Штамм гриба Хк-1 Chaetomium olivaceum Cook et Ellis - продуцент микробиопрепарата для снижения вредоносности фузариоза на сое

Введение . Соя поражается целым комплексом болезней, среди которых особую опасность представляет фузариоз. Болезнь поражает всходы, вызывает корневую гниль, трахеомикозное увядание, гниль бобов и семян. По результатам наших исследований наиболее распространёнными видами, вызывающими фузариоз сои в последние годы являются Fusarium sporotrichiella Bilai (частота встречаемости 40,5 %) , F. oxysporum Schlecht. emend. Snyd. et Hans (28,0 %) и F. moniliforme Sheld var. lactis (Pir. Et Rib.) Bilai (12,5 %) [1].

Для снижения вредоносности болезней необходимо проведение комплексных мероприятий. С целью обеспечения экономической безопасности производства сельскохозяйственных культур необходимо сокращение объёма использования химических средств защиты растений. В качестве альтернативы пестицидам особого внимания заслуживают экологически безопасные микробиопрепараты полифункцио-нального типа действия. Преимущество микробиопрепаратов заключается в высокой экологичности, специфичности действия, способности восстанавливать природные регуляторные механизмы в агроценозах [2].

В ФГБНУ ВНИИМК в лаборатории биометода проводятся исследования по разработке эффективного, экологически безопасного, микробиологического метода снижения вредоносности основных болезней масличных культур. Исследования направлены на:

• -    изыскание, скрининг природных штаммов - антагонистов основных возбудителей болезней подсолнечника, сои и рапса;

• -    изучение биологических особенностей и механизма действия перспективных штаммов - продуцентов микробиопрепаратов;

• -    селекцию перспективных штаммов методом ступенчатого моноклонального отбора;

• -    оптимизацию условий культивирования перспективных штаммов - продуцен тов новых микробиопрепаратов;

• -    разработку элементов технологии производства и хранения различных препаративных форм новых микробиопрепаратов;

• -    разработку элементов технологии применения новых микробиопрепаратов для защиты семян, вегетирующих растений масличных культур и оздоровления почвы.

В основе создания микробиопрепаратов лежит ступенчатый скрининг выделенных микроорганизмов, который включает первичную оценку антагонистической активности штаммов in vitro , далее определение биологической эффективности отобранных штаммов на фоне искусственного заражения патогенами во влажной камере и в почве в лабораторных условиях. Активные штаммы оценивают на фитотоксичность и ростостимулирующую активность к защищаемой культуре. Наработанные опытные партии микробиопрепаратов испытываются в мелкоделя-ночных опытах и производственных условиях [3].

В результате скрининга штаммов антагонистов из коллекции лаборатории биометода к возбудителю фузариоза сои, наиболее распространённому и агрессивному изоляту гриба Fusarium sporotri-chiella Bilai var. poae (Pk.) Wr. emend. Bilai., отобран штамм - продуцент микробиопрепарата гриб Xk-1 Chaetomium olivaceum Cook et Ellis [4; 5].

Известно, что грибы рода Chaetomium обычно встречаются в почве и в органическом компосте, способны разлагать целлюлозу и другие органические вещества, проявляют антагонистические свойства к различным микроорганизмам почвы [6; 7].

Штамм Х k-1 Chaetomium olivaceum

Cook et Ellis выделен из склероциев белой гнили, собранных с поражённого подсолнечника в опытном хозяйстве ВНИИМК в 1985 г. Штамм идентифицирован в Московском государственном университете имени М.В. Ломоносова, депонирован в коллекции культур микроорганизмов ВИЗР под номером 4 и защищён авторским свидетельством № 1369026 от 22.09.1987 г.

На основе штамма Х k-1 Chaetomium olivaceum разработан микробиопрепарат Хетомин в разных препаративных формах, проявляющий высокую фунгицидную активность против возбудителей белой гнили (активно разлагающий склероции) и фомоп-сиса (снижающий запас инфекции на растительных остатках), а также обладающий ростостимулирующей активностью к подсолнечнику и озимому рапсу [8; 9].

