Профилактика тромбообразования при интенсивной физической нагрузке предварительным приёмом пантогематогена в эксперименте

A.A. Blazhko, ,

I.I. Shakhmatov, ,

S.V. Lisina, ,

V.M. Vdovin, ,

L.A. Obraztsova, ,

Введение. Высокоинтенсивная и продолжительная физическая тренировка может приводить к развитию в организме состояния дистресса, что у системы свёртывания крови и микроциркуляции проявляется в виде повышения риска тромбообразования. Актуальным является поиск способов уменьшения реактивности системы свёртывания крови при стрессе.

Концепция стресса, появившаяся благодаря работам Г. Селье по изучению «общего адаптационного синдрома» [20], в настоящее время значительно расширилась, и её структура включает такие типы, как эустресс (хороший стресс) и дистресс (плохой стресс) [10, 17]. Изучение способов предотвращения патологических реакций со стороны организма при дистрессе, а также механизмов повышения его устойчивости к различным стрессорным факторам достаточно актуально в физиологии на сегодняшний день [1, 6].

Высокоинтенсивные и продолжительные физические нагрузки могут приводить к развитию дистрессорной реакции организма.

Такая реакция может проявляться со стороны сердечно-сосудистой системы увеличением риска внезапной сердечной смерти [9, 19], со стороны системы гемостаза – повышением риска тромбообразования [8], что было показано нами при исследовании влияния 8-часовой нагрузки на показатели системы свёртывания, микроциркуляции и функции эндотелия в эксперименте.

Для того чтобы минимизировать тромботические осложнения при стрессе в виде интенсивной нагрузки, необходимо увеличивать стрессоустойчивость организма и системы гемостаза либо многократными тренировками [3], либо предварительным курсовым приёмом адаптагенов [5]. Так, известно, что курсовой приём пантогематогена, адаптогена животного происхождения способствовал улучшению двигательной активности и координационной функции экспериментальных животных на вращающемся стержне [2]. Однако смогут ли такие изменения показателей системы крови, вызванные предварительным приёмом пантогематогена, нивелировать тром- ботические осложнения при сверхпороговой физической нагрузке, остаётся не изученным.

Цель: оценка действия ежедневного приёма продуктов пантооленеводства, предшествующего физической тренировке, на изменения показателей системы гемостаза и микро-циркуляторного русла при нагрузке высокой интенсивности.

Материалы и методы. Единицами наблюдения были выбраны 60 крыс-самцов линии Вистар массой 220 ± 30 г. Крысы были случайно распределены на 3 группы по 20 крыс. До начала эксперимента крысы содержались 2 недели в виварии в условиях карантина. Все исследования проводились по принципам Директивы Европейского парламента и Совета Европейского Союза 2010/63/ЕС о защите животных, использующихся для научных целей.

Крысы контрольной и экспериментальной групп подвергались навязанному интенсивному бегу в тредбане со скоростью 6–8 м/мин в течение 8 ч. Именно такая нагрузка способствовала появлению состояния тромботической готовности у лабораторных животных в наших прошлых исследованиях [8]. Перед интенсивным воздействием физической нагрузкой крысы экспериментальной группы ежедневно в течение месяца принимали концентрат «Пантогематоген (Лубяньгем)», запатентованный ФГБНУ «Федеральный Алтайский научный центр агробиотехнологий» (г. Барнаул). Концентрат включал кровь и гистолизат половых органов марала. На 100 г массы тела экспериментальных животных использовали дозировку 2 мл. Контрольным животным в течение 30 дней концентрат был заменён на воду такого же объема.

После 8-часовой физической нагрузки у животных контрольной и экспериментальной групп проводилось изучение состояния микроциркуляции на приборе ЛАКК-02 (НПО «Лазма», Россия). Исследование длилось 7 мин, крысы находились под эфирным наркозом. Методом лазерной доплеровской флоу-метрии производился компьютерный анализ колебаний кровотока в отрезках частот от 0,0095 до 0,4 Гц (0,0095–0,02 Гц – эндотелиальные волны; 0,02–0,052 Гц – вазомоторные волны; 0,15–0,4 Гц – дыхательные волны) [7].

