Сравнительная оценка антигенной и иммуногенной активности коммерческих живых вакцин против классической чумы свиней

В настоящее время для профилактики классической чумы свиней (КЧС) применяют живые вакцины из аттенуированных вакцинных штаммов вируса. Наиболее широко используют лапинизированный китайский штамм LC, размноженный на кроликах или в различных культурах клеток (1, 2). Кроме того, известны различные культуральные аттенуированные штаммы вируса КЧС, которые так же эффективны, как и штамм LC, и не вызывают поражения эмбрионов у привитых свиней: GPE (Япония), Тивеваль (Франция), ЛК (Россия) и др. (3). Целью нашей работы было сравнение в экспериментальных условиях антигенности и иммуногенности трех коммерческих вакцин против классической чумы свиней.

Методика . Объектом исследований служили свиньи крупной белой породы в возрасте 80-90 сут, серонегативные по отношению к вирусу КЧС. Для вакцинации животных использовали следующие вакцины: Plivac из штамма LC, размноженного на кроликах (фирма «Рlivа», Хорватия); ЛК-ВНИИВВиМ из штамма ЛК, адаптированного и размноженного в субкультуре клеток тестикулярной ткани ягнят (крупномасштабное производство и широкое применение этой вакцины в России осуществляется с 1970 года) (Покровский завод биопрепаратов, Россия); КС из штамма КС, адаптированного и размноженного в субкультуре клеток тестикулярной ткани ягнят (НПО «Нарвак», Россия) (3). Каждой вакциной прививали по пять свиней (внутримышечно, однократно); двух свиней не вакцинировали (контроль).

Инфекционную активность вакцины Plivac оценивали на кроликах, двух других — в культуре клеток РК-15; титр антител — цитохимическим вариантом метода иммуноферментного анализа (ИФА) — PLA (4, 5). Через 21 сут после вакцинации животных ( n = 17) подкожно заражали вирулентным штаммом Ши Мынь вируса КЧС в дозе 10⁵ ЛД 50 , после чего в течение 14 сут ежесуточно проводили клинические наблюдения и измеряли температуру тела.

У всех свиней до вакцинации и на 14-, 21- и 35-е сут после вакцинации отбирали кровь для определения титра специфических антител на основе цитохимического варианта ИФА (NPLA) по стандартной методике (4). Кроме того, наличие вирус-специфических антител в сыворотке крови вакцинированных свиней выявляли конкурентным методом ИФА при использовании коммерческого набора «Chekit-CSF-SERO» (Швейцария). По интенсивности торможения реакции антиген—антитело рассчитывали коэффициент ингибирования.

Главным критерием иммуногенности вакцин является защита свиней от заболевания и гибели после заражения вирулентным штаммом вируса КЧС. Содержание специфических антител к вирусу КЧС до и после контрольного заражения принимали во внимание в качестве дополнительного критерия иммуно- и антигенности вакцины.

Результаты . Все исследуемые вакцины были стерильными и безвредными для свиней. Титр инфекционности сухих вакцин Plivac, ЛК-ВНИИВВиМ и КС в культуре клеток (по РLA) составлял соответственно 4,0 lg ИД₅₀/мл, 5,0 и 6,5 lg ТКИД₅₀/мл.

Для определения иммуногенности вакцины разводили в соотношении 1:10 и вводили свиньям внутримышечно в объеме 2 мл. Через 21 сут после инъекций все вакцинированные (15 гол.) и невакцинированные (2 гол.) животные были заражены вирулентным штаммом вируса КЧС. Результаты контрольного заражения показали, что все 15 вакцинированных свиней были полностью защищены от КЧС: при клиническом осмотре у животных не отмечено каких-либо отклонений от физиологической нормы, а при убое — патологических изменений в органах и тканях. Две контрольные свиньи заболели и пали на 11- и 12-е сут после заражения; при вскрытии трупов этих животных обнаружены типичные для КЧС изменения в органах и тканях (геморрагический диатез).