В данной работе представлены результаты изучения влияния штамма - продуцента микробиопрепарата Xk-1 Chaetomium olivaceum Cook et Ellis на культуру сои, механизма действия гриба по отношению к возбудителю фузариоза, а также испытания опытных образцов микробиопрепарата на фоне искусственного заражения возбудителем фузариоза в лабораторных условиях и на естественном фоне поражения в поле.

Материалы и методы. Объектами исследования являлись штамм гриба Х k-1 Chaetomium olivaceum, изолят гриба Fusarium sporotrichiella var. poae , соя сортов Вилана и Альба .

Исследование возможного токсического или ростостимулирующего воздействия штамма на культуру сои проводили методом обработки семян опытными образцами биопрепарата и методом погружения подрезанной корневой системы семидневных проростков в суспензию антагониста. Семена сои сорта Вилана обрабатывали водной суспензией (ВС) микробиопрепарата и закладывали в рулоны для проращивания. Сравнивали всхожесть обработанных семян с контролем. Для определения ростостимулирующего влияния определяли длину и массу корня и стебля. Для изучения влияния на увядание сои корни семидневных проро- стков подрезали и погружали в суспензию антагониста и по наличию увядших проростков судили о негативном влиянии штамма на сою [10]. Механизм взаимодействия штаммов-антагонистов с возбудителем фузариоза сои F. sporotrichiella var. рoae изучали с помощью светового микроскопа «Биолам». Двойные культуры высевали на агаризированные среды, разлитые тонким слоем на предметные стёкла. Предметные стёкла помещали во влажную камеру и проводили ежедневные наблюдения за развитием патогена и антагониста [8].

Определение защитного эффекта прорастающего семени сои, а также отработку оптимальных норм расхода опытных образцов биопрепарата на первом этапе проводили во влажной камере, используя метод агаровых блоков [11]. Испытывали нормы применения опытных образцов от 2,0 до 4,0 л/т. Титр опытных образцов микробиопрепарата определяли по методу Коха [12].

Колонизирующую активность перспек тивного штамма - продуцента определяли в перфорированных чашках Петри, используя модифицированные нами методические рекомендации Антоновой и Сауковой [14].

Определение защитного эффекта прорастающего семени сои на фоне искусственного заражения возбудителем фуза - риоза в почве в лабораторных условиях проводили при локальном внесении иноку-люма в рядок одновременно с посевом [15].

Полевые мелкоделяночные испытания опытных образцов микробиопрепарата проводились на ЦЭБ ВНИИМК. Посев сои осуществляли 4-рядной селекционной сеялкой СКС-6А с междурядьями 70 см. Густота стояния 250–300 тыс. раст./га. Площадь делянки 14 м2, повторность трёхкратная. Учёты поражения сои фуза-риозом проводили в динамике. Семена обрабатывали вручную, опытными партиями микробиопрепарата (титр 2,0– 6,3 х107 КОЕ/мл), с нормой расхода препарата 3,0 л/т, рабочей жидкости – 4,0 л/т. Химический эталон – ТМТД (ВСК), 6 л/т. Контроль – семена без обработки. Посевные качества и микрофлору семян сои перед посевом определяли по ГОСТ 12038-84.

Полевые и производственные опыты проводили в двух районах Краснодарского края [16]. Производственный посев сои в рисовом севообороте (ООО «Кубрис» Красноармейского района) осуществляли пропашной пневматической сеялкой СУПН - 8, с междурядьями 70 см. Норма высева 503 тыс. шт. семян на 1 га. Метод проведения опыта полевой, крупноделя-ночный , в четырёхкратной повторности. Площадь одной делянки 126 м 2 , одного варианта – 504 м 2 . Учёт урожая проводили методом снопового анализа.

