронически протекающая вирусная болезнь семейства кошачьих, вызванная коронавирусом FCoV [1; 2].

FCoVs, семейство Coronaviridae – коронавирусы кошек, порядок Nidovirales – частые патогены кошек, существующие в виде двух разных патотипов: FCoVs, FECV. Кишечный коронавирус кошек FECV – патотип, инфицирующий только кишечный тракт и вызывающий слабый, часто сложно идентифицируемый энтерит [1; 3]. Частота регистрации этого коронавируса очень высока, и при значительном скоплении кошек сероконверсия достигает 90% [4–6].

Патотип FIPV развивается менее чем в 10% случаев у выявленных в серологии кошек (Brownetal, 2009). В противоположность FECV FIPV является плохо передающимся и высоковирулентным. Путем значительного инфицирования макрофагов и моноцитов FIPV может вызывать смертельную системную болезнь, вовлекающую в патологический процесс органы, и в характерных случаях происходит накопление брюшного экссудата (асцит) [7; 8].

Инфекционный перитонит кошек чаще регистрируют в питомниках, приютах, особенно способствует перезаражению и частому проявлению высокая скученность, антисанитарные условия содержания.

К вирусу наиболее восприимчивы котята, начиная с 3–4-месячного возраста. Источником возбудителя инфекции служат больные кошки, от которых вирус выделяется с фекалиями, мочой и секретами ротоглотки уже со второго по пятый день с момента заражения и передается при непосредственной связи между кошками. Наиболее часто встречающаяся форма передачи вируса – через слюну при укусах во время игр кошек между собой [9].

Проявляется инфекционный перитонит в двух формах. При влажной или выпотной форме ( острое течение ) происходит скопление жидкости в брюшной полости, приводящее к вздутию живота и/или в грудной области, что может привести к плевриту и затруднению дыхания. Причина появления жидкости кроется в том, что вирус FIPV вызывает повреждение и воспаление кровеносных сосудов – так называемый «васкулит», что приводит к утечке альбумина из крови в брюшную или грудную полости [1].

При сухой форме ( хроническое течение ) происходит развитие хронических воспалительных поражений вокруг кровеносных сосудов в различных органах кошки, такой тип называется «пиогранулематозным» воспалением.

Диагностика болезни на данный момент остается сложной. Необходим комплексный подход: сбор анамнеза, проведение клинических методов (осмотр животного, проведение УЗИ, рентгенологическое исследование), а также лабораторных методов исследования (общий и биохимические анализы крови, электрофоретограмма (содержание гамма-глобулинов), ИХА-тест, ИФА, исследование крови, ликвора и жидкости из полостей в ПЦР, проба Ривалта. Но одним из самых достоверных методов служит гистологическое исследование [2; 7].

К сожалению, на сегодняшний день специфического лечения ИПК не существует, а симптоматическое лечение несет только поддерживающий характер, исход будет летальным.

GS-441524 – это экспериментальный антивирусный препарат (ингибитор протеазы), открытый доктором Педерсоном; разработан компанией Gilead Sciences. Часть сложной молекулы органического соединения, которая задумывалась как биопрепарат для борьбы с лихорадкой Эбола и гепатитом С, однако в экспериментах на животных,

Vestnik of Omsk SAU, 2023, no. 4(52) VETERINARY AND ZOOTECHNY в том числе на кошках, было обнаружено его воздействие на вирус FIP. GS-441524 блокирует размножение вируса FIP, а далее срабатывает собственная иммунная система и защищает животное от вируса. Побочных проявлений GS-441524 (за исключением боли при инъекции) до сих пор не установлено [10; 11].

В настоящее время GS-441524 представлен огромным количеством различных лекарственных препаратов (дженериков) китайского подпольного производства, так как все без исключения GS-441524-препараты не лицензированы ни в одной стране и не будут лицензированы в ближайшее время. Распространением этих препаратов преимущественно занимается сообщество FB «Войны ФИП» («FIP warriors»), выпуская их под разными названиями: Mutian, Spark, Brava, Capella, Lucky, FipV. Frikat, Aino, Hero [9; 11; 12]. Препарат доступен в виде инъекций и таблеток/капсул.

