Результаты доклинических исследований синтетического аналога «маточного вещества» и «маточного молочка» пчел – 9-ОДК

Актуальность. Среди продуктов пчеловодства особое место занимает маточное молочко – секрет аллотрофических (глоточных и верхнечелюстных) желез рабочих пчел, активно функционирующих у пчел – кормилиц в возрасте от 4-6 до 12-15 дней. Маточное молочко с глубокой древности использовалось с лечебной целью и в период средневековья считалось панацеей от всех болезней. Известно его бактериостатическое и бактерицидное действие. Причем, его антимикробное действие обусловлено, главным образом, наличием в нем 10 – гидрокси – 2Е – деценовой кислоты (10-ГДК, «королевское желе». Это же соединение характеризуется фунгицидными, противоопухолевыми, антибиотическими и антилейкемическими свойствами. Биологическая активность 10-ГДК хорошо согласуется с уникальной биологической ролью целого ряда кислородосодержащих непредельных кислот [1]. Все эти известные положения послужили основой для предположения о потенциально высокой фармакологической активности еще одной 2Е-ненасыщенной кислоты – 9-оксо-2Е-деценовой (9-ОДК) – основного компонента «маточного вещества» медоносных пчел, проявляющего свойства многофункционального ферромона [2].

Целью работы явилось определение параметров острой токсичности 9-ОДК и изучение ее влияние на гематологические показатели животных при длительном применении.

Материалы и методы исследований. Определение параметров острой токсичности осуществляли на белых беспородных мышах и крысах обоего пола с одинаковой живой массой и содержащихся в одинаковых условиях вивария. Изучаемое соединение вводили внутрь в форме водной суспензии. На основании установленных параметров минимальной токсической (ЛД0) и абсолютно токсической (ЛД100) доз методом интегрирования определили значения ЛД16, ЛД84 и среднесмертельную (ЛД50) дозы.

С целью установления антитоксических свойств 9-ОДК и 10-ГДК нами были установлены параметры острой токсичности пестицидов: банвела, дивидента и 2,4-Д для мышей (контроль). В последующем опыт был повторен на мышах, которым за сутки до назначения указанных пестицидов внутрь назначали 9-ОДК и 10-ГДК (опытные группы) в дозе 0,3 мг/кг.

Опыты по изучению хронической токсичности проводились на 100 белых беспородных крысах разделенных на две группы (опытную и контрольную). Животные содержались раздельно. Опытные животные получали внутрь 9-ОДК в дозе 0,3 мг/кг в течение 4 месяцев. Контрольные животные получали дистиллированную воду.

До начала исследований, а также на 30, 60, 90 и 120 сутки исследований у животных контрольной и опытной групп фиксировали изменения живой массы тела, проводили исследование периферической крови (эритроциты, гемоглобин, лейкоциты, лейкоцитарная формула, тромбоциты, время свертывания крови). В конце опыта животных убивали декапитацией, извлекали и взвешивали внутренние органы.

Результаты исследований. При определении параметров острой токсичности нами было установлено, что 9-ОДК при назначении внутрь, согласно ГОСТ 12.1.00-7-76 относиться к 4 классу опасности (малотоксичные вещества) – таблица 1.

1. Параметры острой токсичности 9-оксо-2Е-деценовой кислоты

Вид животного	Доза 9-оксо2Е-деценовой кислоты, мг/кг
	LD 0	LD 16	LD 50	LD 84	LD 100
Белые мыши	9000,0	11300,0	13000,0±919,0	16200,0	20000,0
Белые крысы	12000,0	14576,0	16500,0±879,0	19680,0	22000,0

При изучении антитоксических свойств 9-ОДК и 10-ГДК при остром отравлении животных пестицидами (таблица 2) нами установлена возможность коррекции токсических свойств Банвела, Дивидента и 2,4-Д, параметры токсичности которых увеличиваются следующим образом: ЛД 50 банвела при применении 9-ОДК в 2,8 раза, а при применении 10-ГДК в 2,04 раза; ЛД 50 Диведента – в 2,3 и 1,6 раз; ЛД 50 2,4-Д – в 4,1 и 2,57 раз, соответственно.

При длительном назначении (в течение 4-х месяцев) 9-ОДК крысам в дозе 0,3 мг/кг внутрь их поведение не отличалось от поведения крыс контрольной группы и соответствовало данному виду животных.

Животные опытной группы при этом более быстро прибавляли в массе.

2. Влияние 9-оксо-2Е-деценовой кислоты на параметры острой токсичности при отравлении пестицидами

Группы	Банвел	Дивидент	2,4- Д
9-ОДК	2507,5±241,3	3020,7±301,7	3642,0±105,3
10-ГДК	1808,2±186,5	2050,4±193,2	2291,0±91,0
Контроль	885,0±87,6	1295,0±114,3	891,0±75,1

У крыс, получавших внутрь 9-ОДК, количество эритроцитов в крови существенно не изменилось (Таблица 3), и имеющиеся колебания статистически были недостоверными. Однако у контрольных животных на 30 и 90 дни наблюдалось уменьшение количества эритроцитов (Р < 0,05).

