Тимусные тельца в органе пушных зверей после применения биологически активных веществ

Эндокринная функция в тимусе формируется в эмбриогенезе раньше, чем лимфопоэтическая. Объединение этих функций в органе происходит еще до рождения особи. Окончательное формирование долек с дифференциацией их на корковое и мозговое вещество, а также образование в мозговом веществе тимусных телец происходит в пренатальном онтогенезе (1,  5). В постнатальном онтогенезе при различных функциональных состояниях тимуса отмечается увеличение количества телец Гассаля с возрастанием в них ШИК-положительного вещества, что является свидетельством гуморальной функции этих структур (2, 3, 4).

Целью проведенного исследования являлось изучение особенностей микроструктуры тимуса контрольных и подопытных пушных зверей, а также тимусных телец в органе, их численность и состояние после применения биологически активных веществ на фоне общих морфологических изменений тимуса.

Материалы и методы. Тимус для морфологических исследований был получен от клинически здоровых самок соболя после их убоя, который проводился в соответствии с правилами использования экспериментальных животных. Предварительно по принципу аналогов (пол, возраст, живая масса, физиологическое состояние) были сформированы 6 групп самок пушных зверей (5 подопытных и контрольная) по 6 животных в каждой из них. Исследовалось индивидуальное, сочетанное и комплексное применение биологически активных веществ на структуру тимуса. В качестве исследуемых биологически активных веществ (БАВ) использовались сывороточный гонадотропин (1 группа), тималин (2 группа), левотироксин натрия (3 группа), тималин+левотироксин натрия (4 группа), сывороточный гонадотропин + тималин + левотироксин натрия (5 группа). Сывороточный гонадотропин вводили в дозе 5 МЕ на 100 г живой массы, тималин - в дозе 0,5 мг однократно внутримышечно после разведения в 1 мл стерильного физраствора, левотироксин натрия – 5 мкг задавали вместе с уменьшенной порцией корма. В контрольной группе стерильный физраствор вводили в дозе 1 мл. Продолжительность опытного периода составляла 6 суток. Микроструктура тимуса была изучена после применения обзорных и специальных гистологических, гистохимических и морфометрических методик исследования. В дольках тимуса в условной единице площади среза определяли видовой состав и численность клеток тимуса, ядерно-цитоплазматическое отношение (ЯЦО). Дифференциацию тимусных телец осуществляли согласно M. Raica (2006). Статистический анализ проводился с помощью программы Microsoft office Excel-2003.

Результаты исследований и их обсуждение. Тимус контрольных соболей в период активной половой функции у самок сохранял дольчатое строение. Основными клетками тимуса являлись элементы лимфоидного ряда, включающие различные типы клеток и эпителиоретикулоциты. Количество лимфоцитов в тимусе соболя в активный репродуктивный период составляет более 70%. Из других постоянно встречающихся клеток в органе выделяются макрофаги, тканевые базофилы, плазмоциты и эозинофилы. Среди лимфоидных элементов выделяли лимфобласты, большие, средние и малые (светлые и темные) лимфоциты. Их диаметр соответственно равнялся 16,5 ± 0,3 мкм; 12,3 ± 0,4; 9,6 ± 0,3; 5,4 ± 0,2 (светлые) и 4,3 ± 0,1 (темные) мкм, а ЯЦО – 0,7; 0,8; 1,1; 1,8 и 1,6. Диаметр плазмоцитов составлял 9,9 ± 0,3 мкм, а ЯЦО – 0,7. Размер эпителиоретикулоцитов мозгового вещества превышал таковой в корковом веществе долек, в котором наблюдалась делимфатизация, вследствие чего граница с мозговым веществом слабо просматривалась. В мозговом веществе выявляли до трех телец Гассаля, которые были образованы продолговатыми и веретеновидными клетками с крупным ядром и слабо ацидофильной цитоплазмой. Среди них чаще всего преобладали молодые и зрелые тельца. Молодые тельца имели выраженные дегенеративные изменения в эпителиоцитах, наблюдалось формирование полостей, где выделялись продукты распада клеток и деструктивные эозинофилы. В зрелых тельцах наблюдалось образование кератинового ядра в составе тельца.