Суточная доза GS-441524 рассчитывается в зависимости от веса животного, формы FIP и концентрации лекарственной формы [11].

Один большой минус препарата – стоимость. Например, лечение животного весом 2,5 кг составит за весь курс от 1200$ до 5870$.

Материалы и методы

Исследования проводились в ветеринарной клинике, расположенной в центральном административном округе г. Омска. Деятельность клиники направлена на лечение мелких домашних животных разных видов. За последние три года в ней зарегистрировано 3316 кошек с различными патологиями. Из них 327 – с наличием инфекционных болезней (11,9%). У 1,2% кошек диагностировали инфекционный ринотрахеит (герпесвирусную инфекцию), у 3,4% – калицивирусную инфекцию, у 1,4% – панлейкопению, у 0,9% – лейкемию, у 1% – ВИДК, у 1,8% – коронавирусную инфекцию.

Лабораторную диагностику инфекционных болезней кошек осуществляли в БУ «Омская областная ветеринарная лаборатория» и в лаборатории «VetUnion» г. Москвы.

На базе ветеринарной клиники была разработана и испытана на животных экспериментальная схема лечения кошек с диагнозом ИПК с применением препарата GS-441524.

В опыте по установлению эффективности разработанных схем лечения кошек, больных ИПК, по принципу приближенных аналогов были определены три группы (по 2 кошки в каждой) с клиническими признаками ИПК. Кошки первых двух групп (1-й и 2-й) принадлежали частным владельцам, которые согласились на эксперимент.

Животные опытных групп (n = 4) получали неспецифическое и симптоматическое лечение, направленное на поддержание жизни. В состав терапевтических средств входили «Синулокс» (антибактериальный препарат нового поколения для предупреждения секундарной инфекции), «Преднизолон» (синтетический глюкокортикоидный препарат, обладающий противовоспалительным, противоаллергическим и др. действием), «Цианокобаламин» (витамин В 12 , необходимый при нарушении кроветворения, заболеваниях нервной системы и поражениях кожного покрова), кератопротекторы (препараты, применяемые в офтальмологии при патологиях роговицы), «Гептрал» (гепатопро-тектор, оказывающий желчегонное детоксикационное, регенерирующее, антиоксидантное действие) (табл. 1).

Такое небольшое количество животных в опытных группах было обусловлено небольшим количеством дорогостоящего препарата GS-441524 во второй группе, оплаченного состоятельным владельцем одной из кошек. Владелец второй кошки смог оплатить лишь небольшую часть препарата, необходимого для лечения, в конечном итоге эта кошка погибла.

Vestnik of Omsk SAU, 2023, no. 4(52)

VETERINARY AND ZOOTECHNY

Таблица 1

Характеристика препаратов для лечения кошек с диагнозом инфекционный перитонит (ИПК)

Препарат	Фармакологическая группа
GS-441524	Противовирусный препарат
Синулокс, 50 мг	Антибактериальный комбинированный препарат. Амоксициллин – действующее вещество синулокса – полусинтетический антибиотик группы пенициллина
Цианокобаламин	Витамин В 12 , относится к водорастворимым витаминам группы В
Урсосан, 250 мг	Гепатопротекторное средство, оказывает желчегонное, холелитолитическое, гиполипидемическое, гипохолестеринемическое и некоторое иммуномодулирующее действие
Карсил, 35 мг	Гепатопротекторное средство, активное вещество – расторопши пятнистой плодов экстракт сухой
Раствор Рингера – Локка	Регидратирующее, дезинтоксикационное средство. Действующее вещество – натрия хлорида раствор сложный + декстроза
Преднизолон	Гормональное лекарственное средство, относится к фармакологической группе глюкокортикоидов
Капли Корнерегель	Кератопротектор, действующее вещество – декспантенол, близкий по химической структуре к пантотеновой кислоте (витамину В5)
Гептрал	Гепатопротектор, действующее вещество – адеметионин

В качестве эксперимента животным второй опытной группы, помимо традиционного лечения, был назначен препарат GS-441524, который вводили строго подкожно в одно и то же время (утром) в дозе от 6 до 10 мг/кг массы тела, однократно. Курс лечения составил 84 дня. Согласно наставлению по применению препарата к концу курса его дозировка была повышена до 16 мг/кг.

