Результаты изучения эмбриотоксического действия нового антигельминтного соединения "К-55" на белых крысах

Паразитозы во всем мире являются основной причиной заболеваемости и смертности среди сельскохозяйственных птиц, домашних, диких и промысловых животных. Они вызывают колоссальные экономические потери в отрасли животноводства. Возбудители паразитозов являются основной причиной снижения всех видов продуктивности и выбраковки животных [7].

Для борьбы с гельминтозами животных используют различные противопаразитарные препараты и соединения, которые относятся к различным группам химических веществ [2]. Нарушение цикла репродукции животных и птиц может являться следствием токсического действия данных лечебных средств, проявляющиеся путем различных дефектов зачатия, вынашивания, развития плодов и отставание растущего организма [5].

Несмотря на широкое бесконтрольное применение тех или иных препаратов в животноводстве, особое место занимает изучение фармако-токсикологических свойств внедряемых новых средств, в том числе оценка эмбриотоксических свойств.

Материал и методы исследований. Соединение «К-55» получено на кафедре высокомолекулярных и элементоорганических соединений Казанского (Приволжского) Федерального Университета доктором химических наук, профессором И.В. Галкиной.

Разрабатываемое лечебное средство представляет собой порошок, имеющий черный цвет, слабый специфический запах, растворимый в воде. Действующим веществом является 5,7-динитро-4,6-бис-(3-нитрофениламино) бензофуроксан и н-гексадецил трифенил фосфоний бромид. Авторами было установлено, что в соответствии с ГОСТом 12.1.007-76 противопаразитарное соединение относится к III классу веществ умеренной опасности [1, 4]. В данной работе изложены результаты по изучению эмбриотоксического действия нового антигельминтного соединения «К-55» на белых крысах.

Исследование эмбриотоксического потенциала соединения «К-55» осуществляли на базе Казанской государственной академии ветеринарной медицины Н.Э. Баумана (ФГБОУ ВО Казанская ГАВМ) в соответствии с «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению фармакологических веществ» [3, 6]. В работе использовали 24 самки белых не линейных крыс с живой массой тела 190230 г. Животных разделили на 2 группы по 12 голов (опытная и контрольная), каждая из которых разделена на 2 подгруппы по 6 голов для удобства содержания и кормления. Предварительно самок белых крыс спаривали с самцами (два эстральных цикла) в соотношении 3:1. Беременными считались самки, у которых во влагалищных мазках выявляли сперматозоиды.

С первого по шестнадцатые сутки исследования крысам опытной группы интрагастрально с применением зонда вводили водный раствор соединения «К-55» в дозе 10 мг/кг, животным контрольной группы - 0,9 % раствор натрия хлорида (объем 3 мл).

На 20-е сутки часть животных подвергали эвтаназии диэтиловым эфиром из каждой группы. После вскрытия крыс изучали их репродуктивные органы – извлекали плоды с маткой, промывали физиологическим раствором и переносили в чашки Петри. Визуально проводили подсчет числа живых и мертвых плодов, желтых тел беременности, мест имплантации, а также определяли пред – и постимплантационную, эмбриональную смертность, массу плода, антропометрические размеры, наличие пороков развития.

Остальную часть животных оставляли для последующего изучения постнатального развития плодов. У самок белых крыс учитывали продолжительность беременности, количество приплода, среднюю длину и массу крысят, отлипание ушной раковины, появление шерстного покрова, прорезывание резцов и открытие глазной щели .

Статистическую обработку результатов исследования осуществляли с использованием метода вариационной статистики. Для возможности сравнения полученных величин применяли t-критериий Стьюдента. Достоверность различий устанавливали на уровне значимости 0,05.

Результат исследований.

Показано, что при применении противопаразитарного соединения самкам крыс, с 1-ого по 16-е сутки исследования физическое состояние оставалось без изменений. Животные были активными, проявляли интерес, реагировали на световые и звуковые раздражители. Аппетит был сохранен. Смертность среди животных не наблюдалась. На 20-е сутки у самок всех групп плодные оболочки были без кровоизлияний, правильно сформированы, амниотическая жидкость была прозрачной, плацента полнокровна (таблица 1).

Число живых плодов на 1 самку в среднем составило 9,4±1,06 в опытной группе, 9,5±1,22 в контрольной, что статистически не различимо. Число желтых тел на 1 самку в опытной группе составило 11,45±0,32, в контрольной группе – 11,18±0,21. При этом показатель предимплатационной гибели в опытной группе составил 11,7 %, в контрольной 9,21 %. Показатель постимплатационной гибели составил 7,02 % в опытной группе, 6,4 % в контрольной. Полученные данные показывают, что общая эмбриональная гибель в опытной группе составила 17,9 %, против 15,02 % в контрольной.

Средняя масса плодов белых крыс составила 2,9±0,33 г, против 3,5±0,17 г у контрольных, а кранио-каудальный размер плодов – 33,01±2,98 см и 35,14±2,36 см соответственно. Полученные результаты показывают, что показатели средней массы и кранио-каудального размера на 20 день исследования при длительном применении были несколько ниже, чем у контрольной группы. Это показывает возможное влияние противопаразитарного препарата на скорость развитие плодов, тем не менее, статистически значимой разницы между группами не выявлено.

Исследованиями после родов установлено, что у животных опытной и контрольной групп различий в уходе за потомством и кормлении не наблюдались. У новорожденных визуально не были выявлены аномалии и уродства.

Продолжительность беременности у животных опытной и контрольной групп составила 21-22 суток. Количество новорожденных крысят всего в помете у самок контрольной группы было 53 (живых 53), в опытной 54 (живых 54). Появление шерсти, отлипание ушных раковин, прорезывание резцов, раскрытие глаз, средняя масса у крысят как в опытной, так и в контрольной группах соответствовали физиологическим значениям и существенной разницы между группами не выявлено. Сохранность на

20-е сутки после родов составила 100%. Однако отмечается тенденция незначительного отставания в росте крысят в постнатальном периоде (таблица 2). На 30 сутки исследования после рождения крысят визуально опытная группа не отличалась от контрольных животных. Крысята обеих групп были активными, с сохранением аппетита и достоверной разницы у животных не было установлено.

Таблица 1 – Результаты исследования вскрытия самок крыс и их приплода при внутрижелудочном введении лекарственного соединения в дозе 10 мг/кг

Таблица 2  – Показатели постнатального развития потомства белых крыс при внутрижелудочном введении лекарственного соединения в дозе 10 мг/кг

Примечание: P≥0,05

Заключение. На основании полученных данных исследований можно заключить, что ежедневное внутрижелудочное введение самкам белых крыс антигельминтного соединения «К-55» в дозе 10 мг/кг с 1-е по 16-е сутки исследования не оказывает отрицательного влияния на физиологическое состояние самок животных, а также эмбриональное развитие плодов.

Резюме

Установлено, что ежедневное внутрижелудочное введение самкам белых крыс антигельминтного соединения «К-55» в дозе 10 мг/кг с 1-е по 16-е сутки исследования не оказывает отрицательного влияния на физиологическое состояние животных, а также эмбриональное развитие плодов. У животных опытной и контрольной групп различия в уходе и кормлении за потомством не наблюдались. У новорожденных визуально не были выявлены аномалии и уродства. На 30 сутки исследования после рождения крысят визуально опытная группа не отличалась от контрольных животных.