Роль полиморфизма гена TNF-а в развитии множественной миеломы



РОЛЬ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА TNF-Α В РАЗВИТИИ МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМЫ

А.А. Павлова, Л.Н. Бубнова, Ю.В. Соколова,

С.С. Бессмельцев, И.Е. Павлова

РНИИ гематологии и трансфузиологии, г. Санкт-Петербург, Россия

Множественная миелома (ММ) – опухолевое заболевание системы крови, характеризующееся неконтролируемой пролиферацией клональных плазматических клеток, которая обусловлена хромосомными нарушениями и патологией стромального микроокружения. Нарушения иммунной системы играют существенную роль в процессе созревания и дифференцировки опухолевого клона при развитии этого заболевания. В частности, в патогенезе ММ принимают участие различные цитокины (например, IL-1β, IL-6, TNF-α). Известно, что фактор некроза опухоли- α (TNF-α) индуцирует рост опухолевого клона при ММ, а также наряду с IL-1 и IL-6, является остеокластактивирую-щим фактором и играет важную роль в развитии кост- ной болезни. Такие цитокины как TNF-α, IL-1, IL-3 оказывают существенное влияние на процесс деструкций в костях у пациентов с множественной миеломой. Известно, что точечные мутации и одиночные нуклеотидные замены (SNPs) в регуляторных областях генов цитокинов могут повлиять на транскрипцию и продукцию цитокинов, что в свою очередь может оказать существенное влияние на развитие целого ряда заболеваний, в том числе и злокачественных.

Целью настоящего исследования явилось определение однонуклеотидных полиморфных вариантов (SNP) гена TNF-α (-308G/A, -238 G/A), ассоциированных с развитием ММ у жителей Северо-Западного региона России, а также определяющих тяжесть поражения костной ткани. Обследовано 44 больных ММ, средний возраст пациентов составил 69,3±9,2 лет. Пациенты были разделены на две группы в зависимости от выявленных изменений в костях: 1-я группа (n=20) – с выраженными остеолитическими поражениями костной ткани (III стадия по классификации Durie-Salmon); 2-я группа (n=24) – с проявлениями остеопороза и единичными очагами лизиса (II стадия по классификации Durie-Salmon). Контрольную группу составили 40 здоровых доноров (средний возраст – 49,8 ± 10,1 лет). Все обследованные лица являлись жителями Северо-Западного региона (г. Санкт-Петербург) считающие себя и своих родителей русскими и не связанных кровным родством. Геномную ДНК выделяли из ядросодержащих клеток периферической крови. Определение однонуклеотидного полиморфизма промотор-ного региона гена TNF-α (-308G/A, -238 G/A) проводили с помощью стандартного набора реагентов (Invitro-gen), используя полимеразную цепную реакцию. Визуализацию результатов осуществляли посредством горизонтального электрофореза в агарозном геле.

На основании результатов типирования полиморфных участков гена TNF-α -308G/A у больных ММ и здоровых лиц установлено, что частоты генотипов и аллельных вариантов в общей когорте обследованных больных существенно не отличались от результатов, полученных в контрольной группе. При анализе SNP гена TNF-α -238 G/A различия между пациентами с ММ и здоровыми лицами наблюдались только в генотипе TNF-α -238 AA, частота которого в группе пациентов составила 0,023; тогда как в контрольной группе данный генотип не был выявлен вовсе. Сравнительный анализ результатов, полученных в двух выделенных группах больных, показал, что у пациентов с выраженными литическими поражениями, генотипы TNF-α -308 GG и TNF-α -238 GA встречались чаще, чем у больных с проявлением остеопороза (0,895 против 0,750 и 0,105 против 0,042 соответственно). Генотип TNF-α -308 АА не был обнаружен ни в одной из обследованных групп, тогда как генотип TNF-α -238 АА (0,053; р<0,05) был выявлен только в 1 группе больных с ММ (с выраженными остеолитическими поражениями костной ткани).

Таким образом, полученные нами результаты позволяют расценивать отдельные генотипы TNF-α (-308G/A и -238G/A) как маркеры иммуногенетической предрасположенности к развитию тяжелых остеолитических поражений при множественной миеломе.