Токсическое действие нефтепродуктов при повторном поступлении

В результате хозяйственной деятельности человека происходит загрязнение почвенного покрова земли различными химическими веществами. В настоящее время одним из распространенных загрязнителей среды обитания человека являются нефтепродукты. Попадая в почву, они могут оказывать негативное влияние на здоровье людей в результате прямого контакта с почвой или, опосредованно, с водой, атмосферным воздухом, пищевыми продуктами растительного происхождения [5, 6].

Цель работы – изучение особенностей токсического воздействия нефтепродуктов при пероральном и трансдермальном путях поступления.

Материалы и методы. При загрязнении почвы экзогенными химическими веществами важно оценить способность вещества проникать через неповрежденные кожные покровы и вызывать интоксикацию, так как данный путь поступления в организм человека при контакте с почвой является преобладающим. Оценку способности нефтепродуктов к кожно-резорбтивному действию проводили «пробирочным» методом на белых крысах-самцах массой 230–280 г. В контрольную и опытную группу брали по 7 животных. Хвосты крыс опытной группы на 2/3 их длины погружали в пробирку с нефтепродуктами в нативном виде, хвосты крыс контрольной группы – в воду. Время экспозиции составило 4 часа в сутки, 5 дней в неделю в течение 30 суток. Ежедневно фиксировали внешние признаки раздражения и измеряли объем хвоста (тест отечности кожи) сразу после экспозиции. Еженедельно всех животных взвешивали [4]. Способность нефтепродуктов накапливаться в организме и оказывать неблагоприятное действие на уровне смертельных эффектов или влиять на функциональное состояние ряда органов и систем подопытных животных оценивали при внутрижелудочном введении самцам белых крыс массой 200–240 г в дозах 1/10 (3762 мг/кг) и 1/20 (1881 мг/кг) от максимально введенной дозы в остром эксперименте (37620 мг/кг). Животным контрольной группы в эквивалентном объеме вводили воду. В контрольную и опытную группу брали по 7 животных. Продолжительность эксперимента составляла 30 суток. Режим введения –

5 раз в неделю. Еженедельно животных взвешивали и уточняли дозу [1, 2, 4]. В конце эксперимента животных умерщвляли путем мгновенной декапитации, вычисляли относительные коэффициенты массы органов (далее - ОКМ), изучали морфологический состав периферической крови, в сыворотке крови и моче определяли ряд биохимических показателей, рассчитывали клиренс креатинина и мочевины, процент реабсорбции (по креатинину). Работы с животными проводили в соответствии с техническим кодексом установившейся практики ТКП 125-2008 902040 [3].

Для проведения экспериментальных исследований взяли смесь нефтепродуктов в соотношении 1:1:1 по массе: осветительный керосин марки КО-20 по ТУ 38.401-58-10-01 (производство ОАО «Нафтан»), топливо дизельное автомобильное марки ЕН 590 по ТУ 38.401-58-296-2005 (производство ОАО «Мозырский НПЗ»), масло индустриальное марки И-50А (производство ОАО «Нафтан»).

Результаты исследований статистически обработали. В качестве характеристики группы для признаков с распределением, отличным от нормального, вычисляли медиану и интерквантильный размах ( Me [25 %; 75 %]). Для сравнения двух независимых выборок использовали непараметрический U -критерий Манна - Уитни, а различия считали достоверными с учетом поправки Бонферрони. За уровень значимости принимали p <0,05.

В ходе эксперимента отмечено воздействие максимально вводимой дозы нефтепродуктов на гематологические показатели. Зарегистрировано увеличение уровня гемоглобина (на 12,00 %), гематокрита (на 8,78 %), тромбоцитов (на 27,29 %) и среднего объема тромбоцита (на 8,54 %) (табл. 2).

Одной из причин повышения уровня гематокрита может быть уменьшение количества жидкой части крови, поскольку содержание эритроцитов находится на уровне контрольного показателя, в незначительной степени - в результате увеличения количества тромбоцитов. Изменение такого показателя, как средний объем тромбоцита, свидетельствует о повышении количества функционально активных тромбоцитов в периферической крови, усилении их адгезивно-агрегационной способности. Как известно, существует связь размера тромбоцитов с их функциональной активностью. В результате активации дискоидная форма тромбоцитов меняется на сферическую, появляются псевдоподии, что ведет к увеличению размеров клетки и степени анизоцитоза. Следовательно, при воздействии нефтепродуктов у подопытных животных происходит индукция образования тромбоцитов.