На Армавирской опытной станции ВНИИМК производственный посев в 2011 г . осуществляли пропашной пневматической 8 - рядной сеялкой «Аист». Площадь делянки 0,75 га. Длина делянки 470 м. Предшественник – озимая пшеница. Уборку проводили комбайном Дон 1500- А, поделяночно. Уход за посевами осуществлялся по разработанной во ВНИИМК технологии. В 2012 г . опыт проводили на сорте Дуар. Площадь делянки составляла 47,6 м 2 , повторность четырёхкратная . Также в 2012 г . проводили обработку вегетирующих растений сои вручную, ранцевым опрыскивателем, с нормой расхода рабочей жидкости 250 л/га.

Результаты и обсуждение. При исследовании возможного токсического и ростостимулирующего воздействия штамма - продуцента микробиопрепарата Xk-1 Chaetomium olivaceum Cook et Ellis на культуру сои установлено, что обработка семян сорта Вилана водной суспензией опытного образца микробиопре парата не оказывает негативного влияния на всхожесть. Более того , отмечено повышение всхожести на 9 % по сравнению с контролем. При изучении влияния суспензии микробиопрепарата на увядание семидневных проростков сои с подрезанными корнями отмечено активное развитие побегов и подрезанных корней как в варианте, так и в контроле.

Установлено ростостимулирующее влияние штамма - продуцента на проростки сои (табл. 1).

Таблица 1

Ростостимулирующее влияние штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum на проростки сои г. Краснодар, ВНИИМК, 2008 г.

Вариант	Длина корня		Масса корня		Длина побега		Масса побега
	см	в % к кон-тролю	г	в % к кон-тролю	см	в % к кон-тролю	г	в % к кон-тролю
Контроль	8,35	-	0,15	-	9,13	-	0,82	-
Xk-1 Ch. oli-vaceum, ВС	10,45	25,2	0,18	20,0	9,76	6,9	0,89	8,5

Наиболее сильное влияние штамм оказывал на длину (25,2 %) и массу корня (20,0 %). Существенное увеличение корневой массы проростков происходило за счет интенсивного развития главного и боковых корней (рис. 1). Влияние штамма на длину и массу стебля также отмечено, но в меньшей степени (6,9 ; 8,5 % соответственно).

Рисунок 1 – Ростостимулирующее влияние штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum на проростки сои (ориг.): а – контроль;

б – вариант

Таким образом, установлено отсутствие негативного влияния штамма - продуцента микробиопрепарата на всхожесть семян сои, а наоборот, выявлен ростостимулирующий эффект на проростки культуры. Наиболее сильное влияние штамм оказывал на длину и массу корня сои.

Механизм взаимодействия штамма - продуцента микробиопрепарата Xk-1 Chaetomium olivaceum и возбудителя фуза-риоза сои Fusarium sporotrichiella var. poae.

При совместном инкубировании антагониста и патогена методом встречных культур в течение первых трёх суток оба гриба росли навстречу друг другу. На четвёртые сутки произошло срастание колоний антагониста и патогена без образования пустой стерильной зоны. На пятые сутки в зоне срастания грибов отмечено изменение пигментации субстрата на территории патогенного гриба с естественного кремового цвета на красно коричневый, что особо заметно с нижней стороны чашки Петри (рис. 2).

Рисунок 2 – Двойная культура антагониста Xk-1 Chaetomium olivaceum с возбудителем фузариоза сои Fusarium sporotrichiella var. poae на пятые сутки инкубации (ориг.):

1 – лицевая сторона чашки Петри ; а – патоген; b – антагонист;

2 – нижняя сторона чашки Петри

При микроскопировании мицелий антагониста легко отличался от мицелия патогена меньшим (примерно в 1,5– 2

раза) диаметром гиф. В двойной культуре гифы антагониста обвивали гифы патогена, но структурных изменений мицелия патогена в первый день срастания не выявлено (рис. 3).

