Результаты изучения эмбриотоксической активности нового соединения "ДС/16" на белых крысах

Репродуктивная функция – это сложноорганизованная последовательность физиологических процессов, которая протекает, как в организме матери, плода, так и отца. Однако нарушение репродукции может быть следствием даже острого токсического действия некоторых лекарственных средств, которая проявляется различными дефектами зачатия, вынашивания, развития плода и несостоятельностью растущего организма [2].

Разработкой и изучением противо-паразитарных препаратов занимались многие исследователи [1, 3, 4, 6]. Учитывая широкое, не редко и бесконтрольное применение тех или иных противопаразитар-ных препаратов широкого спектра действия как в животноводстве, так и в птицеводстве, важно особое внимание уделять изучению фармако-токсикологических свойств разрабатываемых препаратов, в том числе и определению эмбриотоксиче-ских свойств. В связи с этим изучение эм-бриотоксических свойств у разрабатываемых фармакологических средств является обязательным этапом их доклинической оценки и представляет как практический, так и теоретический интерес. Поэтому основная цель данной работы – оценка действия нового соединения «ФДС» на репродуктивную функцию белых крыс. В связи с тем, что у беспородных белых крыс число спонтанных уродств незначительно, они являются наиболее подходящей моделью для изучения влияния химических веществ на репродуктивную функцию млекопитающих.

Материал и методы исследова- ний. Исследования по изучению эмбрио-токсического действия нового противопа-разитарного соединения «ФДС» проводили на крысах во время беременности. Работа была выполнена в виварии при кафедре эпизоотологии и паразитологии ФГБОУ ВО Казанская ГАВМ им. Н.Э. Баумана. Опыты организовывали в соответствии с методическими указаниями по токсикологической оценке новых препаратов для лечения и профилактики незаразных болезней животных [5]. Лекарственное средства противоакарицидное для животных синтезировано в химическом институте им. А.М. Бутлерова Казанского (Приволжского) федерального университета профессором Галкиной И.В. При изучении эмбриотоксического действия лекарственного средства в опыте использовали две группы белых крыс самок, по 20 животных в каждой, массой тела 200–230 г. Первой группе животных задавали соединения «ФДС», а вторая считалась контрольной и никаких препаратов не получала. Ход исследований заключался в следующем: самок спаривали с интактными половозрелыми самцами, подсаживая последних к самцам в соотношении 2:1. Первым днем беременности считали день обнаружения спермиев во влагалищных мазках самок, подсаженных накануне вечером к самцам, после чего самцов отсаживали. Контроль беременности проводили осмотром мазков из влагалища на 5-10 дни после оплодотворения. С этого дня опытным животным перорально задавали масляный раствор «ФДС» при помощи шприца с зондом в дозе 60 мг/кг, что составляет 1/20

часть от максимальной дозы (LD 50 -1200мг/кг) при интрагастральном введении. При этом масляный раствор задавали однократно половине животных на пятый день, а остальным – на 10-й день беременности. Животным контрольной группы вводили 5,0 мл подсолнечного масла. Каждая группа крыс находилась в отдельных клетках, при этом условия содержания и кормления крыс во время опытов соответствовали зоотехническим и ветеринарносанитарным требованиям. В ходе эксперимента каждый день проводили клиническое исследование животных, обращали внимание на аппетит, состояние кожи и видимых слизистых оболочек, а также реакцию на различные раздражители.

Методом декапитации на двадцатые сутки плодоношения под легким эфирным наркозом произвели умерщвление пятидесяти процентов самок из каждой группы и провели патологоанатомическое исследование, при котором учитывали общую плодовитость, количество желтых тел беременности, количество живых и мертвых эмбрионов.

Результат исследований. Проведенные нами исследования показали, что применение соединения «ФДС» не оказало негативного воздействия на анализируемые показатели. Установлено, что во второй группе подопытных животных эмбриональная смертность была ниже на 4,9 %. Кроме того, введение соединения «ФДС» белым крысам незначительно способствовало снижению показателей смертности до имплантации на 4,3 %, смертность после имплантации составила 2,01 %, соответственно. Данные таблицы 1 указывают, что введение противоакарицидного соединения «ФДС» для животных не способствует нарушению оплодотворения у крыс и при этом токсически не воздействует во время их беременности. Среднее количество желтых тел на 1 самку в 1 группе составило 12,5, а во 2 - 12,1, что практически не считается статистически достоверным различием. При этом нужно отметить, что нормальных зародышей во 2 группе на 1,1 % больше, чем во второй, так как показатель резорбированных плодов в 1 группе составил 7,0 %, во 2-6,8 %.

Таблица 1 –Результаты эмбриотоксического исследования соединения «ФДС» на животных

Таблица 2 –Выживаемость и масса тела молодняка белых лабораторных крыс

Результаты обследования плодов на наличие уродств или каких-либо несоответствий нормальному развитию у белых крыс, как в контрольной, так и в опытной группах не отмечено.

Кроме того, после рождения потомства вели оценку их физического развития в течение месяца, и наблюдали, как за их количеством (живых и мертвых плодов), так и массу тела через 7, 14, 21 и 28 суток (Таблица 2).

У всех подопытных животных в течение опыта аномалий и уродств в развитии не было отмечено. По внешним морфологическим признакам физиологическое развитие крысят 1 и 2 групп не имело значительных различий. Также следует отметить, что органогенез в каждой группе протекал физиологически нормально: на 46 сутки произошло отлипание ушей, на 1415 сутки уже открывались глаза.

В процессе опыта было зафиксировано 3 случая гибели крысят в контрольной группе, и 4 в опытной. В итоге к завершению эксперимента живыми оста-лись– 107 крысят в 1 группе, а в опытной – 109 соответственно. Также следует отметить, что средняя масса крысят в опытной группе была на 4,7 г выше, чем в первой группе, несмотря на то, что изначально в первой группе крысята на 0,24 г весили больше, чем во второй.

Заключение. Таким образом, изучение эмбриотоксического действия показало, что при внутрижелудочном введении противоакарицидного средства «ФДС» в дозе 60 мг/кг (на пятый и десятый дни беременности) не оказывает отрицательного влияния на количество крысят в помете и массу новорожденных крысят. То есть, по исследованным показателям антенатального развития, «ФДС» не обладает эмбрио-токсическим, мутагенным и тератогенным действием.

Резюме

Проведено изучение эмбриотоксической активности соединения «ДС/16» на белых крысах. Установлено, что при интрагастральном введении животным лекарственного средства «ДС/16» в дозе 60 мг/кг (1/20 часть однократной дозы LD 50 ) с 5 по10 сутки беременности, не оказывает существенного влияния на эмбриональное развитие плода в антенатальном и постнатальном периодах.