Таблица 1

Масса тела крыс и ОКМ внутренних органов по окончании 20-кратного внутрижелудочного введения нефтепродуктов, Me [25 %; 75 %]

Показатель	Группа животных и доза вводимых нефтепродуктов
	контроль, n =7	опытная группа 1 (3762 мг/кг), n =7	опытная группа 2 (1881 мг/кг), n =7
Масса тела, г	270,0 [260,0; 290,0]	270,0 [260,0; 290,0]	250,0 [240,0; 290,0]
Относительные коэффициенты массы (ОКМ), кг-3/кг
- печень	26,50 [24,90; 9,30]	32,30 [30,40; 2,80]*	32,30 [29,70; 3,30]*
- почки	6,10 [5,70; 6,50]	7,10 [6,50; 7,30]*	6,90 [6,50; 7,70]*
- сердце	3,30 [3,10; 3,60]	3,40 [3,40; 3,70]	3,60 [3,20; 3,80]
- селезенка	3,80 [3,50; 5,10]	3,50 [3,30; 5,10]	4,60 [4,10; 5,30]
- надпочечники	0,17 [0,15; 0,18]	0,16 [0,14; 0,18]	0,17 [0,15; 0,20]
- желудок	6,20 [5,20; 6,70]	6,30 [5,80; 7,30]	6,70 [6,40; 7,04]

П р и м е ч а н и е : * - различия статистически значимы относительно контроля, р <0,05.

Таблица 2

Гематологические показатели периферической крови крыс по окончании 20-кратного внутрижелудочного введения нефтепродуктов, Me [25 %; 75 %]

Показатель	Группа животных и доза вводимых нефтепродуктов
	контроль, n =7	опытная группа 1 (3762 мг/кг), n =7	опытная группа 2 (1881 мг/кг), n =7
Эритроциты, 1012/л	7,54 [7,10; 7,80]	7,92 [7,79; 8,19]	7,36 [7,04; 8,14]
Гематокрит, %	55,80 [53,50; 57,10]	60,70 * [58,20; 61,6]	58,30 [54,10; 63,60]
Гемоглобин, г/л	126,0 [124,0; 130,0]	140,0 * [137,0; 146,0]	133,0 [125,0; 143,0]
Тромбоциты, 109/л	372,0 [324,0; 405,0]	476,0 * [422,0; 483,0]	379,0 [347,0; 418,0]
Средний объем эритроцита, фл	75,70 [72,80; 77,70]	75,00 [74,20; 76,80]	78,10 [74,50; 79,20]
Средний объем тромбоцита, фл	8,20 [8,00; 8,60]	8,90 * [8,70; 9,10]	8,40 [8,10; 8,60]
Среднее содержание гемоглобина в эритроците, пг	17,20 [16,20; 17,90]	17,70 [16,80; 18,10]	16,70 [16,30-19,40]
Средняя концентрация гемоглобина в эритроците, г/л	230,0 [222,0; 237,0]	235,0 [226,0; 241,0]	222,0 [206,0; 246,0]
Лейкоциты, 109/л	13,10 [12,20; 18,10]	14,80 [11,60; 22,10]	18,90 [15,30; 19,70]

П р и м е ч а н и е : * - различия статистически значимы относительно контроля, р <0,05.

Таблица 3

Показатели состояния мочевыделительной системы крыс по окончании 20-кратного внутрижелудочного введения нефтепродуктов, Me [25 %; 75 %]

