Соотношение субпопуляций моноцитов у пациентов с острым инфарктом миокарда и сахарным диабетом 2 типа

Острый инфаркт миокарда (ОИМ) приводит к развитию системной воспалительной реакции (СВР), связанной с выбросом цитокинов и инфильтрацией лейкоцитами зоны инфаркта. Моноциты служат пусковым механизмом воспалительной реакции [1]. В 1989 г. было установлено, что популяция моноцитов неоднородна [2]. В последующие годы проводилось исследование субпопуляций моноцитов и функций, которые они выполняют. Были выделены две группы в зависимости от способа активации: классические моноциты 1 типа (Мон1) и моноциты 2 типа, активируемые по альтернативному пути (Мон2) [3]. Мон1 экспрессируют СD14 и не экспрессируют CD16 на своей поверхности – моноциты CD14++CD16-. Они вырабатывают большое количество провоспалитель-ных цитокинов (ИЛ-1, ИЛ-6 и др.), проявляют высокую фагоцитарную активность и, таким образом, обладают высокой цитотоксичностью. В их задачи входит разрушение патогенных микроорганизмов и злокачественных клеток. Им противопоставлены Мон2 (CD14dimCD16++), которые выделяют противовоспалительные цитокины (ИЛ-10) и факторы роста, стиму- лируют процессы регенерации. Баланс этих двух систем важен при восстановлении поврежденных тканей организма. Пул моноцитов активируется при развитии ОИМ. Течение ОИМ, процесс рубцевания и постинфарктного ремоделирования зависит от лейкоцитов, цитокинов и хемоки-нов, которые могут оказывать как благоприятное, так и негативное влияние [3, 4, 5, 6]. Уровень моноцитов 2 типа коррелирует с тяжестью течения ОИМ и неблагоприятным прогнозом у пациентов после ОИМ [1]. У пациентов с ОИМ, поступающих с острым коронарным синдромом с подъемом сегмента ST кардиограммы (ОКСпST), трансмуральное повреждение миокарда, как правило, связано с тотальным тромбозом инфаркт-ассоциированной артерии (ИАА), в отличие от пациентов с ОКС без стойкого подъема сегмента ST кардиограммы (ОКСбпST). Более тяжелое поражение миокарда у пациентов с ОКСпST, может приводить к более выраженной СВР по сравнению с пациентами с ОКСбпST [7].

Сахарный диабет 2 типа (СД2) является одним из факторов риска развития ОИМ и ассоциирован с худшим прогнозом у пациентов этой группы. Хроническая гипергликемия оказывает негативное влияние на иммунную систему, приводит к дисбалансу в её структуре. По результатам ряда исследований установлено, что у пациентов с СД2 повышена активность моноцитов и провоспалительных цитокинов, включая ФНО-а и ИЛ-6 [8, 9, 10, 11].

Материалы и методы

В исследование был включен 71 пациент, поступивший в региональный сосудистый центр г.Санкт-Петербурга с диагнозом ОИМ. Все пациенты были проинформированы о проводимом исследовании и подписали письменное информированное согласие.

Определение уровня моноцитов и циркулирующих эндотелиоцитов проводилось методом цитофлоуметрии на проточном цитометре FC500 и на гематологическом анализаторе LH750 Beckman Coulter. Для анализа использована панель Beckman Coulter CytodiffТМ, включающая 6 моноклональных антител CD36-FITC, CD2-PE,

CD294-PE, CD19-ECD, CD16-PC5, CD45-PC7. Анализ проводился на первые, третьи и четырнадцатые сутки течения ОИМ. Для оценки соотношения провоспалительных и противовоспалительных моноцитов определяли отношение количества Мон2 (CD16+) к Mон1 (CD16-) – Мон2/Мон1, а также содержания Мон2 к общему количеству моноцитов (Мон2/Мон общ.).

Статистическая обработка проводилась с помощью пакета STATISTICA 10.0. Для сравнения средних показателей использовали непараметрические статистические методы (критерий Манна-Уитни).

Результаты исследования

В группу исследования вошли 23 женщины и 48 мужчин. Средний возраст женщин составил 73,35 (64; 79,5) лет, мужчин – 64,6 (57; 74), p=0,002. Пациенты были разделены на две группы. В 1 группу вошли 33 пациента с ОИМ, госпитализированных с ОКСпST, а во 2 группу – 38 пациентов с ОИМ, госпитализированных с ОКСбпST. Всем пациентам была выполнена диагностическая коронарография. По данным коронарографии у 31 пациента с ОКСпST был выявлен тромбоз инфаркт-связанной артерии с тотальной окклюзией и у 2 пациентов – пристеночный тромбоз. Диагноз СД2 был установлен у 36 пациентов.

