Распространение и антибиотикоустойчивость патогенных микроорганизмов на птицеперерабатывающем предприятии в зависимости от сезонности
Автор: Юшина Ю.К., Махова А.А., Зайко Е.В., Семенова А.А., Батаева Д.С., Некрасов Р.В.
Журнал: Сельскохозяйственная биология @agrobiology
Рубрика: Ветеринарная санитария и диагностика
Статья в выпуске: 4 т.60, 2025 года.
Бесплатный доступ
В связи с устойчивым ростом российского птицеводства проблема микробиологической безопасности продукции приобретает исключительное значение. Особый контроль требуется в отношении патогенов Salmonella spp., Campylobacter spp. и Listeria monocytogenes , способных вызывать пищевые отравления, при этом перекрестная контаминация с объектов производственной среды птицеперерабатывающих комплексов представляет собой ключевой риск выпуска опасной продукции. Опасность усугубляет передача через производственную среду патогенов, обладающих резистентностью к антибиотикам. В настоящей работе впервые была установлена сезонно-зональная специфика контаминации абиотических объектов патогенными микроорганизмами на птицеперерабатывающем предприятии, выявлена максимальная вероятность обнаружения Campylobacter spp., Salmonella spp. и Listeria monocytogenes в грязной и чистой зонах предприятия в летний период и межсезонье, доминирование Campylobacter jejuni среди патогенов (83 % случаев) и установлена их локализация на оборудовании зон убоя и охлаждения. Показано статистически достоверное снижение факультативно анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ) только в чистой зоне относительно грязной и промежуточной. Показан сезонный дисбаланс: максимальные значения КМАФАнМ было зарегистрировано в межсезонье, тогда как пик выявляемости патогенов пришелся на лето. Цель работы - определение общего количества мезофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов на абиотических объектах производственной среды в зависимости от сезона и выявление патогенных микроорганизмов, чувствительных к антибиотикам. Образцы на птицеперерабатывающем производстве (Московская обл.) были отобраны в разное время года: лето (конец августа 2021 года), зима (конец февраля 2021 года) и межсезонье, осень (конец сентября 2020 года). Методика исследования включала отбор 72 смывов в середине рабочей смены с 12 абиотических объектов, не контактирующих с продукцией, расположенных в грязной, промежуточной и чистой зонах. Детекцию патогенов проводили методом петлевой изотермической амплификации (LAMP) на приборе 3M MDS («3М», США) с последующим микробиологическим подтверждением положительных результатов в соответствии с ГОСТ. Чувствительность выделенных изолятов к антимикробным препаратам определяли диско-диффузионным методом в соответствии с рекомендациями CLSI и EUCAST. Количественный учет КМАФАнМ осуществляли посевом на агар PCA с инкубацией при 30 °C в течение 72 ч. Учитывая ненормальность распределения полученных данных (d = 0,47 > d* = 0,20, критерий Смирнова-Колмогорова), статистический анализ проводили с использованием непараметрических методов: рангового двухфакторного дисперсионного анализа и критерия Дункана для множественного сравнения при уровне значимости a = 0,1. В результате исследования впервые была установлена сезонно-зональная специфика контаминации. Вероятность обнаружения хотя бы одного патогена составила 33 %, при этом по ходу производственного процесса она распределилась как 42 % (грязная зона), 17 % (промежуточная зона) и 42 % (чистая зона), а в зависимости от сезонности - 50 % (лето), 42 % (межсезонье) и 8 % (зима). Ранжирование патогенов по вероятности выявления показало доминирование Campylobacter spp. (17 %), затем Listeria monocytogenes (14 %) и Salmonella spp. (11 %). Campylobacter jejuni преимущественно детектировались в зоне убоя и первичной обработки, Salmonella spp. обнаруживались во всех зонах, включая чистую, а Listeria monocytogenes доминировали в зоне финишной обработки и упаковки. Все штаммы Salmonella spp. проявили резистентность к налидиксовой кислоте, ряд штаммов также показали устойчивость к ко-тримоксазолу, моксифлоксацину, сульфаметоксазолу, тетрациклину. Выявлен атипичный профиль резистентности у штамма Salmonella S_1, проявившего избирательную устойчивость к моксифлоксацину при сохранении чувствительности к другим фторхинолонам, что может быть связано с накопленными мутациями в генах или плазмидах. Анализ антибиотикочувствительности Listeria monocytogenes выявил ограниченную устойчивость, проявлявшуюся преимущественно к цефтазидиму и тетрациклину. При этом один из пяти штаммов оказался чувствительным ко всем антимикробным препаратам, а мультирезистентные фенотипы обнаружены не были. Штаммы бактерий рода Campylobacter проявляли устойчивость к ципрофлоксацину, эритромицину и тетрациклину. Часть исследованных изолятов были определены как мультирезистентные. При оценке КМАФАнМ было показано статистически достоверное снижение показателя только в чистой зоне - (4,16±2,27)×104 КОЕ/см2 относительно грязной (5,23±1,95)×106 КОЕ/см2 и промежуточной (8,88±5,74)×105 КОЕ/см2 зон (р 6 КОЕ/см2 были зарегистрированы в межсезонье. Таким образом, полученные результаты комплексно характеризуют абиотические поверхности птицеперерабатывающих предприятий как скрытые резервуары патогенов и антибиотикорезистентных штаммов, демонстрирующие сложную сезонно-зональную динамику.