Показатель	Группа животных и доза вводимых нефтепродуктов
	контроль, n =7	опытная группа 1 (3762 мг/кг), n =7	опытная группа 2 (1881 мг/кг), n =7
Суточный диурез, мл/сут.	6,50 [5,20; 8,00]	11,70 [3,60; 13,30]	5,40 [2,00; 9,60]
рН	5,00 [5,00; 5,50]	6,50 [6,00; 7,00]**	5,40 [2,00; 9,60]
Уд. вес, г/см3	0,97 [0,93; 0,99]	1,00 [0,94; 1,01]	0,97 [0,94; 1,007]
Общий белок, г/л	5,40 [4,50-8,50]	3,70 [3,10; 4,40]*	5,90 [4,20; 8,50]
Хлориды, мМ/л	47,61 [35,71; 66,66]	90,47 [71,42; 109,52]*	114,28 [100,0; 128,57]**
Мочевина, мМ/л	280,5 [242,5; 402,0]	140,5 [127,50; 153,0]**	395,5 [351,0; 957,0]
Креатинин, мкМ/л	4580,0 [4270,0; 5800,0]	2725,0 [2725,0; 3050,0] **	5495,0 [4580,0; 12510,0]
Клиренс мочевины, мл/мин	0,13 [0,10; 0,32]	0,12 [0,09; 0,20]	0,20 [0,18; 0,26]
Клиренс креатинина, мл/мин	0,34 [0,27; 0,52]	0,41 [0,10; 0,45]	0,37 [0,27; 0,49]
Процент реабсорбции (по креатинину)	98,67 [98,53; 98,95]	97,76 [97,54; 98,18]	98,99 [98,46; 99,46]

П р и м е ч а н и е : * - различия статистически значимы относительно контроля, р <0,05; ** - различия статистически значимы относительно контроля, р <0,01.

При введении нефтепродуктов в дозе 3762 мг/кг у животных отмечены статистически значимые изменения некоторых функциональных показателей состояния мочевыделительной системы (табл. 3).

В моче выявлено снижение содержания общего белка на 31,48 %, мочевины - на 49,9 % и креатинина - на 40,50 %, при этом уровень их в сыворотке крови находился в пределах контроля (табл. 4). Вышеуказанные изменения происходили на фоне роста диуреза на 80 %, однако различия не были статистически значимы. Клиренс креатинина и мочевины, процент реабсорбции у подопытных животных не отличались от контрольных.

При введении нефтепродуктов в меньшей дозе (1881 мг/кг) выявлена тенденция увеличения содержания в моче мочевины на 41 % и креатинина на 20 %, а также рост клиренса на 53 %, однако данные изменения были статистически не значимы относительно контроля. Повышение экскреции хлоридов с мочой наблюдалось в двух опытных группах, однако не носило дозозависимого характера. При дозе нефтепродуктов 1881 мг/кг содержание хлоридов в моче превысило контрольный показатель в 2,4 раза, при дозе 3762 мг/кг -на 90,02 %. Выявленные изменения биохимических показателей мочи подопытных животных, а также увеличение ОКМ почек могут свидетельствовать о нарушении функционального состояния почек при повторном внутрижелудочном воздействии нефтепродуктов.

На фоне увеличения ОКМ печени у животных двух опытных групп биохимические показатели, характеризующие функциональное состояние гепатобилиарной системы (активность ферментов аспартат- и аланинаминотрансферазы, лактатдегидрогеназы, щелочной фосфатазы и содержание в сыворотке крови общего белка, липидов, хлоридов, мочевины и креатинина), мало отличались от контрольных. Активность ферментов лактатдегидрогеназы и сукцинатдегидрогеназы в гемолизатах крови также находилась в пределах контроля (табл. 4).

Вместе с тем отмечено увеличение содержания в сыворотке крови общего билирубина:

в дозе 3762 мг/кг - на 148,5 %, в дозе 1881 мг/кг -на 88,73 %. Повышенное содержание гематогенного пигмента, образующегося в результате распада гемоглобина, на фоне отсутствия изменения уровня эритроцитов в крови, по-видимому, связано с нарушением функции печени.

Поступление нефтепродуктов в течение месяца при внутрижелудочном введении привело к изменениям со стороны липидного обмена. На фоне неизмененного содержания общих липидов отмечено снижение уровня триглицеридов на 53,85 и 35,16 % - в 1-й и 2-й опытных группах соответственно и холестерина в 2 раза -в 1-й опытной группе.

Таблица 4

Биохимические показатели у крыс по окончании 20-кратного внутрижелудочного введения нефтепродуктов, Me [25 %; 75 %]

