Сочетание полиморфных аллелей генов рецепторов цитокинов CCR5, CCR2, цитокинов IL6 и SDF1 у реципиентов и доноров костного мозга: анализ ассоциации с посттрансплантационными событиями

Введение. После аллогенной трансплантации костного мозга (ТКМ)в организме реципиента сосуществуют вместе клетки реципиента и донора. Рецепторы на поверхности стволовых клеток, на клетках крови реципиента, ферменты, цитокины и хемокины, продуцируемые этими клетками после ТКМ,имеют донорское происхождение, в то время как белки, продуцируемые другими тканями, синтезируются генами реципиента. Донор и реципиент могут различаться любыми полиморфными аллелями, кроме основных HLA-аллелей. В последние годы в литературе появились работы показывающие, что наличие определенных полиморфизмов в генах TNF-alpha, IL-1alpha IL-1Ra, IL-4 у реципиентов и доноров костного мозга оказывает влияние на постранспланта-ционные события,такие как возникновение реакции трансплантат против хозяина (РТПХ) тяжесть протекания этой реакции, продолжительность безрецидивного периода, инфекционные осложнения. В данной работе мы исследовали полиморфизмы рецепторов CCR2 и CCR5, экспрессирующихся на поверхности моноцитов,макрофагов и лимфоцитов — клеток, развивающихся из донорского костного мозга, и лигандов SDF1 и IL-6, секретирующихся клетками реципиента,рецепторы для

которых находятся на поверхности клеток донорского костного мозга.

Цель . Исследование возможной связи сочетаний полиморфных аллелей генов CCR5-delta 32, CCR2–64I, SDF1–3›A, IL-6~<572 C/G в парах реципиент/донор с общей выживаемостью временем восстановления гемопоэза, риском возникновения РТПХ и инфекционными осложнениями у пациентов после ТКМ.

Материалы и методы . В исследование включены 43 пациента НМИЦ гематологии в возрасте от 18 до 64 лет (медиана 32 года), 13 мужчин и 30 женщин,после аллогенной ТКМ. Распределение по диагнозам следующее:26человек с ОМЛ, 9 человек с ОЛЛ, 3 — с апластической анемией, 2 — с МДС, 2- с ХМЛ и 1 — с ХЛЛ. Образцы ДНК, выделенной из крови доноров и реципиентов до ТКМ,проанализировали на наличие полиморфных аллелей CCR5-delta 32(rs333) CCR2–64I(rs1799864), SDF1–3›A(rs1801157) IL6–572 C/G (rs1800796). Аллель-специфич-ную ПЦР проводили с праймерами и флюоресцентными пробами TaqMan собственного дизайна. Результаты генетического анализа были сопоставлены с клиническими данными. Для статистического анализа использовали лицензионное программное обеспечение SAS.

Результаты. По каждому исследуемому полиморфному аллелю когорта пациентов была разделена на 4 группы: 1 — нет мутантных аллелей у донора и реципиента;2 — одинако- вое количество мутантных аллелей у донора и реципиента; 3 — у донора меньше мутантных аллелей, чем у реципиента (0 vs 1, 0 vs 2, 1 vs 2); 4 — у донора больше мутантных аллелей,чем у реципиента. Группы сбалансированы по возрасту, полу, диагнозу, стадии заболевания и источнику трансплантата. Для полиморфных аллелей CCR5-delta 32, SDF1–3›A, IL-6~<572 C/G не было найдено связи с общей выживаемостью временем реконституции, риском развития РТПХ и инфекционными осложнениями до 30 дня после ТКМ. Однако для группы пациентов в которой у донора было больше мутантных аллелей гена CCR2–64I, чем у реципиента, восстановление гемопоэза происходило медленнее, чем в остальных группах (p<0.0001). Для этой же группы была выявлена повышенная частота инфекционных событий с 30 по 120 день после трансплантации (р<0,0016): 91 % (10 из 11 пациентов) против 22–50 % (среднее 25 %, 8 из 32 пациентов в остальных группах).

Выводы . Сниженные темпы восстановления гемопоэза и повышенная частота инфекционных осложнений у реципиентов после ТКМ могут быть связаны с приобретенными при трансплантации полиморфными аллелями гена CCR2. Исследование несовпадения полиморфных аллелей генов цитокинов и рецепторов цитокинов у донора и реципиента в перспективе может быть использовано для прогнозирования осложнений после ТКМ.