Смывы, salmonella spp, campylobacter spp, listeria monocytogenes, кмафанм, антибиотикорезистентность
Короткий адрес: https://sciup.org/142246216
IDR: 142246216 | УДК: 619:614.36:579.63 | DOI: 10.15389/agrobiology.2025.4.739rus
Seasonal patterns and antibiotic resistance of pathogenic microorganisms at a poultry processing plant
Due to the steady growth of the Russian poultry industry, the problem of microbiological safety of products is of exceptional importance Special control is required for the pathogens Salmonella spp., Campylobacter spp. and Listeria monocytogenes, which can cause food poisoning, while cross-contamination from poultry processing facilities is a key risk for the release of dangerous products. The danger is increased by the transmission of antibiotic-resistant pathogens in the production environment. This study is the first to establish the seasonal and zonal specificity of pathogenic microorganism contamination on abiotic surfaces within a poultry processing facility. It detected the highest probability of detecting Campylobacter spp., Salmonella spp., and Listeria monocytogenes in both the dirty and clean zones of the plant during the summer and shoulder seasons, the dominance of Campylobacter jejuni among the pathogens (83 % of cases). Their localization was identified on equipment in the slaughter and cooling zones. A statistically significant reduction total number of mesophilic aerobic and facultative anaerobic microorganisms (Total Viable Count, TVC) was demonstrated only in the clean zone compared to the dirty and intermediate zones. A seasonal imbalance was shown: maximum TVC values were recorded during the shoulder season, while the peak detection of pathogens occurred in summer. The aim of the work was to study the total number of mesophilic aerobic and facultative anaerobic microorganisms on abiotic objects in the production environment depending on the season and to identify pathogenic microorganisms sensitive to antibiotics. Samples at the poultry processing plant (Moscow Province) were collected at different times of the year: summer (end of August 2021), winter (end of February 2021), and the shoulder season, autumn (end of September 2020). The research methodology involved collecting 72 swabs in the middle of the work shift from 12 abiotic surfaces not in contact with the product, located in the dirty, intermediate, and clean zones. Pathogen detection was carried out using loop-mediated isothermal amplification (LAMP) on a 3M MDS device (3M, USA) followed by microbiological confirmation of positive results in accordance with GOST. The sensitivity of the isolated isolates to antimicrobial drugs was determined by the disk diffusion method according to CLSI and EUCAST recommendations. Quantitative accounting of TVC/APC was performed by plating on PCA agar with incubation at 30 °C for 72 hours. Given the non-normal distribution of the obtained data (d = 0.47 > d* = 0.20, Smirnov-Kolmogorov test), statistical analysis was performed using non-parametric methods: two-factor rank analysis of variance and Duncan's test for multiple comparisons at a significance level of a = 0.1. As a result of the study, the seasonally-dependent and zone-specific nature of contamination was established for the first time. The probability of detecting at least one pathogen was 33 %, distributed as 42 % (dirty zone), 17 % (intermediate zone), and 42 % (clean zone) along the production process, and depending on seasonality - 50 % (summer), 42 % (shoulder season), and 8 % (winter). The probability of detecting at least one pathogen was 33%, while during the production process it was distributed as 42 % (dirty zone), 17 % (intermediate zone) and 42 % (clean zone), and depending on the seasonality - 50 % (summer), 42 % (off-season) and 8 % (winter). The ranking of pathogens by probability of detection showed the dominance of Campylobacter spp. (17 %), followed by Listeria monocytogenes (14 %) and Salmonella spp. (11 %). Campylobacter jejuni was mainly detected in the slaughter and primary treatment area. Salmonella spp. were found in all zones, including the clean one, and Listeria monocytogenes was concentrated in the finishing and packaging zone. All Salmonella spp. strains exhibited resistance to nalidixic acid; a number of strains also showed resistance to co-trimoxazole, moxifloxacin, sulfamethoxazole, and tetracycline. An atypical resistance profile was identified in the Salmonella strain S_1 which showed selective resistance to moxifloxacin while remaining susceptible to other fluoroquinolones, which may be associated with accumulated mutations in genes or plasmids. Analysis of the antibiotic susceptibility of Listeria monocytogenes revealed limited resistance, manifested mainly to ceftazidime and tetracycline. One of the five strains was susceptible to all antimicrobials, and multidrug-resistant phenotypes were not detected. Strains of the genus Campylobacter exhibited resistance to ciprofloxacin, erythromycin, and tetracycline. Some of the studied isolates were identified as multidrug-resistant.