Рисунок 3 – Мицелий возбудителя фузариоза сои F. sporotrichiella var. poae и антагониста Xk-1 Ch. olivaceum на четвёртые сутки совместной инкубации (ориг.): а – гифы патогена ; b – гифы антагониста

На пятые сутки совместного инкубирования гифы антагониста активно оплетали гифы патогена. Кроме того, в образовавшейся зоне наблюдалась агрегация мицелия патогена в тяжи, а также его потемнение, скручивание, деформация и усыхание (рис. 4).

Рисунок 4 – Мицелий возбудителя фуза-риоза сои F. sporotrichiella var. poae и антагониста Xk-1 Ch. olivaceum на пятые сутки совместной инкубации (ориг.): а – гифы антагониста ;

b – агрегация мицелия патогена в тяжи

На седьмые сутки совместной инкубации, по мере дальнейшего взаимодействия, происходила дальнейшая деградация мицелия патогена, гифы сплющивались и поги- бали без разрушения клеточных стенок. Происходило разрастание зоны взаимодействия, где наблюдалось активное формирование плодовых тел антагониста (рис. 5).

Рисунок 5 – Мицелий возбудителя фузариоза сои F. sporotrichiella var. poae и антагониста Xk-1 Ch. olivaceum на седьмые сутки совместной инкубации (ориг.) : а – деградировавший мицелий патогена ; b – гифы антагониста; с – плодовое тело антагониста

На десятые сутки совместного культивирования в зоне взаимодействия наблюдалась гибель большей части воздушного мицелия патогена и активное образование плодовых тел антагониста (рис. 6.1). На субстратном мицелии фузариоза происходило активное формирование хламидоспор (рис. 6.2), тогда как в контроле хламидоспор не было.

Рисунок 6

Рисунок 6 – Мицелий возбудителя фуза-риоза сои F. sporotrichiella var. poae на десятые сутки совместной инкубации с антагонистом Xk-1 Ch. olivaceum (ориг.) : 1 – воздушный мицелий патогена;

• 2 – субстратный мицелий патогена;

а – гифы антагониста; b – разрушенный мицелий патогена ; с – плодовое тело антагониста ; d – хламидоспоры патогена

На пятнадцатые сутки совместного культивирования в зоне срастания наблюдалась полная гибель мицелия и разрушение хламидоспор патогена (рис. 7.1), а в контроле мицелий F. sporotrichiella var. poae имел нормальное развитие и активное спороношение (рис. 7.2).

Рисунок 7 – Мицелий возбудителя фузариоза сои F. sporotrichiella var. poae на пятнадцатые сутки инкубации (ориг.): 1 – совместно с антагонистом Xk-1 Ch. olivaceum : а – разрушенные хламидоспоры патогена , b – гифы антагониста;

2 – без антагониста (контроль): с – макроконидии

Таким образом, в двойных культурах с возбудителем фузариоза штамм гриба - антагониста Хк -1 Chaetomium olivaceum не только препятствовал разрастанию колонии патогена, но и разрушал мицелий, а также останавливал формирование спор.

Факт гибели гиф возбудителя фузариоза без разрушения клеточных стенок и без внедрения в гифы патогена подтверждает антибиотическое действие антагониста, что соответствует проведённым ранее исследованиям с возбудителями белой гнили, фомопсиса и фузариоза подсолнечника [8].

Испытание микробиопрепарата на основе штамма - продуцента Xk-1 Chaetomium olivaceum на фоне искусственного заражения семян сои патогенным изолятом F. sporotrichie l la var. poae

Определение защитного эффекта для прорастающего семени сои, а также отработку оптимальных норм расхода опытных образцов микробиопрепарата на первом этапе проводили во влажной камере, на фоне искусственного заражения возбудителем фузариоза, используя метод агаровых блоков (табл. 2).