В контрольной группе кошек лечения не проводили, т.к. владельцы животных отказались от врачебной помощи (табл. 2).

Таблица 2

Схемы лечения кошек первой и второй опытных групп с диагнозом инфекционный перитонит

Первая опытная группа кошек, n = 2	Вторая опытная группа кошек, n = 2	Контрольная группа кошек, n = 2
–	GS-441524 ежедневно утром, в дозе от 6 до 10 мг/кг массы тела, подкожно. Курс лечения – 84 суток	Лечение не проводили
Синулокс по 50 мг 2 раза в сутки, после еды. Курс лечения – 14 суток	Синулокс по 50 мг 2 раза в сутки, после еды. Курс лечения – 14 суток
Преднизолон по 5 мг после еды, утром и вечером в течение 5 суток. Затем коррекция дозы	Преднизолон по 5 мг после еды, утром и вечером в течение 5 суток. Затем коррекция дозы
Цианокобаламин 1 мл подкожно 1 раз в неделю в течение 6 недель	Урсосан 250 мг по 1/6 капсуле 1 раз в сутки. Курс лечения – 30 дней
Кератопротекторы (капли Видисик или Корнерегель) в конъюнктивальный мешок по 3–5 мм 4–6 раз в сутки	Кератопротекторы (капли Видисик или Корнерегель) в конъюнктивальный мешок по 3–5 мм 4–6 раз в сутки
Исследование крови (3-я, 6-я, 9-я неделя) и коррекция лечения
–	Карсил по 35 мг 1 раз в сутки, 30 суток
–	Гептрал 1 раз в день, 400 мг по 1/7 таблетки, утром, за 2 часа до еды. Курс лечения – 14 суток
–	Раствор Рингера – Локка подкожно, 15 мл 2 раза в сутки, 10 суток подряд

В течение срока наблюдения, а именно на 3-й, 6-й и 9-й неделе, у животных исследовали кровь, проводили корректировку лечения.

Vestnik of Omsk SAU, 2023, no. 4(52)                                                VETERINARY AND ZOOTECHNY

Результаты исследований

За период с 2019 по 2021 г. ИПК зафиксирован у 61 кошки, что составило 18,6%. По распространению изучаемая нами патология находится на втором месте после ка-лицивирусной инфекции.

В 2019 г. из 936 кошек ИПК был подтвержден у 20, все кошки с течением времени погибли, смертность – 22/1000 и летальность – 100%. В 2020 г. из 1033 кошек, зарегистрированных в клинике, у 16 голов был выявлен коронавирус и поставлен диагноз ИПК, у 100% зафиксирован летальный исход. В 2021 г. заболеваемость кошек составила 19/1000 голов, зарегистрировано 25 случаев ИПК, смертность – 19/1000, летальность – 92%.

Из сведений, полученных в Омской областной ветеринарной лаборатории, коронавирусную инфекцию у кошек регистрировали ежегодно во всех районах г. Омска, но наибольшее количество случав обнаружено в центральном административном округе города.

Лечение кошек первой опытной группы оказалось неэффективным, гибель – 100%, срок болезни – 21 и 32 сут (табл. 3).

Лечение кошек второй опытной группы с применением противовирусного препарата GS-441524 оказалось эффективным у одного животного. Положительная динамика болезни стала прослеживаться уже на 21 сутки, у животного появился аппетит, начала прибавляться масса тела, шерсть стала приобретать типичную для бенгальской кошки окраску, пятна алопеции заросли шерстью.

Таблица 3

Длительность клинического проявления и исход болезни

Группа животных	Длительность клинического проявления, дней (в среднем)	Исход болезни
		период болезни, сут	погибло, гол
Первая опытная группа	21/32	21/32	2
Вторая опытная группа	21	–/84	1
Контрольная группа	15	15	2

У больных кошек анемии не наблюдали, отмечали лимфоцитопению, снижение альбумин-глобулинового соотношения (0,4 n/а), повышенное содержание общего белка в сыворотке (88,2 г/л), критическое повышение в крови уровня глобулинов – гипергам-маглобулинемия (61,6 g/dl) (табл. 4).

