T-клеточная клональность при аутоиммунной гемолитической анемии



Сидорова Ю. В., Смирнова С. Ю., Цветаева Н. В., Никулина О. Ф., Бидерман Б. В., Никулина Е. Е., Судариков А. Б.

ФГБУ «Гематологический научный центр министерства здравоохранения России»

Т-КЛЕТОЧНАЯ КЛОНАЛЬНОСТЬ

ПРИ АУТОИММУННОЙ ГЕМОЛИТИЧЕСКОЙ АНЕМИИ

Аутоиммунная гемолитическая анемия (АИГА) — редкое заболевание системы крови, которое сопровождается образованием антител к собственным антигенам эритроцитов и аутоиммунным гемолизом. В патогенезе АИГА ведущая роль отводится В-лимфоцитам. Однако в последние годы также показано значение различных субпопуляций Т-клеток в патогенезе болезни. На мышиных моделях получено много доказательств непосредственного участия Т-лимфоцитов в патогенезе АИГА. Поскольку у мышей АИГА индуцируется различными манипуляциями (заражение вирусом, введение крысиных эритроцитов, делеция генов, врожденные дефекты и т. д.), невозможно полностью перенести эти данные на человека. Данная работа направлена на изучение клональных популяций Т-лимфоцитов у пациентов с АИГА.

Материалы и методы. В работу включено 27 пациентов с диагнозом АИГА. В качестве контроля были взяты пациенты с другими анемиями (п =13) и здоровые доноры (п =20). Определение Т-клеточной клональности проводили по реаранжировкам генов гамма и бета цепей Т-клеточного рецептора (TCRG и TCRB). Для этого использовали метод ПЦР с мультиплексными системами праймеров Biomed-2 и последующий фрагментный анализ на секвенаторе ABI PRISM 3130 (Applied Biosystems). У 3-х пациентов провели селекцию CD4+, CD8+, CD4+25+ лимфоцитов периферической крови при помощи наборов производства Miltenyibiotec.

Результаты. При оценке Т-клеточной клональности по реаранжировкам генов TCRG и TCRB в группе больных с АИГА выявлен достоверно высокий уровень клональных Т-лимфоцитов по сравнению с группой контроля. Динамическое исследование пациентов с выявленной Т-клеточной клональностью показало, что клональные Т-лимфоциты сохраняются независимо от уровня гемоглобина, определяются как в период ремиссий, так и обострений, не исчезают после проводимой терапии и клинического улучшения (срок наблюдения 1-10 лет). Связь Т-клеточной клональности с полом, возрастом, длительностью, тяжестью заболевания, спленэктомией не найдена. Исследование клональности в различных популяциях Т-лимфоцитов (CD4+, CD8+, CD4+25+) показало, что клональные лимфоциты принадлежат к CD8+ Т-лимфоцитам.

Заключение. Отсутствие положительной корреляции частоты обнаружения Т-клсточных CD8+ клонов с течением заболевания, его тяжестью, длительностью, уровнем гемоглобина, свидетельствуют об отсутствии прямой связи данных клонов с аутоиммунным процессом. Мы предполагаем, что персистенция иммунных клонов может опосредовано поддерживаться аутоиммунным процессом, однако данные клоны не принимают участия в развитии и поддержании гемолиза. Наличие Т-клеточной клональности в CD8+ субпопуляции лимфоцитов у пациентов с АИГА требует дальнейшего изучения значения данной популяции в патогенезе заболевания.