Таблица 2

Биологическая эффективность обработки семян сои сорта Ника опытными образцами микробиопрепарата на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum на фоне искусственного заражения Fusarium sporotrichie-lla var. poaе в лабораторных условиях г. Краснодар, ВНИИМК, 2008 г.

Вариант	Норма расхода, л/т	Поражено фузариозом, %	Биологическая эффективность, %
Контроль без инфекции	-	37,3	-
Контроль + инфекция	-	58,6	-
ТМТД, эталон, ВСК	6,0	20,0	65,9
Xk-1 Chaetomium olivaceum , ВС	2,0	43,4	25,9
	3,0	24,0	59,0
	4,0	40,0	31,7

На среднем фоне поражения сои фуза-риозом в контроле 58,6 % максимальная биологическая эффективность микробиопрепарата на основе штамма Х k-1 Chaetomium olivaceum в препаративной форме ВС установлена с нормой расхода 3,0 л/т – 59,0 % при эффективности эталона ТМТД – 65,9 %.

Эффективность биологического агента во многом определяется не только его способностью обеспечивать защиту се- мян, но и колонизировать растущий корень. Установлена средняя колонизирующая активность штамма Xk-1 Chaeto-mium olivaceum (табл. 3).

Таблица 3

Колонизирующая активность штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum на проростках сои сорта Славия, заражённых Fusarium sporo-trichiella var. poae в лабораторных условиях г. Краснодар, ВНИИМК, 2008 г.

Вариант	Здоровые проростки, %	Поражено проростков, %		Биологическая эффективность, %
		жизне-способ-ные	нежиз-неспособные
Контроль без инфекции	1 0 0	0	0	-
Контроль с инфекцией	0	0	1 0 0	-
Xk-1 Chaetomium olivaceum , ВС	5,0	35,0	60,0	40,0

На жёстком (100 %) фоне заражения проростков сои сорта Вилана возбудителем фузариоза в варианте с обработкой семян антагонистом жизнеспособными оказались 40 % проростков при степени поражения корня 0–3 балла, тогда как в контроле с инфекцией жизнеспособных проростков не обнаружено при степени поражения корня 4–5 баллов.

Дальнейший скрининг штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum проведён на фоне искусственного заражения семян сои возбудителем фузариоза в лабораторных условиях в почве (табл. 4).

Таблица 4

Биологическая эффективность обработки семян сои сорта Славия опытным образцом микробиопрепарата на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum на фоне искусственного заражения Fusarium sporotrichiella var. poae в почве г. Краснодар, ВНИИМК, 2008 г.

Вариант	Титр, КОЕ/мл	Норма расхода, л/т	Поражено проростков, %	Биологическая эффективность, %
Контроль без инфекции	-	-	7,8	-
Контроль с инфекцией	-	-	78,7	-
Эталон ТМТД, ВСК	-	6,0	68,0	13,6
Xk-1 Ch. olivaceum , ВС	5,7 х 107	3,0	52,0	33,9

Примечание: ВСК – водно - суспензионный концентрат, ЖК – жидкая культура, ВС – водная суспензия

На высоком фоне поражения фузариозом в контроле 78,7 % биологическая эффективность микробиопрепарата составила 33,9 % при биологической эффективности химического эталона ТМТД, ВСК – 13,6 %.

Таким образом, результаты испытания опытных образцов микробиопрепарата в лабораторных условиях показали, что на среднем фоне поражения сои фузариозом во влажной камере максимальная биологическая эффективность микробиопрепарата установлена с нормой расхода 3,0 л/т – 59,0   %, при эффективности эталона

ТМТД – 65,9 %. На высоком фоне поражения фузариозом в растильнях в почве биологическая эффективность микробиопрепарата составила 33,9 % при биологической эффективности химического эталона ТМТД, ВСК – 13,6 %. Установлена средняя (40,0 %) колонизирующая активность штамма - продуцента микробиопрепарата.