3. Влияние 9-оксо-2Е-деценовой кислоты на гематологические показатели

Группы	Доза, мг/кг	Эритроциты	Лейкоциты	Гемоглобин	Тромбоциты
Исходные данные
опытная	-	6,21 ±0,23	9,86±0,40	104,0±4,79	280,0±15,1
контрольная	-	6,39±0,45	8,75±0,39	103,0±3,51	239,0±10,9
Через 30 дней
опытная	0,3	5,61±0,29	12,6±1,19	85,2±6,9	269,0±15,2
контрольная	-	5,25±0,27	12,95±1,22	84,9±4,7	281,1±17,9
Через 60 дней
опытная	0,3	6,0±0,55	11,25±1,01	77,5±4,53	261,0±12,9
контрольная	-	6,0±0,34	14,9±1,49	95,0±3,3	229,0±19,0
Через 90 дней
опытная	0,3	5,31±0,33	11,6±1,99	84,3±3,2	236,0±19,1
контрольная	-	5,39±0,29	12,43±1,59	87,6±2,3	211,0±27,9
Через 120 дней
опытная	0,3	6,23±0,3	10,55±0,75	81,8±3,1	273,2±27,9
контрольная	-	5,51±0,22	10,62±0,90	84,4±4,59	243,2±20,1

Примечание: Р < 0,05

Уровень гемоглобина у животных, получавших 9-ОДК в дозе 0,3 мг/кг снижался как в опытной, так и контрольной группе, но в контрольной группе это снижение было более отчетливым.

Количество лейкоцитов в опытной группе имело тенденцию к увеличению, однако статистически достоверная разница наблюдалась лишь на 30-й день. В контрольной группе количество лейкоцитов увеличивалось во все сроки наблюдения (Р < 0,05).

В опытной группе крыс, получавших 9-ОДК в дозе 0,3 мг/кг за период наблюдения, уменьшалось относительные количество палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, моноцитов (Таблица 4), отмечено небольшое увеличение лимфоцитов. Подобные изменения обнаружены и в контрольной группе, снижение числа моноцитов на 120-й день статистически достоверно (Р<0,05).

4. Влияние 9-ОДК на лейкоцитарную формулу

Сроки наблюдения	Э	Б	П	С	Л	М
Исходные (опыт)	1,0±0,01	1,0±0,02	4,0±0,9	21,1±2,7	66,9±5,3	6,0±1,5
30 дней	1,0±0,02	0	3,2±0,6	10,1±3,8	69,9±4,12	4,8±0,6
60 дней	0	0	2,2±0,3	21,8±3,9	74,3±4,83	1,6±0,4
90 дней	0	0	3,1±0,9	15,4±2,5	79,5±2,42	1,9±0,7
120 дней	0	0	4,1±0,9	16,7±2,8	77,1±3,3	2,1±0,2
Исходные (контроль)	2,0±0,01	2,0±0,01	5,1±1,1	22,0±2,3	62,3±4,2	6,6±1,2
30 дней	1,0±0,02	1,0±0,02	3,1±0,4	19,5±2,4	65,28±3,9	5,3±0,5
60 дней	0	0	3,1±1,1	20,6±2,4	72,1±2,51	4,2±0,9
90 дней	0	0	2,6±1,4	20,2±1,8	73,0±2,2	4,2±0,1
120 дней	0	0	2,3±1,5	22,1±2,4	73,49±2,3	2,1±0,4

Примечание: Р < 0,05

Количество тромбоцитов в опытной группе не изменялось, а в контрольной группе, на 30-й день наблюдалось увеличение количества тромбоцитов (Р<0,05).

Выводы. 1. 9-ОДК относится к 4 классу опасности согласно ГОСТ 12.1.00.-7-76;  2. 9-ОДК значительно снижает токсические свойства изученных пестицидов; 3) 9-ОДК в дозе 0,3 мг/кг при назначении внутрь в течение 4-х месяцев не вызывает хронической интоксикации.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Циколенко С.П., Мамаев В.П., Ишмуратов Г.Ю. Феромонный препарат «Апимил» при выводе маток //Пчеловодство. -2004. –№3. –С.13. 2. Ishmuratov G., Kharisov R. The sintesis of insect pheromones and the use of preparations obtained on their base in antiresistant strategy //Molecular genetics and ecology of pesticide resistance: Division of Agrochemicals special conference VI. –Big Sky, Montana, USA –1995. –P. 29.

РЕЗУЛЬТАТЫ ДОКЛИНИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ СИНТЕТИЧЕСКОГО АНАЛОГА «МАТОЧНОГО ВЕЩЕСТВА» И «МАТОЧНОГО МОЛОЧКА» ПЧЕЛ – 9-ОДК

Белов А.Е., Исмагилова А.Ф.

Резюме

В статье представлены современные сведения о токсикологчиеских свойствах нового синтетического аналога «маточного вещества» и

«маточного молочка» пчел – 9-ОДК. Установлены его низкая токсичность и возможность использования с целью коррекции при интоксикациях некоторыми пестицидами.

RESULTS OF NONCLINICAL RESEARCHES OF SYNTHETIC ANALOG OF «QUEEN SUBSTANCE» AND «ROYAL JELLY» BEES – 9-ODA

Belov A.E., Ismagilova A.F.