Прогрессирование миелоидного лейкоза ассоциировано с возникновением новых онкогенных мутаций и изменением экспрессии некоторых регуляторных генов

Результаты. Первоначально у больного ОМЛ (38 % бластных клеток) проводили мультифак-торный ПЦР-анализ наиболее распространенных онкогенных мутаций (n=15), что позволило обнаружить слитный онкоген Bcr-Abl/p190. При этом уровень его экспрессии составил 11 % и 10 % в КМ и ПК, соответственно. ЦГ исследование, включая FISH, подтвердило наличие Ph-хромосомы или хромосомной транслокации t(9;22)(q34; q11), а также отсутствие каких-либо дополнительных хромосомных нарушений. В это же время количественное определение уровней экспрессии онкогена MycN и некоторых регуляторных генов — Spt16, Apobec3A Casc5 — позволило обнаружить, что экспрессия первых 3 мишеней, включая MycN, оказалась выше в 1.2, 1.7 и 2.2 раза, а последнего, напро-тив,ниже в 3.3 раза по сравнению с контрольными образцами (норма). Спустя 1.2 месяца после начала химиотерапии (FLAG+дазатиниб) у пациента была достигнута ПКГ ремиссия и ПМО. При этом уровни экспрессии онкогена MycN и генов-регуляторов вернулись к норме. После выписки пациент продолжал принимать дазатиниб (140 мг) с целью профилактики лейкоза. Через 5 месяцев больного госпитализировали повторно из-за ухудшения состояния. В миелограмме (КМ) было обнаружено 11 % бластов,что подтвердило развитие рецидива. Мультифакторное ПЦР-тестирование позволило обнаружить в КМ слитный онкоген Cbfb-Myh11/A (83.1 %) вместо первоначально выявленного онкогена Bcr-Abl/p190. ЦГ анализ включая FISH, показал наличие хромосомной мутации inv(16)(p13; q22) в 80 % клеток КМ и отсутствие каких-либо дополнительных хромосомных аномалий. Проведение иммунофено-типирования поверхностных CD-маркеров позволило обнаружить в КМ популяцию бластных клеток с аберрантным фенотипом (Cd45dimC D34+CD38+CD117+CD13+CD33+), характерную для ОМЛ. Дополнительный анализ уровней экспрессии генов MycN, Spt16, Apobec3A, Casc5 продемонстрировал их увеличение в КМ в 5.1 4.0, 2.1 и 6.3 раза, соответственно (по сравнению с первоначальными результатами). Следует отметить, что при обнаружении рецидива у пациента также выявили нейролейкоз. В это же время экспрессия MycN, Spt16 и Apobec3A превалировала в ПК по сравнению с КМ. Из-вестно,что повышение экспрессии дезаминазы Apobec3A, как правило, ассоциируется с прогрессией ОМЛ и сопровождается возникновением мутаций (G>A) в онкогене WT1 и его гиперэкспрессией. Ранее увеличенная коэкспрессия Apobec3A и Casc5 была обнару- жена в клетках КМ первичных больных ОМЛ по сравнению с больными ОЛЛ (В-ОЛЛ, Т-ОЛЛ). Что касается повышенной коэкспрессии MycN и Spt16, то впервые она была выявлена у больных с нейробластомой. При этом регулятором онкогена MycN оказался транскрипционный фактор Spt16, ответственный за активацию хроматина. Однако неизвестно, может ли Spt16 выступать в роли модулятора MycN при лейкозе. Что касается настоящего исследования то спустя 1 месяц после начала химиотерапии (GO+HiDAC) у пациента отмечалась устойчивость к лечению: нарастание уровня бластов (50 %)в КМ и одновременное превалирование экспрессии генов MycN (7.2), Сasc5 (22.0) и Spt16 (1.9) в клетках CD34 после сортировки по сравнению с тотальным КМ.

Выводы. Выявлен случай ОМЛ, сопровождающийся возникновением нового лейкозного клона клеток с мутацией Cbfb-Myh11/A и полной утратой прежнего опухолевого клона несущего Bcr-Abl/p190. При этом показано, что активация онкогена MycN, способствующая самообновлению миелоидных предшественников в КМ, ассоциируется с экспрессией генов-регуляторов: Spt16, Apobec3A, Casc5, вовлеченных в клеточную пролиферацию. Таким образом повышение уровней экспрессии названных генов коррелирует с прогрессией миелолейкоза и способствует поддержанию метаболизма ОМЛ с более агрессивным течением.