Показатель	Группа животных и доза вводимых нес		тепродуктов
	контроль, n =7	опытная группа 1 (3762 мг/кг), n =7	опытная группа 2 (1881 мг/кг), n =7
Общий белок в сыворотке крови, г/л	62,90 [61,3; 64,5]	66,20 [63,80; 69,90]	70,30 [64,40; 76,10]
Мочевина в сыворотке крови, ммоль/л	8,17 [6,76; 9,44]	8,79 [6,89; 9,31]	6,89 [6,00; 8,42]
Хлориды в сыворотке крови, ммоль/л	123,80 [119,04; 128,6]	128,57 [123,80; 138,09]	128,57 [123,80; 133,33]
Креатинин в сыворотке крови, мкМоль/л	61,00 [54,9; 67,1]	61,00 [61,00; 67,10]	61,00 [54,90; 67,10]
Аспартатаминотрансфераза в сыворотке крови, мккат/л	4,59 [4,12; 6,25]	3,72 [3,29; 5,24]	4,10 [3,29; 4,33]
Аланинаминотрансфераза в сыворотке крови, мккат/л	0,96 [0,87; 1,08]	0,84 [0,76; 0,96]	0,82 [0,76; 1,05]
Билирубин общий в сыворотке крови, мкмоль/л	70,26 [60,87; 80,43]	174,62*** [112,80; 206,50]	132,60* [117,30; 171,70]
Общие липиды в сыворотке крови, г/л	5,50 [5,00; 6,00]	6,00 [5,25; 6,50]	6,00 [5,75; 7,00]
Триглицериды в сыворотке крови, ммоль/л	0,91 [0,72; 0,93]	0,42 ** [0,31; 0,58]	0,59* [0,49; 0,67]
Холестерин в сыворотке крови, ммоль/л	1,00 [0,90; 1,30]	0,50* [0,40; 0,70]	1,20 [0,90; 1,80]
Лактатдегидрогеназа в сыворотке крови, мккат/л	74,83 [58,83; 96,17]	66,83 [50,83; 88,17]	58,83 [48,17; 77,50]
Щелочная фосфатаза в сыворотке крови, мккат/л	6,25 [3,9; 6,73]	6,57 [5,64; 7,28]	5,87 [4,9; 6,97]
Лактатдегидрогеназа в гомогенате печени, мкМ НАДН/г белка	67,50 [59,3; 77,5]	73,00 [69,20; 79,80]	79,50 [76,50; 93,50]
Сукцинатдегидрогеназа в гомогенате печени, мкг формазана/г белка	20,60 [17,6; 28,0]	27,20 [25,50; 31,20]	25,70 [24,00; 33,20]
Глюкоза-6-фосфат-дегидрогеназа в гемолизатах крови, мкМ НАДФН/мин г Нв	87,90 [77,8; 95,7]	95,20 [87,30; 98,00]	93,92 [78,70; 114,80]
Глутатионредуктаза в гемолизатах крови, мкМоль/г Нв мин.	1,70 [1,66; 2,50]	2,80* [2,30; 3,70]	2,90 *** [2,30; 3,10]
Глутатионтрансфераза в гемолизатах крови, мкМоль/г Нв мин	1,40 [1,30; 1,50]	1,30 [1,20; 1,40]	1,20 [1,00; 1,50]
Супероксиддисмутаза в гемолизатах крови, мкг/мл	30,40 [26,7; 36,3]	47,40 * [36,30; 47,40]	36,30 [26,70; 36,30]
Свободные SH-группы в гемолизатах крови, мкМ/мл	86,10 [78,8; 90,0]	102,60 ** [100,80; 104,40]	102,60* [97,00; 106,30]
Малоновый диальдегид в сыворотке крови, нмоль/мл	5,00 [5,00; 7,50]	10,00 * [7,50; 12,50]	7,50 [5,00; 10,00]
Битирозин в сыворотке крови, усл. ед.	6,07 [5,98; 9,23]	5,22 [5,01; 6,51]	5,12 [5,03; 6,07]
Триптофан в сыворотке крови, усл. ед.	32,65 [27,20; 37,85]	38,44 [32,26; 39,76]	29,59 [28,35; 33,18]

П р и м е ч а н и е : * - различия статистически значимы относительно контроля, р <0,05; ** - различия статистически значимы относительно контроля, р <0,01; *** - различия статистически значимы относительно контроля, р <0,1.