При оценке динамики уровня моноцитов и их субпопуляций было установлено, что средний уровень моноцитов, Мон1 и уровень Мон2 в обеих группах сопоставим на 1-е и 3-и и 14-е сутки ОИМ. При этом у пациентов с ОКСбпST отношение Мон2/Мон1 у пациентов с ОКСбпST было выше, чем у пациентов с ОКСпST: в 1-е сутки 0,09(0,08; 0,10) vs 0,07(0,04; 0,09), p=0,03; на 3-е сутки 0,11(0,08; 0,14) vs 0,09(0,058; 0,12), p=0,07; на 14-е сутки 0,10(0,07; 0,14) vs 0,07(0,05; 0,09), p=0,04. Также отношение числа Мон2 к общему количеству моноцитов у пациентов с ОКСбпST было выше по сравнению с пациентами с ОКСспST: 7,98 (7,58; 9,25) vs 6,17(3,93; 8,38), p=0,03, в первые сутки; 10,10 (7,23; 12,51) vs 8,39(5,47;10,7), p=0,08, на 3-е сутки; 8,79 (6,28; 12,00)vs6,6(5,09;8,19), p=0,04, на 14-е сутки (табл. 1).

Таблица 1. Динамика уровня лейкоцитов, моноцитов и их субпопуляций у пациентов с

ОКС

Показатель	ОКСпST (n=33)	ОКСбпST (n=38)	р
Лейкоциты 1 сут, *109/л	9,5(8,2;13)	11,5(8,8;13,3)	0,59
Лейкоциты 3 сут, *109/л	8,5(6,9;10)	9(7,1;10)	0,52
Лейкоциты 14 сут, *109/л	8,4(6,5;9,4)	7,85(6,5;8,8)	0,58
Мон1 (CD16-) 1 сут., кл/мкл	683,75(433,71;945,46)	804,87 (667,68; 904,05)	0,35
Мон1 (CD16-) 3 сут., кл/мкл	556,83(460,56;724,43)	700,34 (515,04; 815,85)	0,29
Мон1 (CD16-) 14 сут., кл/мкл	517,65(413,66;662,55)	592,91(459,00; 658,80)	0,34
Мон2 (CD16+) 1 сут., кл/мкл	49,29(40,18;67,98)	41,53(31,98; 89,70)	0,53
Мон2 (CD16+) 3 сут., кл/мкл	58,93(45,14;93,6)	59,509 (43,55; 90,21)	0,83
Мон2 (CD16+) 14 сут., кл/мкл	39,5(19,95;59,64)	53,70(36,08; 73,96)	0,07
Мон общ. 1 сут, Кл/мкл	726,25(470,92;991,38)	844,88 (699,66; 945,87)	0,38
Мон общ. 3 сут, Кл/мкл	613,41(503,1;859,5)	741,08(586,24; 901,80)	0,35
Мон общ. 14 сут, Кл/мкл	564,3(449,78;681,45)	658,56 (483,30; 758,10)	0,21
Мон2/Мон1- 1 сут	0,07(0,04;0,09)	0,09(0,08; 0,10)	0,03
Мон2/Мон1- 3 сут	0,09(0,058;0,12)	0,11(0,08; 0,14)	0,07
Мон2/Мон1-14 сут	0,07(0,05;0,09)	0,10(0,07; 0,14)	0,04
Мон2/Мон общ. 1 сут.	6,17(3,93;8,38)	7,98 (7,58; 9,25)	0,03
Мон2/Мон общ. 3 сут.	8,39(5,47;10,7)	10,10 (7,23; 12,51)	0,08
Мон2/Мон общ.14 сут.	6,6(5,09;8,19)	8,79 (6,28; 12,00)	0,04

• У больных СД 2 из 1 группы и больных

СД 2 из 2 группы средние уровни Мон1 и

Мон2, отношения Мон2/Мон1 и

Мон2/Мон общ. на 1-е, 3-е и 14-е сутки

ОИМ не различались. В 1 группе больных у пациентов с СД 2 типа и пациентов без нарушений углеводного обмена показате- ли Мон1 и Мон2 в 1-е, 3-е и 14-е сутки ОИМ оставались сопоставимыми. Во 2 группе больных у пациентов без СД2 отношения Мон2/Мон1 и Мон2/Мон общ. на 14-е сутки были выше по сравнению с пациентами с СД2 (табл. 2).