По завершении исследования микро-циркуляторного русла у лабораторных животных забирали кровь для определения гематокрита и количества тромбоцитов (гемо- анализатор «Drew 3», США), оценки агрега-цинной функции тромбоцитов (агрегометр «Биола», Россия), показателей плазменного гемостаза, активности антикоагулянтов и фибринолитического потенциала плазмы крови (коагулометр «Минилаб», Россия).

Животным интактной группы не давали пантогематоген, а заменяли его объем водой. Также интактные крысы не подвергались навязанному бегу в колесе.

Полученные экспериментальные данные животных контрольной и экспериментальной групп в виде (Me [25–75 %]), Me – медиана в выборочной совокупности; [25–75 %] – 25-й, 75-й перцентили, сравнивались между собой и с данными интактных крыс. Различия считались статистически значимыми при уровне p < 0,05 (непараметрический метод U-критерий Манна – Уитни).

Результаты и их обсуждение. По результатам, представленным в таблице, видно, что однократная 8-часовая физическая тренировка вызывала в организме животных развитие признаков состояния тромботической готовности, что характеризовалось тромбоцитопенией и увеличением агрегационной функции тромбоцитов на 112 % (р1 < 0,001). Такая реакция состояния сосудисто-тромбоцитарного звена гемостаза свидетельствует о высокой интенсивности тренировки и повышении риска сердечно-сосудистых событий [15, 16]. Также отмечено потребление фибриногена на фоне роста концентрации РФМК и снижение на 33 % фибринолитического и на 36 % антикоагулянтного потенциала крови (р1 < 0,001). Такое изменение в коагулограмме свидетельствует о срыве адаптации со стороны системы гемостаза [12, 13].

Повышение вязкости крови (увеличение гематокрита на 7 % (p1 = 0,004)) при интенсивной физической нагрузке является ещё одним условием формирования состояния тромботической готовности [4] наравне с застойными явлениями в венозной части мик-роциркуляторного русла, о чём свидетельствует повышение амплитуды колебаний дыхательных волн на 25 % (p1 = 0,011). Также со стороны микроциркуляторного русла после нагрузки было отмечено уменьшение амплитуды эндотелиальных волн на 41 % (p1 = 0,002), что может свидетельствовать о снижении продукции оксида азота эндотелием при его дисфункции [18].

Показатели системы гемостаза и микроциркуляторного русла у крыс, подвергшихся 8-часовой нагрузке на 31-й день приёма пантогематогена и воды, и интактной группы животных

Hemostasis and microvascular measurements in experimental animals on Day 31 of supplement intake and intact animals