Воздействие компонентов нефтепродуктов вызывало повышенное образование свободных радикалов и активацию перекисного окисления липидов (ПОЛ), о чем свидетельствует увеличение конечного продукта ПОЛ - малонового диальдегида. В дозе 3762 мг/кг установлено статистически значимое возрастание его содержания в сыворотке крови в 2 раза; в дозе 1881 мг/кг - на 25 %, хотя различия статистически не значимы. В ответ на накопление продукта ПОЛ произошла активация многокомпонентной саморегулирующейся антиоксидантной системы (АОС) организма. Как видно из табл. 4, поступление нефтепродуктов в дозе 3762 мг/кг сопровождалось увеличением активности ферментов супероксиддисмутазы (на 55,9 %) и глутатионредуктазы (на 64,7 %). В дозе 1881 мг/кг отмечено увеличение активности только глутатионредуктазы (на 70,5 %). При этом активность глюкоза-6-фосфат дегидрогеназы и глутатионтрансферазы находилась на уровне контрольного значения. Содержание в гемолизатах крови свободных SH-групп - неферментативного звена АОС - было статистически значимо увеличено у животных обеих опытных групп на 19,2 %. Изменения содержания битирозина и триптофана в сыворотке крови животных обеих опытных группах не отмечено, что свидетельствует об отсутствии окислительной модификации белков. Таким образом, поступление нефтепродуктов в организм животных в течение 1 месяца при внутрижелудочном пути введения приводило к активации системы ПОЛ - АОС.

В условиях длительного эпикутанного воздействия на 2/3 поверхности хвостов белых крыс максимально возможных количеств нефтепродуктов внешних симптомов интоксикации, а также гибели животных не наблюдалось. При ежедневной визуальной оценке состояния кожных покровов хвостов крыс не выявлено признаков эритемы (выраженность эритемы составила 0 баллов), а также развития отека, о котором судили по изменению объема хвостов крыс, измеренных до и после экспозиции.

В процессе опыта установлено статистически значимое снижение массы тела крыс опытной группы на 11,3 % и увеличение ОКМ печени на 11,2 %, что свидетельствует о токсическом воздействии на организм животных (табл. 5).

При изучении функционального состояния мочевыделительной системы установлено статистически значимое увеличение содержания мочевины в моче на 77,9 %. В то же время содержание мочевины в сыворотке крови крыс опытной группы и клиренс мочевины не отличались от показателей животных параллельного контроля (табл. 6, 7). Содержание креатинина в моче подопытных животных находилось на уровне контрольных значений. Вместе с тем наблюдалось статистически значимое увеличение концентрации креатинина в сыворотке крови на 10 %, а также снижение у животных интегрального показателя - клиренса креатинина в 1,9 раза. Данные изменения происходили на фоне снижения суточного диуреза на 42 %, хотя изменения статистически не значимы. Полученные результаты могут свидетельствовать о нарушении функции клубочковой фильтрации почками продуктов азотистого обмена.

При рассмотрении биохимических показателей сыворотки крови, характеризующих функциональное состояние печени, не отмечено изменений содержания общего белка, хлоридов и активности ферментов лактатдегидрогеназы, щелочной фосфатазы, аспартат-и аланинаминотрансферазы у животных, подвергшихся воздействию нефтепродуктов (табл. 7).

Таблица 5

ОКМ внутренних органов и масса тела крыс, подвергнутых воздействию нефтепродуктов на кожу 2/3 хвостов в течение месяца, Me [25 %; 75 %]

Показатель	Группа
	контроль, n =7	опыт, n =7
Масса тела, г	270 [250; 280]	240 [220; 260]*
ОКМ печени, кг-3/кг	26,50 [25,46; 27,81]	28,48 [28,38; 29,36]*
ОКМ почек, кг-3/кг	6,00 [5,80; 6,93]	6,88 [6,67; 7,50]
ОКМ сердца, кг-3/кг	3,38 [3,21; 3,92]	3,80 [3,45; 4,50]
ОКМ селезенки, кг-3/кг	3,76 [3,69; 4,39]	4,22 [3,35; 4,50]
ОКМ надпочечников, кг-3/кг	1,80 [1,43; 1,93]	1,67 [1,32; 1,95]

П р и м е ч а н и е : * - различия статистически значимы относительно контроля, р <0,05.

