Time-lapse культивирование in vitro эмбрионов крупного рогатого скота до стадии бластоцисты

Цель исследования - применить time-lapse наблюдение для мониторинга за развитием эмбрионов крупного рогатого скота (КРС) in vitro, а также провести анализ прогностического потенциала морфокинетических параметров дробления как критерия для оценки компетентности эмбриона к формированию бластоцисты. Исследование выполнено на посмортально полученном материале; созревание ооцитов, оплодотворение и культивирование эмбрионов КРС до стадии бластоцисты происходило экстракорпорально. По временным и морфологическим характеристикам первого и трех последующих делений эмбриона (от зиготы до формирования 4-клеточной стадии) можно определить потенциальную способность эмбриона формировать экспандированную бластоцисту хорошего качества. Если деление эмбриона укладывается в определенные нами временные интервалы и отсутствуют признаки аномального мультиполярного или неравного дробления зиготы, эмбрион эффективнее развивается и чаще достигает стадии бластоцисты: первое деление эмбриона должно происходить через (27,77 ± 0,28) ч после оплодотворения ооцита; продолжительность от момента формирования борозды деления до образования двухклеточного эмбриона должна составлять не более (0,38 ± 0,05) ч; второе и третье деления с формированием 4-клеточного эмбриона должны происходить не позднее (36,58 ± 0,27) и (37,77 ± 0,32) ч после оплодотворения. Эмбрионы, развитие которых не укладывалось в указанные временные параметры, как правило, останавливались на разных этапах развития, не развившись до стадии бластоцисты. Мультиполярное деление на три и более бластомера и неравное деление на бластомеры разного размера являлись, по нашим данным, негативными прогностическими признаками раннего эмбриогенеза. Мультиполярное деление встречалось с частотой 29,71 % у эмбрионов, не сформировавших бластоцисту, и только 9,26 % - у эмбрионов, развившихся до стадии бластоцисты, неравное дробление - с частотой 5,86 и 0,93 % сответственно. Жизнеспособные и перспективные эмбрионы следуют гораздо более жестким временным рамкам деления, а эмбрионы, останавливающиеся в развитии, как правило, выходят за пределы временного диапазона и чаще демонстрируют аномалии деления.