Испытание микробиопрепарата на основе штамма - продуцента Xk-1 Chaetomium olivaceum на естественном фоне зараже ния фузариозом в полевых мелкоделя-ночных опытах.

Испытание опытных образцов микробиопрепарата в мелкоделяночном опыте проводилось на ЦЭБ ВНИИМК. Благоприятные для фузариозного увядания погодные условия способствовали распространению и развитию фузариоза на сое (табл. 5).

Таблица 5

Биологическая эффективность обработки семян сои сорта Альба опытным образцом микробиопрепарата на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum против фузариоза в полевых условиях г. Краснодар, ВНИИМК, 2008 г.

Вариант	Норма расхода, л/т	Поражено фуза-риозом (2+3 балл), %	Биоло-гичес-кая эф-фектив-ность, %	Урожай-ность, т/га	Дополните-льный урожай, т/га
Контроль,б/о	-	49,1	-	1,64	-
ТМТД, ВСК, эталон	6,0	43,8	10,8	1,77	0,13
Xk-1 Ch. olivaceum , ВС	3,0	35,0	28,7	1,79	0 ,15
НСР 05				0,13

Примечание: ВС – водная суспензия, ВСК – водно - суспензионный концентрат

На фоне поражения сои сорта Альба фузариозом в контроле 49,1 % биологическая эффективность обработки семян опытным образцом микробиопрепарата на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum составила 28,7 % при эффективности химического эталона ТМТД 10,8 %. Дополнительный урожай составил 0,15 т/га при дополнительном урожае у эталона ТМТД – 0,13 т/га.

Погодные условия вегетационного периода 2009–2010 гг. оказались неблагоприятными для проявления фузариоза и других болезней. На этом фоне установлено влияние обработки семян сои опытными образцами микробиопрепарата на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum на урожайность. Существенный дополнительный урожай при обработке семян сои сортов Альба и Славия опытными образцами микробиопрепарата был получен в оба года испытаний и колебался от 0,1 5 до 0,35 т/га. Существенный дополнительный урожай при обработке эталоном ТМТД не получен.

Таким образом, в полевых мелкоделя-ночных опытах, в год проявления фуза-риоза на сое, на фоне поражения в контроле 49,1 % биологическая эффективность обработки семян опытным образцом микробиопрепарата на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum составила 28,7 % при эффективности химического эталона ТМТД – 10,8 %. До полнительный урожай составил 0,15 т/га, у эталона ТМТД – 0,13 т/га. При неблагоприятных условиях для проявления фуза-риоза и других болезней установлено положительное влияние обработки семян сои опытными образцами микробиопрепарата на урожайность культуры за счёт снижения семенной и почвенной инфекции, а также ростостимулирующего действия штамма - продуцента .

Производственные испытания лаборатор ных образцов микробиопрепарата на ос нове штамма - продуцента Xk-1 Chaeto- mium olivaceum.

Полевые и производственные испытания лабораторных образцов микробиопрепарата на основе штамма - продуцента Xk-1 Chaetomium olivaceum проведены в ООО «Кубрис» Красноармейского района и на Армавирской опытной станции ВНИИМК в 2011–2012 гг. На фоне отсутствия поражения посевов сои фузариозом и другими болезнями установлено положительное влияние обработки семян микробиопрепаратом на полевую всхожесть за счёт снижения семенной и почвенной инфекции, а также на урожайность (табл. 6 – 8).

В ООО «Кубрис» микробиопрепарат применяли совместно с жидким инокулянтом Нитрофикс, Ж. Полевая всхожесть семян сои, обработанных микро биопрепаратом, составила 73,2 – 75,2 %, что не уступало химическому эталону ТМТД и превышало контрольную на 24,1 –26,1 %. При обработке семян Нитрофиксом всхожесть семян сои была ниже, чем в контроле (табл. 6).