Таблица 2. Соотношение субпопуляций моноцитов у пациентов с ОКС в зависимости от наличия СД2

Показатель	Сахарный диабет		р1	Без сахарного диабета		р2	р3	р4
	ОКСпST (n=22)	ОКСбпST (n=14)		ОКСпST (n=11)	ОКСбпST (n=24)
Мон2/Мон1-1 сут	0,08 (0,05;0,09)	0,09(0,06;0,09)	0,23	0,09(0,05;0,12)	0,1(0,08;0,12)	0,26	0,81	0,25
Мон2/Мон1-3 сут	0,10 (0,07;0,13)	0,11(0,09;0,13)	0,12	0,1(0,08;0,16)	0,14(0,08;0,17)	0,46	0,77	0,64
Мон2/Мон1-14 сут	0,09 (0,06;0,12)	0,09(0,06;0,13)	0,64	0,07(0,06;0,1)	0,12(0,09;0,17)	0,01	0,12	0,19
Мон2/Мон общ.-1 сут.	7,68 (4,75;8,28)	7,9(5,855;8,39)	0,23	7,86(4,58;10,66)	9,25(7,68;10,66)	0,26	0,82	0,24
Мон2/Мон общ.-3 сут.	9,10 (6,57;11,18)	9,93(7,86;11,7)	0,12	8,72(7,22;13,43)	12,08(7,21;14,5)	0,46	0,77	0,64
Мон2/Мон общ.-14 сут.	7,90 (5,40;10,56)	8,02(5,57;11,43)	0,62	6,91(5,57;9,19)	10,55(8;14,74)	0,01	0,12	0,19

Примечание: р1 – при сравнении между группами пациентов с СД2: с ОКСпST и с ОКСбпST; р 2 – при сравнении между группами пациентов без СД2: с ОКСпST и с ОКСбпST; р 3 – при сравнении пациентов с ОКCпST: с и без СД2; р 4 – при сравнении пациентов с ОКСбпST: с и без СД2

Обсуждение

Результаты настоящего исследования подтверждают, что у пациентов с тромбозом ИАА увеличивается количество моноцитов с провоспалительными свойствами.

Сопутствующая гипергликемия у пациентов с ОКСпST не оказывает дополнительного влияния на отношение числа моноцитов 2 типа к числу моноцитов 1 типа. Это может быть связано с тем, что тромбоз ко- ронарной артерии приводит к более мас-

2 типа от общего числа моноцитов выше сивному поражению миокарда и, ожидаемо, более выраженной СВР, включающей преобладание моноцитов с провоспали-тельными свойствами. Внутрисосудистый тромбоз ассоциирован с активацией моноцитов и образованием моноцитарнотромбоцитарных агрегатов [4, 9].

Инсулинорезистентность оказывает влияние на созревание моноцитов и макрофагов, что приводит к изменению их функции и нарушению баланса между провоспалительным и противовоспалительным моноцитами. Хроническая гипергликемия вызывает эпигенетические изменения в моноцитах и развитие у них провоспалительного фенотипа [11]. По полученным нами данным у пациентов с СД2 имеет место преобладание провоспали-тельного звена моноцитарной системы как у пациентов с ОКСпST, так и у пациентов с ОКСбпST.

• У пациентов с ОКСбпST без СД2 отношение числа моноцитов 2 типа к числу моноцитов 1 типа, а также доля моноцитов

по сравнению с пациентами, страдающими СД2. Это может свидетельствовать о большей активности репаративных процессов у пациентов без СД2 с одной стороны, и преобладанием провоспалитель-ных моноцитов у пациентов с СД2 с другой стороны, что согласуется с данными Shirai T. et al [12]. Анализ динамики субпопуляций моноцитов у пациентов с ОИМ свидетельствует о большей активности провоспалительного звена моноцитарной системы у пациентов с осложненным течением атеросклероза и CД 2 типа.

Заключение

Таким образом, у пациентов с острым инфарктом миокарда, госпитализированных с острым коронарным синдромом со стойким подъемом сегмента ST кардиограммы, и у пациентов с сопутствующим сахарным диабетом 2 типа вне зависимости от вида острого коронарного синдрома наблюдается гиперактивность моноцитов с провоспалительными свойствами.