После введения сывороточного гонадотропина самкам соболя тимус сохранял дольчатое строение, а размер долек был средним. В большинстве долек корковое и мозговое вещество не имело четкого разграничения между собой и отмечалось обеднение клетками лимфоидного ряда как коркового, так и мозгового вещества. По сравнению с контролем снижалось количество лимфоцитов на условную единицу площади среза долек, прежде всего за счет лимфобластов, повышалось количество макрофагов, тканевых базофилов и деструктивных апоптозных клеточных элементов. Тканевые базофилы имели небольшое количество гранул в цитоплазме, дегранулировали. В мозговом веществе отмечали присутствие единичных либо юных телец Гассаля, образованных из скопления двух-трех светлых эпителиоретикулоцитов, либо молодых телец с выраженными дегенеративными изменениями в эпителиоретикулоцитах. В некоторых дольках телец Гассаля не обнаруживали. Развитие и функциональное состояние кровеносной системы долек в целом характеризовалось умеренным кровенаполнением сосудов микроциркуляторного русла.

Тимус пушных зверей после введения тималина характеризовался четким разделением долек на корковое и мозговое вещество. В основном выделялись крупные и средние по размеру дольки. Корковое вещество в дольках было плотно заполнено лимфоцитами и на условную единицу площади среза, по сравнению с контролем, отмечалось большее их количество. Площадь среза мозгового вещества возрастала, и в нем отмечали усиление процесса миграции лимфоцитов из паренхимы в сосуды. В мозговом веществе обнаруживали два-четыре тимусных тельца различной структурной организации. Чаще всего тельца относились к молодым с содержанием в полости эпителиоретикулоцитов клеточного детрита и лимфоцитов, но выявлялись и юные на стадии формирования, а также зрелые тельца. Из кровеносных сосудов в паренхиму отмечалась миграция эозинофилов и тканевых базофилов. В мозговом веществе эозинофилы концентрировались вокруг тимусных телец, принимая участие в их формировании, при этом происходила дегрануляция клеток. Периваскулярно располагались темные недегранулированные тканевые базофилы, в паренхиме – светлые частично или полностью дегранулированные клетки. В мозговом веществе возрастало количество эпителиоретикулоцитов, эозинофилов и тканевых базофилов на единицу условной площади среза. Сосудистая реакция в органе усиливалась, наблюдалось сильное кровенаполнение как междольковых артерий и вен, так и сосудов микроциркуляторного русла.

После введения пушным зверям левотироксина натрия дольчатость в тимусе сохранялась, а размер долек был крупным или средним. В корковом веществе отмечались очаги делимфатизации, вследствие чего в некоторых дольках граница между корковым и мозговым веществом становилась неразличимой. В мозговом веществе выявляли 2-3 тимусных тельца. Чаще это были юные из нескольких клеток тельца на стадии формирования, но выделялись и единичные структурно оформленные молодые тельца с клеточным детритом в полости тельца. В мозговом веществе увеличивалось количество эозинофилов и тканевых базофилов на условную единицу площади среза. Тканевые базофилы были частично или полностью дегранулированы. В некоторых дольках в мозговом веществе наблюдали полнокровие сосудов, отечность и эритродиапедез.

При сочетанном применении тималина и левотироксина натрия дольчатость органа была сохранена, а размер долек не имел достоверных различий по сравнению с индивидуальным применением этих биологически активных веществ. В корковом веществе отмечалось снижение численности лимфоцитов на единицу условной площади среза долек. Количество тимусных телец достигало трех-четырех в дольке. Все они, как правило, относились к зрелым, имели крупные и очень крупные размеры с ШИК-положительным веществом в центральной части телец. Отдельные из телец можно было классифицировать как стареющие, так как они имели признаки разрушения кератинового ядра. Гемодинамика в дольках и междольковой соединительной ткани характеризовалась функциональным напряжением в виде полнокровия сосудов, в отдельных дольках в мозговом веществе отмечался эритродиапедез.

