Сравнительное фитохимическое исследование подземной части представителей рода лапчатка в рамках разработки ресурсосберегающих технологий

Растения рода Лапчатка широко распространен в Самарской области и при этом недостаточно изучен. Известно, что надземная часть некоторых представителей данного рода может быть использована в качестве кормовой культуры в сельском хозяйстве, а подземные органы лапчатки, согласно литературным данным, содержат целый ряд биологически активных соединений (БАС), представляющих интерес для медицины в качестве антитиреоидных средств.

Цель работы: сравнительное фитохими-ческое изучение некоторых представителей рода Лапчатка.

Объектом исследования являлись подземные органы лапчатки белой ( Potentilla alba L.), лапчатки прямой ( Potentilla recta L.) и лапчатки серебристой ( Potentilla argentea L.), заготовленные в июне-октябре 2013 г. в Ботаническом саду Самарского государственного университета, а также на экспериментальном участке Средне-Волжского филиала ГНУ ВИЛАР (пос. Антоновка, Самарская область). Исследовались хлороформные и спиртовые извлечения из

подземной части вышеперечисленных растений. В качестве методов фитохимического анализа нами были использованы: хроматография в тонком слое сорбента, спектрофотометрия. Хроматографический анализ проводили на пластинках «Сорбфил ПТСХ-АФ-А-УФ» с использованием различных систем растворителей: хлороформ – этанол - вода (26:16:3), н-бутанол - ледяная уксусная кислота - вода (4:1:2). Детекцию флавоноидных и стериновых веществ проводили в УФ-свете при длине волны 254 и 366 нм, а также обработкой хроматограмм растворами диазобензолсульфокислоты (ДСК), концентрированной серной кислотой, фосфорномолибденовой кислотой с последующим нагревом при 100 ºС.

Результаты и их обсуждение. На начальном этапе исследования были изучены условия экстракции целевых групп БАС растворителями различной полярности – хлороформ, спирт (концентрация 40%, 70%, 95%), вода. По результатам хроматографического анализа выявлено, что оптимальным экстрагентом для стериновых соединений является хлороформ, для флавоноидных веществ – спирт с концентрацией 40% и 70%. Наиболее полное разделение суммы изучаемых веществ наблюдалось в системе растворителей н-бутанол-ледяная уксусная кислота-вода (4:1:2). При этом фенольные соединения детектировались после обработки хроматографических пластин раствором ДСК в виде желто-оранжевых пятен с различными значениями R f : 0,43; 0,6;

0,73 (рис. 1). Фитостериновые соединения детектировали после обработки хроматографических пластинок 20% раствором серной кислоты и нагревании при 100 ºC в течение 15 минут в виде розовых пятен с величиной Rf около 0,7 на уровне стандартного образца β-ситостерина ( рис. 2).

Рис. 1 . Хроматографический профиль извлечений из подземной части представителей рода Potentilla : А – Лапчатка белая; Б – Лапчатка прямая; В – Лапчатка серебристая; 1 – 40% спирт; 2 – 70% спирт; 3 – 95% спирт; 4 – вода; 5 – рутин; 6 – кверцетин; 7 – цинарозид

Б

Рис. 2 . Хроматографический профиль извлечений из подземной части представителей рода Лапчатка: А – Лапчатка белая; Б – Лапчатка прямая; В – Лапчатка серебристая; 1 – 40% спирт; 2 – 70% спирт; 3 – 95% спирт; 4 – вода; 5 – хлороформ; 6 – β-ситостерин; 7 – олеаноловая кислота

Спектрофотометрический анализ флавоноидного комплекса лапчаток проводили для извлечения на 70% спирте (экстрагирование проводили в течение 1 часа на кипящей водяной бане). При добавлении в исследуемые извлечения раствора алюминия хлорида наблюдался батохромный сдвиг кривой. Максимумы поглощения наблюдались при длине волны 285 нм (рис. 3). Рассчитано, что количественное содержание флавоноидных соединений (в пересчете на цинарозид) в изучаемых растениях не превышает 0,15%. Наибольшее содержание характерно для корней и корневищ лапчатки серебристой – 0,14%.

Лапчатка белая 70%

А

В

Рис. 3. Электронные спектры поглощения водно-спиртовых извлечений из корней и корневищ представителей рода Лапчатка: А – Лапчатка белая; Б – Лапчатка прямая; В – Лапчатка сереб-

Б

В

Рис. 4. Электронные спектры поглощения хлороформных извлечений из корней и корневищ представителей рода Лапчатка: А – Лапчатка белая; Б – Лапчатка прямая; В – Лапчатка серебристая ристая

Спектрофотометрический анализ фитостеринового комплекса БАС представителей рода Лапчатка проводили для хлороформного извлечения, упаренного до сухого остатка, который затем растворяли в необходимом объеме концентрированной серной кислотой. Максимум поглощения полученного раствора наблюдается в электронном спектре при длине волны 308-310 нм, что характерно для данной группы веществ (рис. 4). Определено, что количественное содержание стериновых соединений в пересчете на стандарт составило около 3,4 % для лапчатки белой, 4,2% для лапчатки прямой и 6,5% для лапчатки серебристой.

Выводы: проведено сравнительное фито-химическое исследование трех представителей рода Potentilla – лапчатки белой, лапчатки прямой и лапчатки серебристой. Выявлено наличие и рассчитано количественное содержание биологически активных соединений – флавоноидов и фитостеринов в сырье. Полученные данные позволяют разработать ресурсосберегающие технологий переработки фитомассы представителей рода Potentilla , учитывающие использование подземной части для выделения биологически активных соединений фенольной и стериновой природы.