Показатель Parameter	Интактная группа Intact animals (n = 20)	Контрол. группа, 8-часовая физ. нагрузка после приёма воды Control group, 8-hour physical activity after water intake (n = 20)	Эксперимент. группа, 8-часовая физ. нагрузка после приёма пантогематогена Experimental group, 8-hour physical activity after supplement intake (n = 20)
Тромбоциты, 109/л Thrombocytes, 109/l	557,0 [530,0–591,5]	432,5 [408,0–455,0] р1 < 0,001 (∆1 – 22 %)	542,5 [501,5–596,0] р1 = 0,490 р2 < 0,001 (∆2 + 25 %)
АДФ-агрегация, макс. значения Platelet aggregation, max	28,4 [26,7–29,1]	60,2 [34,5–77,8] р1 < 0,001(∆1 + 112 %)	29,4 [27,4–31,2] р1 = 0,107 р2 < 0,001 (∆2 – 51 %)
РФМК, мг/100 мл Soluble fibrin monomer complexes, mg/100 ml	3,5 [3,3–3,8]	11,5 [10,3–11,5] р1 < 0,001(∆1 + 229 %)	3,8 [3,5–4,5] р1 = 0,094 р2 < 0,001 (∆2 – 77 %)
Фибриноген, г/л Fibrinogen, g/l	2,3 [2,0–2,6]	1,5 [1,1–1,9] р1 < 0,001 (∆1 – 35 %)	2,1 [1,8–2,4] р1 = 0,072 р2 = 0,001 (∆2 + 40 %)
Антитромбин III, % Antithrombin III, %	96,2 [95,3–97,6]	61,2 [56,6–67,0] р1 < 0,001 (∆1 – 36 %)	95,9 [94,7–97,2] р1 = 0,310 р2 < 0,001 (∆2 + 57 %)
Спонтанный фибринолиз, м Spontaneous fibrinolysis, m	535,0 [510,0–555,0]	710,0 [682,5–730,0] р1 < 0,001 (∆1 + 33 %)	550,0 [522,5–587,5] р1 = 0,256 р2 < 0,001 (∆2 – 23 %)
Гематокрит, % Hematocrit, %	35,5 [34,8–36,5]	38,1 [36,3–40,9] p1 = 0,004 (∆1 + 7 %)	35,8 [34,8–36,5] p1 = 0,636 р2 = 0,008 (∆2 – 4 %)
Эндотелиальные волны, пер. ед. Endothelial waves, perfusion units	9,8 [7,2–11,9]	5,8 [5,2–7,4] p1 = 0,002 (∆1 – 41 %)	9,5 [7,6–10,1] p1 = 0,473 р2 < 0,001 (∆2 + 64 %)
Вазомоторные волны, пер. ед. Vasomotor waves, perfusion units	9,8 [7,4–13,7]	4,6 [3,7–6,3] p1 < 0,001 (∆1 – 53 %)	9,1 [7,7–10,9] p1 = 0,561 р2 < 0,001 (∆2 + 98 %)
Дыхательные волны, пер. ед. Respiratory waves, perfusion units	5,7 [4,2–6,9]	7,1 [6,0–8,3] p1 = 0,011 (∆1 + 25 %)	7,0 [5,9–8,5] p1 = 0,011 (∆1 + 23 %) p2 = 0,978

Примечание: n – число наблюдений; РФМК – растворимые фибрин-мономерные комплексы; пер. ед. – перфузионные единицы; ∆1 – статистически значимая разница контрольной и экспериментальной групп с интактными животными при p1 < 0,05; р1 – уровень значимости различий контрольной и экспериментальной групп с интактными животными; ∆2 – статистически значимая разница экспериментальной группы с контрольными животными при p2 < 0,05; р2 – уровень значимости различий экспериментальной групп с контрольными животными.

Note: n – number of observations; ∆1 – significant at p1 < 0.05 between the control, experimental, and intact rats; р1 – level of significance between the control, experimental, and intact rats; ∆2 – significant at p2 < 0.05 between the experimental and control rats; р2 – level of significance between the experimental and control rats.

Исходя из данных в таблице, 30-дневный предварительный приём пантогематогена устранял развитие большинства неблагоприятных признаков тромбообразования у лабораторных животных после интенсивной физической тренировки и приводил значения этих

признаков к значениям интактных животных (р1 > 0,05, кроме показателя «дыхательные волны»).

После физической нагрузки на фоне приёма адаптогена было отмечено лишь замедление кровотока из области микроцирку-

ляции с развитием застойных явлений в венозной системе (повышение амплитуды дыхательных волн в экспериментальной группе по сравнению с интактными животными на 23 % (p1 = 0,011)), как и при стрессорном воздействии без приёма концентрата в контрольной группе (p2 = 0,978).

Такое адаптивное воздействие приёма продуктов пантооленеводства, сдерживающее развитие признаков тромботической готовности при тренировке, возможно, связано с наличием в составе крови марала активных пептидов, цитокинов, активирующих сосудистую стенку, что приводит к усилению выработки

ею оксида азота, тканевого активатора плазминогена (t-PA) и других факторов, препятствующих образованию тромба [11, 14].

Выводы

• 1.    Предварительный курсовой месячный приём продуктов пантооленеводства уменьшает условия для формирования тромбо-образования у экспериментальных животных при интенсивной 8-часовой физической тренировке.

• 2.    Курсовой приём адаптогена животного происхождения не предотвращает развитие застойных явлений в зоне микроциркуляции при интенсивной физической нагрузке.