При комплексном применении биологически активных веществ пушным зверям дольки тимуса имели крупные и средние размеры. В дольках четкого разделения на корковое и мозговое вещество не отмечалось. В мозговом веществе долек происходило уменьшение численности лимфоцитов в условной единице площади среза и обнаруживали 2-3 молодых или зрелых тимусных тельца крупных размеров, которые содержали в составе дегранулированные эозинофилы. Отдельные из стареющих тимусных телец содержали в аморфном веществе до 20-ти эозинофилов с признаками их дегрануляции. В паренхиме мозгового вещества обнаруживались малодифференцированные эозинофилы на стадии миелоцитов и метамиелоцитов. Гемодинамика в органе характеризовалась напряжением, что сопровождалось полнокровием сосудов.

Заключение . Таким образом, численность, размеры и состояние телец Гассаля в дольках тимуса самок пушных зверей в период активной репродуктивной функции зависят от экзогенного влияния биологически активных веществ. Сывороточный гонадотропин тормозит образование и развитие телец Гассаля в дольках, левотироксин натрия в слабой степени влияет на образование телец, тималин проявляет активное стимулирующее действие на тимус, сопровождаемое умеренным влиянием на процесс образования и формирования зрелых телец Гассаля. Что касается сочетанного и комплексного применения биологически активных веществ, в схемы которых входил тималин, то наиболее резкая реакция со стороны тимуса отмечается при комплексном введении БАВ. В мозговом веществе долек появляются очень крупные зрелые или стареющие тимусные тельца, содержащие множество дегранулированных эозинофилов, а в паренхиме выявляются очаги пролиферации этих гранулоцитов.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Бабаева, Ж.Н. Размеры вилочковой железы у детей грудного возраста / Ж.Н. Бабаева, О.А. Споров // Вопросы охраны материнства и детства. – 1987. -Т. 32, №8. - С.39-42. 2. Гриневич, Ю.А. Иммунобиология гормонов тимуса / Ю.А. Гриневич, В.Ф. Чеботарев. – Киев : Здоровье, 1989. -154 с. 3. Ломакин, М.С. Гормоны и другие биологически активные вещества тимуса / М.С. Ломакин, Н.Г. Арцимович // Иммунология. – 1992. -№1.- С. 10-15. 4. Серебров, В.Ю. Эндокринная функция тимуса / В.Ю. Серебров, С.Л. Стуканов. – Томск : Изд-во Томского ун-та, 1993. -128 с. 5. Хлыстова, З.С. Время проявления эндокринной и лимфопоэтической функции тимуса человека в эмбриогенезе / З.С. Хлыстова, И.И. Калинина, С.П. Шмелева, О.П. Рябчиков // Бюлл. эксп. биол. и мед. – 2000.- Т.130, №10. – С. 453-456. 6. Raica, M. Structural heterogeneity and immunohistochemical profile of Hassall corpuscles in normal human thymus / M. Raica, S. Encica, A. Motoc // Ann Anat. 2006. -Vol. 188(4). - P. 345-352.

ТИМУСНЫЕ ТЕЛЬЦА В ОРГАНЕ ПУШНЫХ ЗВЕРЕЙ ПОСЛЕ ПРИМЕНЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

Усенко В.И., Константинова И.С., Булатова Э.Н.

Резюме

Формирование телец Гассаля в дольках тимуса самок соболя в активный репродуктивный период, их количество, размер и состояние зависят от введения в организм экзогенных биологически активных веществ (БАВ). Тималин оказывает умеренное воздействие на формирование молодых телец Гассаля. Схемы совместного применения тималина с другими препаратами (левотироксином натрия и сывороточным гонадотропином) приводят к резкому увеличению размера тимусных телец с включением в их состав лимфоцитов и дегранулированных эозинофилов и появлению в мозговом веществе долек очагов пролиферации эозинофилов при комплексном применении БАВ.

THYMUS BODIES IN THE FUR ANIMALS ORGAN AFTER USING OF BIOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCES

Usenko V.I., Konstantinova I.S., Bulatova E.N.