Состояние метаболизма белых крыс под влиянием смеси нитробензофуроксанов

Оксид азота принимает участие в регуляции метаболических реакций [1]. Установлено , что смесь 5,7- дихлор -4,6- динитробензофуроксана , 5,7- дихлор -6- нитробензофуроксана и 5,7- дихлор -4- нитробензофуроксана ( тримиксан ) повышает активность нитроксидергической системы , так как является экзогенным источником оксида азота (NO) [2]. В связи с этим вызывает интерес изменение характера метаболизма в организме при многократной активации нитроксидергической системы . Интенсивность и направленность обмена веществ определяется концентрациями ферментов сыворотки крови .

Исходя из этого , целью наших исследований является определение динамики изменения аланинаминотрансферазы ( АЛТ ), аспартатаминотрансферазы ( АСТ ), лактадегидрогеназы , креатинфосфокиназы , общей альфа - амилазы и глюкозы при длительном поступлении тримиксана в организм .

Материалы и методы исследования . Исследования проведены на 20 белых нелинейных крысах обоего пола живой массой 220-250 г , разделенных на четыре группы . Животным первой группы ежедневно вводили дистиллированную воду внутрижелудочно в объеме 3 мл ( контроль ), крысам второй группы - тримиксан один раз в сутки в течение 30 дней в виде 0,1% суспензии в дозе 1 мг / кг .

Концентрацию аланин - и аспартатаминотрансферазы , лактатдегидрогеназы , креатинфосфокиназы , общей альфа - амилазы определяли спектрофотометрическим кинетическим методом с использованием наборов Ranbox, глюкозы - глюкозооксидазным методом до введения и на 10- й , 20- й и 30- й дни эксперимента . Статистическую обработку результатов эксперимента проводили с использованием критерия Стьюдента .

Результаты исследований. У интактных крыс концентрация общей альфа-амилазы в крови составляет 475,95±29,16 Е/л, глюкозы - 7,07±0,35 ммоль/л. В контрольной группе животных, получавших ежедневно дистиллированную воду внутрижелудочно в объеме 3 мл, концентрация изучаемого фермента снижается в 1,2 раза (396,91±7,96 Е/л против 475,95±29,16 Е/л, Р=0,06) на десятый день эксперимента. Тенденция к снижению сохраняется и на 20-й день (400,39±59,54 Е/л против 475,95±29,16 Е/л до введения). На тридцатый день исследований отмечается обратная картина: активность общей альфа-амилазы повышается в 1,21 раза на уровне тенденции (575,73±9,00 Е/л против 475,95±29,16 Е/л до введения). Поскольку на 10-й день эксперимента концентрация глюкозы была снижена в 1,4 раза (5,04±0,42 ммоль/л против 7,07±0,35 ммоль/л, Р=0,02) мы можем сделать вывод о том, что на ежедневное введение дистиллированной воды с предварительной фиксацией и введением зонда в желудок организм крыс отвечает повышением утилизации глюкозы в тканях. Diego M.A. et al. (2005) сообщают о том, что раздражение кожных рецепторов стимулирует активность парасимпатической нервной системы [3], следовательно, ежедневная фиксация в течение 30 дней способствует активации парасимпатических центров и повышению анаболизма углеводов. На 20-й день эксперимента сохраняется аналогичная картина, но менее выраженная, что свидетельствует о проявлении компенсаторных реакций организма. Гиперамилаземия, отмечаемая на 30-й день эксперимента, по-видимому, связана со сниженной концентрацией глюкозы в крови (5,81±0,31 ммоль/л против 7,07±0,35 ммоль/л, Р=0,06) в течение длительного времени, на что организм отвечает повышением количества фермента.

Концентрация щелочной фосфатазы у интактных крыс составляет 339,39±20,93 Е / л и остается неизменной до десятого дня эксперимента . Тенденция к его снижению отмечается на 20- й и 30- й дни введения (285,76±27,54 Е / л и 280,11±25,66 Е / л против 339,39±20,93 Е / л до введения ).

В контрольной группе животных концентрация лактатдегидрогеназы на десятый день эксперимента составляет 416,44±24,67 Е / л против 362,20±17,24 Е / л до введения , а после 20- го дня введения наблюдается тенденция к снижению (330,01±41,71 Е / л против 362,20±17,24 Е / л ) при возврате на исходный уровень к тридцатому дню . Лактатдегидрогеназа является ферментом конечной реакции гликолиза , чем и объясняется повышение ее количества на 10- й день эксперимента при снижении количества общей альфа - амилазы сыворотки крови .