Таблица 6

Влияние обработки семян сои сорта Вилана опытными образцами микробиопрепарата на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum на всхожесть и урожайность

Красноармейский район, ООО «Кубрис», 2011 г.

Вариант	Норма расхода, л/т	Всхожесть, %	Урожай-ность, т/га	Дополнительный урожай, т/га
Контроль	-	49,1	1, 4 4	-
ТМТД, ВСК, эталон +Нитрофикс, Ж	6,0+6,0	73,6	1,72	0,28
Нитрофикс, Ж	6,0	4 4,3	1,40	0
Xk-1 Ch. olivaceum , ВС	3,0	73,2	1,58	0,14
Xk-1 Ch. olivaceum , ВС + Нитрофикс, Ж	3,0+6,0	75,2	1,74	0,30
НСР 05			0,21

Примечание: ВС – водная суспензия, ВСК – водно - суспензионный концентрат; Ж – жидкий инокулянт

Установлено положительное влияние обработки семян сои опытными образцами микробиопрепарата и эталоном на урожайность. Дополнительный урожай в вариантах с микробиопрепаратом составил 0,14–0,30 т/га, с эталоном – 0,28 т/га. При этом в варианте с обработкой семян одним инокулянтом Нитрофикс, Ж дополнительного урожая не получено, а в варианте с комплексной обработкой микробиопрепаратом и инокулянтом он составил 0,30 т/га, что говорит о возможном эффекте синергизма.

На Армавирской опытной станции ВНИИМК в 2011 г . микробиопрепарат на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum испытывали только при обработке семян сои сорта Альба (табл. 7).

Таблица 7

Влияние обработки семян сои сорта Альба опытными образцами микробиопрепарата на основе штамма Xk-1Chaetomium olivaceum на всхожесть и урожайность

Армавирская ОС ВНИИМК, 2011 г.

Вариант	Норма расхода, л/т	Всхожесть, %	Урожайность, т/га	Дополнительный урожай, т/га
Контроль	-	52,7	1,80	-
ТМТД, ВСК, эталон	6,0	75,5	1,80	0
Xk-1 Ch. olivaceum , ВС	3,0	61,1	1,97	0,17

Примечание: ВС – водная суспензия, ВСК – водно - суспензионный концентрат

Максимальная всхожесть семян отмечена в варианте с химическим эталоном ТМТД (75,5 %), что превышало контроль на 22,8 %. Это связано с более сильным поражением семян сои бактериозами (24,0 %) и незначительным поражением фузариозом совместно с бактериозами (5,0 %). В варианте с микробиопрепаратом всхожесть семян также была выше, чем в контроле (61,1 %) , и превышала контроль на 8,4 %. Установлено ростостимулирующее и защитное действие микробиопрепарата – дополнительный урожай составил 0,17 т/га при урожайности в эталоне равной контролю.

В 2012 г . испытывали комплексную обработку микробиопрепаратом на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum семян и вегетирующих растений (табл. 8).

Таблица 8

Влияние обработки семян и вегетирующих растений сои сорта Дуар опытными образцами микробиопрепарата на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum на всхожесть и урожайность

Армавирская ОС ВНИИМК, 2012 г.

Вариант	Норма расхода, л/т	Всхожесть, %	Урожай-ность, т/га	Дополни-тельный урожай, т/га
Контроль	-	53,0	1,38	-
Xk-1 Ch. olivaceum , ВС, обработка семян	3,0	62,5	1,52	0,14
Контроль	-	52,9	1,28	-
Xk-1 Ch. olivaceum , ВС, обработка семян + обработка вегетирующих растений	3,0+3,0	63,0	1,45	0,17

Примечание: ВС – водная суспензия

Всхожесть семян в вариантах с микробиопрепаратом превышала контроль на 9,5 –10,1 % и составила 62,5– 63,0 %. Установлено ростостимулирующее и защитное действие микробиопрепарата – дополнительный урожай составил 0,14– 0,17 т/га. При этом обработка семян и вегетирующих растений увеличивала дополнительный урожай по сравнению с обработкой только семян на 0,03 т/га.