Таблица 4

Динамика результатов анализа крови больной кошки из 2-й опытной группы

Показатель крови	Референсные значения	До лечения	Через 3 нед лечения	Через 6 нед лечения	Через 9 нед лечения
Общий анализ крови
Эритроциты, M/ul	6,54–12,2	8,39	11,1	12,4	11,76
Гематокрит, %	30–52	36,6	51,8	48,3	51
Гемоглобин, g/dl	98–162	101	139	163	164
Лейкоциты, К/ul	5,5–19,5	9,4	9,9	10	8,9
Лимфоциты, %	20–50	16	23	24	24
Нейтрофилы, %	38–75	80	70	60	72
Биохимический анализ крови
Общий белок, g/dl	53–85	88,2	115,1	107,1	87,2
Альбумины, g/dl	25–45	26,6	20,86	29,96	39,03
Глобулины, g/dl	28–45	61,6	–	77,14	48,20
Альб/глоб, n/а	0,5–1,2	0,4	–	0,4	0,8
Общий билирубин, mH/dl	0,15	82,1	24,04	16,9	13,6

Vestnik of Omsk SAU, 2023, no. 4(52)

VETERINARY AND ZOOTECHNY

При анализе крови в период лечения изменения существенно заметны. С 3-й недели лечения произошло повышение лимфоцитов, нейтрофилы снизились до нормы, снижались глобулины и билирубин, к 9-недельному сроку лечения остался высоким общий билирубин и общий белок крови. Гиперпротеинемия наблюдалась через 3 и 6 недель лечения кошки, корректировали лечение, препятствующее обезвоживанию (раствор Рингера – Локка). По-видимому, были отклонения в работе печени и почек, поэтому назначали новые препараты (Карсил, Урсосан) и корректировали питание животного.

В результате эксперимента установлено, что лечение кошек с диагнозом инфекционный перитонит (ИПК) в первой опытной группе с применением традиционной схемы лечения оказалось не эффективным, все кошки погибли. Срок жизни кошек, принимавших лечение, составил 21 и 32 суток.

При лечении кошек во второй опытной группе с применением препарата GS-441524, одна кошка выздоровела, длительность клинического проявления составила 21 сутки, положительный результат был после первой инъекции препарата, курс лечения составил 84 дня. Владельцы второй кошки из этой группы после первых трех инъекций препарата отказались от лечения питомца. Таким образом, кошка погибла спустя 28 суток. В контрольной группе, где не применялось лечение, оба животных погибли через 15 суток (табл. 5).

Таблица 5

Стоимость диагностики и лечения кошек в опытных и контрольной группах

Кол-во животных, гол	Продолжительность болезни в среднем, сут	Выздоровело, гол	Гибель, гол	Лечебная эффективность, %	Стоимость диагностики и курса лечения, руб. на одну кошку
Контрольная группа (n = 2)
2	15/15	–	2	–	2200 руб
Схема лечения 1 (опытная группа № 1)
2	21/32	–	2	–	8000 руб.
Схема лечения 2 с применением препарата GS-441524(опытная группа № 2)
2	84	1	1	50	400 000 руб.

Заключение

По исследованиям ветеринарной клиники центрального административного округа г. Омска за период с 2019 по 2021 г., инфекционный перитонит составил 1,8% в структуре инфекционных болезней кошек. Проявлялся ежегодно спорадически и характеризовался 100%-ной летальностью. Основными методами диагностики служили клинико-эпизоотологический (с учетом ультразвукового и рентгенологического исследований), лабораторный с учетом молекулярно-генетического метода (ПЦР).

При апробации схемы лечения больных кошек с применением противовирусного препарата GS-441524 (производство КНР) установлен положительный результат лечения (выздоровление животного подтверждено отрицательным результатом при исследовании крови в ПЦР), однако длительность терапии (84 сут) и высокая стоимость препарата позволяют рекомендовать его в исключительных случаях – высокоценное животное и финансовая состоятельность хозяев.

Vestnik of Omsk SAU, 2023, no. 4(52)