Концентрация креатинфосфокиназы в крови интактных крыс -449,39±20,93 Е/л. В контрольной группе животных, получавших ежедневно дистиллированную воду внутрижелудочно, отмечается тенденция к повышению концентрации изучаемого фермента на десятый день эксперимента (462,23±12,55 Е/л против 449,39±20,93 Е/л), которая сменяется снижением в 1,09 раза (Р=0,08) к 30-му дню. Известно, что сывороточная концентрация креатинфосфокиназы снижается при снижении тонуса мышц, при слабой мышечной активности, исходя из чего можно предположить что повышение тонуса парасимпатической нервной системы также способствует снижению концентрации креатинфосфокиназы в сыворотке крови.

Концентрация АСТ в крови крыс - 100,96±6,42 Е / л . На 20- й день эксперимента в контрольной группе животных отмечается тенденция к повышению концентрации АСТ (118,14±9,42 Е / л против 100,96±6,42 Е / л до введения ), а к 30- му дню она сменяется тенденцией к снижению - до 93,38±1,24 Е / л .

В сыворотке крови интактных белых крыс концентрация АЛТ составляет 58,45±3,05 Е / л . В контрольной группе животных на десятый день эксперимента отмечается тенденция к снижению концентрации фермента (39,76±9,00 Е / л против 58,45±3,05 Е / л до введения ). На 20- й день концентрация АЛТ снижается в 1,26 раза ( Р =0,025), к 30- му тенденция к снижению сохраняется .

Коэффициент Де Ритиса , как показатель типа метаболизма , у крыс контрольной группы повышается в 1,54 раза (2,65±0,43 против 1,72±0,02 до введения , Р =0,09), на 20- й день - в 1,48 раза ( Р =0,04), а к 30- му – на уровне тенденции (1,89±0,19 против 1,72±0,02 до введения ). Высокий коэффициент Де Ритиса за счет снижения концентрации АЛТ в сыворотке крови на 10- й и 20- й дни эксперимента свидетельствует о том , что в клетке происходит торможение периферических путей обмена ( гликолиза , цикла Кори и т . д .) при неизменных центральных путях обмена веществ . Этот факт является дополнительным доказательством активации процессов анаболизма и , следовательно , парасимпатической нервной системы в организме при ежедневной фиксации животных .

Для оценки общего состояния и направленности течения обменных процессов определили индекс ферментемии . У крыс контрольной группы индекс ферментемии на десятый день эксперимента повышается в 1,23 раза на уровне тенденции (4,00±0,42 против 3,25±0,12 до введения ), на 20- й день - в 1,3 раза ( Р =0,1), а к 30- му дню показатель возвращается к исходному уровню (3,27±0,22). Повышение индекса ферментемии свидетельствует об аэробном сдвиге клеточного метаболизма за счет снижения активности анаэробных механизмов .

При ежедневном введении тримиксана на 10-й день эксперимента концентрация общей альфа-амилазы снижается в 1,36 раза (359,72±20,59 Е/л против 490,4±11,62 Е/л, Р=0,005), на 20-й день - в 1,45 раза (Р=0,004), на 30-й день - в 1,38 раза (416,66±18,34 Е/л против 575,73±9,00 Е/л, Р=0,001) по сравнению с исходным уровнем. Известно, что оксид азота ограничивает выброс симпатических медиаторов [4]. Из установленных ранее фактов о том, что введение тримиксана повышает образование оксида азота в организме, можно сделать вывод, что гипоамилаземия при введении тримиксана объясняется снижением тонуса симпатической и повышением тонуса парасимпатической нервной систем. Это подтверждается и снижением концентрации глюкозы в крови при введении тримиксана на 10-й день в 1,72 раза (Р=0,0001), на 20-й день - в 1,15 раза (Р=0,04), на 30-й день - в 1,11 раза (Р=0,02).

Десятый день введения тримиксана характеризуется тенденцией к повышению концентрации общей щелочной фосфатазы по сравнению с исходным уровнем (368,38±7,03 Е / л против 347,46±26,81 Е / л ), которая сохраняется и на 20- й день ( в 1,16 раза выше исходного уровня ). На 30- й день исследований содержание щелочной фосфатазы снижается в 1,63 раза (213,5±22,06 Е / л против 347,46±26,81 Е / л до введения , Р =0,02). Оксид азота является физиологическим регулятором метаболизма кальция [5], повышает освобождение его из депо , чем и объясняется снижение концентрации щелочной фосфатазы - фермента остеобластов в ответ на длительное введение тримиксана в организм .