Титр нейтрализующих антител определяли в сыворотке крови свиней до вакцинации и на 14-, 21- и 35-е сут после вакцинации. До вакцинации у всех свиней выявлена серонегативная реакция. У вакцинированных животных нейтрализующие антитела были обнаружены во все периоды исследований. Титр антител на 21-е сут был выше, чем на 14-е сут после вакцинации. Максимальный титр антител выявлен через 2 нед после заражения вирулентным штаммом вируса (35-е сут). Во все периоды после вакцинации титр нейтрализующих антител был выше у свиней, привитых вакциной КС.

При определении специфических антител конкурентным методом ИФА показано, что по мере увеличения периода после вакцинации активность сывороток крови возрастала и достигала максимального значения через 14 сут после контрольного заражения (35-е сут после вакцинации). Следует отметить, что сыворотки крови свиней, привитых вакциной КС, во все периоды после вакцинации имели более высокую активность, чем после прививки другими вакцинами.

Титр вируснейтрализующих антител (по NPLA) в сыворотке крови свиней крупной белой породы в различные периоды после вакцинации разными препаратами (log 2 )

Нами не выявлено принципиальных различий по иммуногенности и антигенности между лапинизированной вакциной из штамма LC (Plivac) и культуральными вакцинами ЛК-ВНИИВВиМ и КС. Различия заключались главным образом в производительности наработки вакцинного вируса в зависимости от технологии. Более выраженная антигенная активность культуральной вакцины КС по сравнению с двумя другими, вероятно, обусловлена более высокой дозой, используемой для иммунизации свиней.

Таким образом, вакцины Plivac, ЛК-ВНИИВВиМ и КС являются стерильными, безвредными, аректогенными для поросят в возрасте 80-90 сут, обладают выраженной иммуногенностью и обеспечивают защиту животных от заболевания и гибели при заражении вирулентным штаммом вируса классической чумы свиней. Вакцина КС (НПО «Нарвак») характеризуется более выраженной антигенной активностью по сравнению с вакцинами Plivac и ЛК-ВНИИВВиМ, по-видимому, за счет большей вакцинальной дозы вируса. После заражения вирулентным штаммом вируса классической чумы свиней у вакцинированных животных наблюдалось повышение титра специфических антител (до 7,5-10,0 log2), то есть примерно в 4-8 раз (бустерный эффект). Это, вероятно, свидетельствует о приживляемости вирулентного вируса в организме свиней, несмотря на устойчивость последних к заболеванию при летальной дозе вируса классической чумы свиней. Выявлена обратно пропорциональная зависимость между интенсивностью образования антител и их титром.

Л И Т Е Р А Т У Р А

• 1.    E r i c s o n G.A. Hog Cholera (Swine fever). In: Vet. Diagn.Virology. Mosby year book /Eds. A.E. Castro, W.P. Heushele. USA, 1992: 228-230.

• 2.   T e r p s t r a C., W o o r t m e y e r R., B a r t e l i n g S.J. Development and properties of a cell culture

  produced vaccine for hog cholera based on the Chinese strain. Dt. Tierarztl. Woch., 1990, 97, 2: 77-79.

• 3.   С е р г е е в В.А., Н е п о к л о н о в Е.А., А л и п е р Т.И. Классическая чума свиней в промышлен

  ном свиноводстве. Ветеринария, 2001, 9: 10-15.

• 4.    T e r p s t r a С., W e n s v o o r t G. The protective value of vaccine-induced neutralising antibody titers in swine fever. Vet. Microbiol., 1988, 16: 123-128.

• 5.    T e r p s t r a C., W e n s v o o r t G. Experience with modified neutralizing peroxidase-linked assay for detection of antibody against swine fever virus. Proc. Int. Pig. Vet. Soc. Congress. Ghent, 1984, 8: 64.

Институт вирусологии им. Д.И. Ивановского,