Таким образом, производственные испытания, проведённые в двух районах Краснодарского края, показали, что на фоне отсутствия поражения сои фузарио-зом и другими болезнями установлено положительное влияние обработки семян микробиопрепаратом на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum на урожайность за счёт снижения семенной и почвенной инфекции, а также ростостиму лирующего действия.

В лабораторных условиях было доказано ростостимулирующее влияние штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum на проростки сои. Установлено наиболее сильное влияние на длину и массу корня. Проведённые полевые наблюдения в ООО «Кубрис» показали явный ростостимулирующий эффект микробиопрепарата на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum на культуру сои (рис. 8).

Рисунок 8 – Ростостимулирующее влияние микробиопрепарата на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum на растения сои: а – контроль; б – вариант

Проявившись на стадии проростков, данный эффект сохранялся вплоть до фазы цветения растений сои, что показывает пролонгированный период действия данного микробиопрепарата.

Выводы. 1. Обработка семян сорта Ви-лана водной суспензией опытного образца микробиопрепарата на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum не оказывает негативного влияния на всхожесть, а способствует её повышению на 9 % по сравнению с контролем.

• 2.    Установлено ростостимулирующее влияние штамма - продуцента на проростки сои. Наиболее сильное влияние штамм оказывал на длину (25,2 %) и массу корня (20,0 %).

• 3.    В двойных культурах с возбудителем фузариоза штамм гриба - антагониста Хк -1 Chaetomium olivaceum препятствовал разрастанию колонии патогена, разрушая мицелий и снижая формирование спор. Антибиотическое действие антагониста подтверждается гибелью гиф возбудителя фузариоза без разрушения клеточных стенок и без внедрения в гифы патогена.

• 4.    Во влажной камере на среднем фоне искусственного заражения сои возбудителем фузариоза ( 58,6 %) макси

• 5.    В растильнях с почвой на высоком фоне поражения фузариозом (78,7 %) биологическая эффективность микробиопрепа-

• рата составила 33,9 %, тогда как химического эталона ТМТД, ВСК – 13,6 %.

• 6.    В лабораторных условиях на жёстком (100 %) фоне заражения сои возбудителем фузариоза установлена средняя колонизирующая активность штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum . В варианте с обработкой семян антагонистом жизнеспособными оказались 40 % проростков при степени поражения корня 0–3 балла, тогда как в контроле с инфекцией жизнеспособных проростков не обнаружено при степени поражения корня 4–5 баллов.

• 7.    В полевых мелкоделяночных опытах, в год проявления фузариоза на сое, на фоне поражения в контроле 49,1 % биологическая эффективность обработки семян опытным образцом микробиопрепарата на основе штамма Xk-1 Chaeto-mium olivaceum составила 28,7 % при эффективности химического эталона ТМТД 10,8 %. Дополнительный урожай составил 0,15 т/га, у эталона ТМТД – 0,13 т/га.

• 8.    В производственных опытах в двух районах Краснодарского края, на фоне отсутствия поражения сои фузариозом и другими болезнями , установлено положительное влияние на урожайность предпосевной обработки семян микробиопре паратом на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum за счёт снижения семенной и почвенной инфекции, а также ростостимулирующего действия штамма - продуцента.

• 9.    Проведённые полевые наблюдения в ООО «Кубрис» показали явный ростостимулирующий эффект микробиопрепарата на основе штамма Xk-1 Chaetomium olivaceum на культуру сои. Проявившись на стадии проростков, данный эффект сохранялся вплоть до фазы цветения растений сои, что указывает на пролонгированный период действия данного микробиопрепарата.

мальная биологическая эффективность микробиопрепарата установлена с нормой расхода 3,0 л/т – 59,0 % при эффективности эталона ТМТД – 65,9 %.