У крыс , получавших тримиксан (1 мг / кг ), на 10- й день эксперимента концентрация лактатдегидрогеназы повышается на уровне тенденции (371,35±2,46 Е / л против 365,74±17,71 Е / л ), которая сохраняется и на 20- й день , а в заключительный день исследований содержание лактатдегидрогеназы повышено в 1,51 раза (552,39±116,92 Е / л против 365,74±17,71 Е / л до введения , Р =0,02). После введения тримиксана , также как и у крыс контрольной группы , содержание лактатдегидрогеназы отрицательно коррелирует с содержанием общей альфа - амилазы (r = -1).

Ежедневное поступление в организм тримиксана на 10- й день сопровождается повышением концентрации креатинфосфокиназы по сравнению с исходным уровнем (460,04±5,51 Е / л против 432,23±5,51 Е / л , Р =0,03), а на 20- й и 30- й дни - в 1,24 раза и 1,06 раза ниже исходного уровня ( Р =0,075). Следовательно , концентрация креатинфосфокиназы снижается при поступлении в организм доноров оксида азота .

Концентрация АСТ у крыс , получавших ежедневно тримиксан , в течение эксперимента не изменяется . Концентрация АЛТ на 10- й день эксперимента не изменяется по сравнению с исходным уровнем . На 20- й день - концентрация АЛТ повышается в 1,54 раза ( Р =0,001), на 30- й день - снижается в 1,28 раза ( Р =0,06) по сравнению с уровнем , отмеченным на 20 й день .

Коэффициент Де Ритиса при ежедневном введении тримиксана на 10- й день эксперимента повышается в 1,2 раза на уровне тенденции , на 20 й день - снижается в 1,31 раза ( Р =0,03), на 30- й день отмечается тенденция к снижению в 1,22 раза по сравнению с исходным уровнем . Введение тримиксана сопровождается повышением активности периферических путей обмена , тогда как активность цикла трикарбоновых кислот остается неизменной .

У крыс, получавших тримиксан, на 10-й день эксперимента индекс ферментемии повышается в 1,08 раза на уровне тенденции, на 20-й день - снижается в 1,24 раза (Р=0,06), а на 30-й день - в 1,32 раза (Р=0,03) по сравнению с исходным уровнем. Следовательно, введение тримиксана сопровождается анаэробным сдвигом клеточного обмена веществ.

Таким образом , при длительном поступлении в организм тримиксана - донора оксида азота обмен веществ клетки сдвигается в сторону анаболизма ( анаэробная ферментемия ).

ЛИТЕРАТУРА : 1. Салей А . П ., Вашанов Г . А , Мещерякова М . Ю . Роль оксида азота в регуляции гемодинамических показателей и метаболических функций печени // Вестник ВГУ . Серия : Химия . Биология . Фармация . - 2009. - № 9. - С . 129-135. 2. Каримова Р . Г ., Гарипов Т . В . Нитроксидергическая система : влияние препаратов фуроксанового ряда // Ветеринарная медицина домашних животных . Сборник статей . - Казань , 2009. - С . 85-88. 3. Diego M.A., Field T., Hernandez-Reif M. J. Vagal activity, gastric motility, and weight gain in massaged preterm neonates // Pediatr. -2005. - Vol. 147. - P. 50-55. 4. Ивашкин В . Т ., Драпкина О . М . Клиническое значение оксида азота и белков теплового шока . - М ., 2001. - 88 с . 5. Ковалев И . В ., Баскаков М . Б ., Капилевич Л . В .. Медведев М . А . Роль оксида азота в регуляции электрической и сократительной активности гладких мышц // Бюллетень сибирской медицины - 2004. - № 1 - С . 12-20.

СОСТОЯНИЕ МЕТАБОЛИЗМА БЕЛЫХ КРЫС ПОД ВЛИЯНИЕМ СМЕСИ НИТРОБЕНЗОФУРОКСАНОВ

Каримова Р . Г .

Резюме

Изучен ферментный состав крови белых крыс при ежедневном в течение 30 дней введении тримиксана (1 мг / кг ) - соединения , повышающего активность нитроксидергической системы . Установлено , что поступление в организм тримиксана сдвигает обмен веществ в сторону анаболизма .

RATS` METABOLISM CONDITION UNDER THE INFLUENCE OF NITROBENZOFUROXAN

Karimova R.G.