Проблемы искусственного культивирования трутовика лекарственного

Объекты и методы исследований. В работе использовался штамм Fomitopsis officinalis из коллекции культур грибов лаборатории низших растений Биолого-почвенного института ДВО РАН. Культуру храни- ли при 40С на сусло-агаре, пересевали 1 раз в месяц. Для получения глубинного мицелия лиственничную губку выращивали в колбах Эрленмейера на 250 мл со 100 мл питательной среды на качалке. В работе использовали следующие среды [1, 3]:

• 1)    пивное сусло 4⁰ по Баллингу;

• 2)    глюкозная среда 1: глюкоза – 20 г, NH 4 NO 3 – 3,5, KCl –0,5, K 2 PO 4 – 1, MgSO 4 – 0,5 г, сусло (15⁰ по Баллингу) – 115 мл, вода дистиллированная – до 1 л;

• 3)    глюкозная среда 2: глюкоза – 20 г, NH 4 NO 3 – 3,5, KCl – 0,5, K 2 PO 4 – 1г, MgSO 4 – 0,5 г, сусло (15⁰ по Баллингу) – 115 мл, вода из водопровода –до 1 л;

• 4)    среда с крахмалом (г/л): крахмал – 10,0, мука соевая – 2,0, NH 4 Cl – 2,4, MgSO 4 *7Н 2 О – 0,38;

• 5)    мучная среда с сывороткой (г/л): мука пшеничная высший сорт – 14,0, молочная сыворотка – 10 % по объему, K 2 PO 4 – 1, MgSO 4 *7Н 2 О – 0,38;

• 6)    кукурузно-соевая мука (г/л): соевая мука – 40,0, кукурузная мука – 17,3, KН 2 PO 4 – 0,5;

• 7)    мучная среда (г/л): мука пшеничная высший сорт – 57,3, KН 2 PO 4 – 0,5;

• 8)    глюкозо-пептонная среда (г/л): KН 2 PO 4 – 1,0, MgSO 4 – 1,0, KCl – 0,5г, пептон – 5,0, глюкоза – 30;

• 9)    глюкозная среда 3: глюкоза – 20 г, NH 4 NO 3 – 3,5, KCl – 0,5, K 2 PO 4 – 1, MgSO 4 – 0,5 г, вода дистиллированная – до 1 л.

Математическую обработку результатов исследований проводили с использованием статистических функций Microsoft Excel 2000.

Результаты исследований и их обсуждение. В результате исследований установлено, что на богатых натуральных средах, содержащих соевую, пшеничную или кукурузную муку, молочную сыворотку, мицелиальный рост гриба очень слабый или не наблюдается вообще (табл.). В то же время на синтетических средах с добавкой пивного сусла урожай биомассы достигает 7,1 г/л, что является своеобразным рекордом для лиственничной губки. Поскольку, по данным О.П. Низовской и Н.М. Миловой [3], она относится к медленно растущим видам грибов.

Накопление биомассы мицелия F. officinalis в условиях глубинного культивирования

Обращает на себя внимание тот факт, что при одинаковом составе сред добавка пивного сусла увеличивает выход биомассы мицелия. Интересно и то, что при культивировании на средах, содержащих пивное сусло, биомасса и культуральная жидкость приобретают запах фруктового компота с легким медовым оттенком.

Важнейшими факторами, регулирующими рост и метаболизм высших базидиомицетов в культуре, является температура, рН питательной среды, аэрация [2].

В связи с этим культура трутовика лекарственного выращивалась нами на исследуемых средах при температурах 6–10 и 25–280С. Данные проведенных экспериментов показали, что наибольший выход биомассы при прочих равных условиях обеспечивает температура 25–280С, тогда как при 6–100С увеличения биомассы культуры не наблюдалось (рис.).

сутки

Накопление биомассы мицелия F. officinalis на глюкозной среде 2 при температуре 25 – 28⁰С (1) и 6 – 10⁰С (2)

О.П. Низовская и Н.М. Милова [4] относят лиственничную губку к культурам с высокой оптимальной кислотностью. Однако исследуемый штамм F. officinalis в процессе эксперимента показал активный рост при довольно широком спектре значений рН, от 3,7 до 7,6.

Следует отметить, что в процессе роста культура довольно значительно закисляла среду. Так, при росте на пивном сусле значение рН падало с 6,50 до 3,71, а на среде с крахмалом – с 7,52 до 5,24 (табл.).

Таким образом, наиболее оптимальная среда для глубинного культивирования трутовика лекарственного в лабораторных условиях – глюкозная среда 2 с добавкой сусла и приготовленная на водопроводной воде, имеющая значение рН 5,5–5,8. Рекомендуемая температура культивирования 25–270С.