Сравнительная характеристика гистологических изменений при Helicobacter pylori-ассоциированном гастрите

Helicobacter pylori (HP) играет роль одного из основных факторов, вызывающих развитие хронического гастрита, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. В результате воздействия HP на организм человека запускаются воспалительные реакции с прогрессирующим повреждением слизистых оболочек органов, контактирующих с патогеном. Следует учитывать индивидуальные отличия каждого больного.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Сравнительная характеристика и установление корреляционной взаимосвязи между пато-гистологическими изменениями при HP-ассоциированном хроническом гастрите.

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ

Из парафиновых блоков 68 гастробиопсий было приготовлено по 6 микропрепаратов, ко- торые были окрашены гематоксилином и эозином (1 микропрепарат) и поликлональными антителами Anti-HP (Dako Cytomation, Дания) визуализация DAB с докраской гематоксилином по общепринятым гистологическим методикам с последующей световой микроскопией и фотопротоколированием.

Визуально оценивали следующие признаки: обсеменённости HP слизистой желудка; активность воспаления; инфильтрацию моно-нуклеарами и атрофию слизистой с учетом степени выраженности признака (норма или отсутствие признака; легкая; умеренная; выраженная) по визуально-аналоговой шкале M. Dixon et al., 1996 (рис. 1) [4].

Преобразование данных методами статистики производилось в программе Statistica (TIBCO Software inc., США), с применением коэффициента гамма корреляции.

Рис. 1. Визуально-аналоговая шкала (по M. Dixon et al., 1996)

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

При анализе микрофотографий окрашенных гематоксилином и эозином и иммунной реакцией с антителами к НР было выявлено, что выраженная обсемененность слизистой оболочки желудка HP составляла 91,2 %, умеренная – 8,2 %, а легкая – 0,6 %.

Выраженная степень активности, с наличием множества полиморфноядерных лейкоцитов (ПЯЛ) внутри эпителия и в просвете желёз, встречалась в 25,1 % случаев, умеренная – 60,9 % и лёгкая – 14,0 %.

Инфильтрация мононуклеарами в выраженной степени визуализировалась в 17,1 % случаев, в том числе в сочетании с формированием лимфоидных фолликулов, в умеренной степени – в 70,7 %, в лёгкой – в 12,2 %. Выраженная атрофия присутствовала в 0,7 % наблюдений, умеренная – в 22,9 %, лёгкая – в 57,8 %; отсутствовала – в 18,6 % случаев.

При проведении корреляционного анализа была обнаружена слабая корреляционная связь между степенью обсеменённости HP слизистой желудка и выраженностью активности воспаления, а также связь между степенью об-семенённости HP слизистой и выраженностью инфильтрации мононуклеарами является статистически недостоверной. Также установлено, что присутствие HP всегда сопровождается активным воспалением, что согласуется с литературными данными [1–3]. В медицинской среде распространена точка зрения о положительной корреляционной взаимосвязи между выраженностью обсеменённости HP и воспалительного ответа [1–3]. Однако в ходе исследования было обнаружено, что её наличие необязательно. На это могут влиять следующие факторы: стадия воспаления, длительность инфекционного процесса, индивидуальные особенности организма человека, особенности штаммов бактерий. Результаты сравнительного анализа представлены в таблице.

Результаты сравнительной характеристики гистологических изменений при HP-ассоциированном гастрите

№	Сравниваемые характеристики	Коэффициент гамма корреляции
1	Степень обсеменённости HP слизистой желудка и активности воспаления	–0,092 , при p > 0,05
2	Степень обсеменённости HP слизистой желудка и выраженность инфильтрации мононуклеарами	0,237 , при p > 0,05
3	Степень активности воспаления и выраженность инфильтрации моно-нуклеарами	0,352 , при p < 0,05
4	Выраженность атрофии слизистой и степень активности воспаления	0,373 , при p < 0,05
5	Выраженность атрофии слизистой и инфильтрации мононуклеарами	0,371 , при p < 0,05

На рис. 2 представлена гистологическая картина воспалительного инфильтрата при HP-ассоциированном хроническом гастрите, включающая мононуклеары и другие клетки, которые без иммунной реакции с антителами сложно типировать: Т-лимфоциты, плазмоциты и макрофаги, также среди них заметны ПЯЛ. При ИГХ-окраске скопления HP располагаются преимущественно в просвете желудочных желёз в различном количестве. На рис. 2 видно, что на микрофотографиях «а» и «б», а также «в» и «г» имеется сходная гистологическая картина по степени обсеменённости HP, активности воспаления и выраженности мононуклеарного инфильтрата. На микрофотографиях «а» и «б» – «умеренная», согласно шкале M. Dixon, на «в» и «г» – «выраженная» по обсеменённости и «лёгкая» по активности и инфильтрации моно-нуклеарами. При сравнении этих случаев между собой заметна разница – степень обсеме-нённости и воспалительного ответа отличаются, кроме того на микрофотографии «г» представлена железа с фокусом кишечной метаплазии.

а

б

в

Рис. 2. Слизистая оболочка желудка. Варианты обсемененности HP в просвете желёз (а–г, указано стрелками) на фоне разной степени выраженности воспалительной инфильтрации и кишечной метаплазией (г, отмеченная крестиком). Иммунное окрашивание с Anti-HP антителами, визуализация DAB, докраска гематоксилином.

Ув. х400

г

На рис. 3 представлены отличия гистологической картины по одному или двум из трёх анализируемым признакам при схожести по другому (-им) как пример отсутствия статистически значимой корреляции между ними.

В результате исследования было установлено наличие положительной корреляции средней силы между степенью активности воспаления и выраженностью инфильтрации мононуклеарами. Что согласуется с литературными данными и подчеркивает роль ПЯЛ, лимфоцитов и плазмоцитов в эрадикации HP [1].

Кроме того, положительная корреляционная взаимосвязь средней силы была обнаружена между выраженностью атрофии и степенью активности воспаления, а также инфильтрации мононуклеарами, что подчеркивает роль иммунного ответа и хронического воспаления в патогенезе атрофических изменений слизистой оболочки желудка при НР-ассоциированном гастрите.

а

б

в

Рис. 3. Слизистая оболочка желудка. Варианты обсемененности HP в просвете желёз: (а–г, указано стрелками) на фоне разной степени выраженности воспалительной инфильтрации и кишечной метаплазией (г, отмечена крестиком). Иммунное окрашивание с Anti-HP антителами, докраска гематоксилином. Ув. х400

г

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Несмотря на общепринятую в научной литературе точку зрения о прямой связи степени обсеменённости HP слизистой желудка и активности воспаления, а также инфильтрации мононуклеарными лейкоцитами, на практике обнаружить её не удаётся из-за выраженной изменчивости характеристик, участвующих в формировании сравниваемых признаков [1–3]. Вместе с тем установлено, что степень активности воспаления при хроническом гастрите имеет положительную корреляционную связь с выраженностью инфильтрации мононукле-арами. Сходная взаимосвязь имеется также между атрофией и иммунным ответом разного вида и степенью их выраженности.