Современный подход к измерению остаточных лейкоцитов в компонентах крови



Касьянов А. Д., Чечеткин А. В., Голованова И. С., Макеев А. Б.

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», г. Санкт-Петербург

СОВРЕМЕННЫЙ ПОДХОД К ИЗМЕРЕНИЮ

ОСТАТОЧНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ В КОМПОНЕНТАХ КРОВИ

Введение.Переливание свободных от лейкоцитов компонентов снижает риск инфицирования реципиента.При переливании аллогенных серопозитивных компонентов крови с примесью лейкоцитов, превышающей 1×106 в дозе, реципиенту могут передаваться цитомегаловирус, вирус Эпштейна-Барр и другие герпесвирусы, Т-лимфотропный вирус человека I и II типа, парвовирусы. Кроме того, лейкоциты могут быть инфицированы аденовирусами, вирусами гриппа, кори, паротита, краснухи, ретровирусами, иерсиниями и прионами. В начале 90-х гг. наиболее распространенным был ручной способ определения с использованием метода световой микроскопии и гемоцитометра большого объема (счетной камеры Nageotte). Внедрение в рутинную трансфузионную практику использования компонентов крови, обедненных лейкоцитами, стимулировало разработку технологий и валидацию методов контроля остаточных лейкоцитов в трансфузионных средах. Согласно требовани- ям стандарта качества содержание остаточных лейкоцитов не должно превышать 106 клеток в единице в компонентах крови, обедненных лейкоцитами, что может быть подтверждено или опровергнуто лишь при использовании аппаратуры с высокой разрешающей способностью.

Цель. Определение количества остаточных лейкоцитов в лейкоредуцированных компонентах крови с помощью камеры «Nageotte» и аппарата для оптического подсчета остаточных лейкоцитов «ADAM-rWBC».

Материалы и методы. В качестве исследуемого материала использовали образцы эритроцитных взвесей (ЭВ) в добавочном растворе (n = 30), тромбоцитные концентраты (ТК), полученные методом афереза (n = 47), донорскую плазму до замораживания (n = 24). Остаточное содержание лейкоцитов оценивали методом световой микроскопии с помощью гемоцитометра «Nageotte» (50 мкл) и аппарата для оптического подсчета остаточных лейко- цитов «ADAM-rWBC» (NanoEn Tek Inc, Корея). Статистический анализ проводился с помощью пакета статистических программ Microsoft Excel 2007. Рассчитывались статистические характеристики (средняя арифметическая, ошибка средней арифметической) и оценка значимости отличий.

Результаты. Содержание остаточных лейкоцитов в образцах ЭВ в камере «Nageotte» составило 0,16 ± 0,04×106/ед. и на аппарате «ADAM-rWBC» 0,29 ± 0,05×106/ед., p < 0,05; в образцах плазмы в гемоцитометре 0,08 ± 0,02×106/ ед., на аппарате «ADAM-rWBC» 0,15 ± 0,06×106/ ед.,p < 0,05; в ТК количество лейкоцитов в камере «Nageotte» составило 0,12 ± 0,02×106/ед,, на аппарате «ADAM-rWBC» 0,32 ± 0,06×106/ед., p < 0,05. Следует отметить, что из 30 обследованных ЭВ в 10 образцах в камере «Nageotte» остаточные лейкоциты не обнаружены (33,3 %). Из 24 образцов плазмы,исследованных в камере «Nageotte», в 6 компонентах остаточные лейкоциты не определялись (25 %). В 13 образцах ТК при исследовании с помощью гемоцитометра остаточные лейкоциты не обнаружены (28 %). На аппарате «ADAM-rWBC» остаточные лейкоциты выявлены во всех исследованных образцах. Аппарат для оптического подсчета остаточных лейкоцитов позволяет стандартизировать подсчет остаточных лейкоцитов в обедненных лейкоцитами компонентах крови, снижает риск ошибки во время процедуры тестирования (диапазон измерений 0–100 кле-ток/мкл), увеличивает производительность труда сотрудников лаборатории контроля качества (2,5–3 мин/тест).

Выводы . Подсчет остаточных лейкоцитов в компонентах крови с помощью аппарата для оптического подсчета обеспечивает возможность быстрого получения достоверных результатов в широком диапазоне измерений и пригоден для исследования большинства лейкоредуцированных компонентов крови.