Таблица 6

Показатели состояния мочевыделительной системы крыс, подвергнутых воздействию нефтепродуктов на кожу 2/3 хвостов в течение месяца, Me [25 %; 75 %]

Показатель	Группа
	контроль, n =7	опыт, n =7
Суточный диурез, мл/сут.	15,7 [14,0; 16,1]	9,10 [5,70; 14,50]
рН	6,5 [6,5; 6,5]	6,5 [6,5; 6,5]
Удельный вес, г/см3	0,99 [0,98; 1,01]	0,99 [0,99; 1,01]
Общий белок, г/л	1,4 [1,0; 1,7]	1,3 [1,2; 1,6]
Хлориды, мМ/л	19,31 [13,63; 22,72]	13,63 [11,36; 18,18]
Мочевина, мМ/л	86,0 [76,5; 96,0]	153,0[134,0; 178,5]*
Креатинин, мкМ/л	3050,0[3050,0; 3355,0]	3355,0 [2745,0; 3355,0]
Клиренс мочевины, мл/мин	0,16 [0,11; 0,18]	0,16 [0,07; 0,22]
Клиренс креатинина, мл/мин	0,61 [0,51; 0,67]	0,31 [0,17; 0,50]*
Процент реабсорбции (по креатинину)	98,21 [97,80; 98,95]	97,82 [97,56; 98,00]

П р и м е ч а н и е : * - различия статистически значимы относительно контроля, р <0,05.

Таблица 7

Биохимические показатели крыс, подвергнутых воздействию нефтепродуктов на кожу 2/3 хвостов в течение месяца, Me [25 %; 75 %]

Показатель	Группа
	контроль, n =7	опыт, n =7
Общий белок в сыворотке крови, г/л	62,7 [61,00; 70,90]	69,50 [68,00; 78,50]
Мочевина в сыворотке крови, ммоль/л	6,89 [5,10; 9,31]	8,55 [7,66; 8,68]
Хлориды в сыворотке крови, ммоль/л	131,81 [131,81; 136,36]	131,81 [122,7; 136,4]
Креатинин в сыворотке крови, мкМоль/л	61,0 [48,8; 67,1]	67,1 [67,1; 73,2]**
Аспартатаминотрансфераза в сыворотке крови, мккат/л	3,84 [3,67; 4,33]	3,81 [3,45; 4,65]
Аланинаминотрансфераза в сыворотке крови, мккат/л	0,99 [0,90; 1,08]	0,99 [0,79; 1,05]
Лактатдегидрогеназа в сыворотке крови, мккат/л	53,7 [47,82; 76,95]	70,27 [64,12; 72,4]
Щелочная фосфатаза в сыворотке крови, ммкат/л	6,18 [4,97; 6,47]	4,95 [4,00; 5,28]
Лактатдегидрогеназа в гомогенате печени, мкМ НАДН/г белка	75,3 [70,0; 77,70]	78,10 [71,0; 100,40]
Сукцинатдегидрогеназа в гомогенате печени, мкг формазана/г белка	23,10 [22,8; 26,0]	30,50 [27,3; 34,2]**
Общие липиды в сыворотке крови, г/л	5,0 [4,5; 6,0]	6,0 [5,25; 6,70]
Триглицериды в сыворотке крови, ммоль/л	0,51 [0,46; 0,57]	0,55 [0,46; 0,59]
Холестерин в сыворотке крови, ммоль/л	1,20 [1,10; 1,30]	1,50 [1,10; 1,70]
Глюкоза-6-фосфат-дегидрогеназа в гемолизатах крови, мкМ НАДФН/мин г Нв	85,20 [74,70; 96,00]	104,0 [91,30; 112,0]*
Глутатионредуктаза в гемолизатах крови, мкМоль/мин г Нв	1,7 [1,2; 1,7]	4,30 [3,1; 4,8]**
Глутатионтрансфераза в гемолизатах крови, мкМоль/мин г Нв	1,0 [0,80; 1,30]	0,90 [0,75; 1,00]
Супероксиддисмутаза в гемолизатах крови, мкг/мл	31,00 [25,00; 39,00]	28,0 [25,0; 31,0]
Свободные SH-группы в гемолизатах крови, мкМ SH/мл	97,10 [87,9; 102,60]	93,40 [84,3; 102,6]
Малоновый диальдегид в сыворотке крови, нмоль/мл	5,0 [2,5; 6,25]	5,0 [2,5; 7,50]
Битирозин в сыворотке крови, усл. ед.	0,62 [0,49; 0,91]	0,67 [0,59; 0,86]
Триптофан в сыворотке крови, усл. ед.	24,73 [22,43; 25,84]	23,43 [22,32; 27,74]

П р и м е ч а н и е : * - различия статистически значимы относительно контроля, р <0,05; ** - различия статистически значимы относительно контроля, р <0,01.

Результаты исследования показали, что в печени крыс наблюдалась активация маркерного фермента цикла трикарбоновых кислот -сукцинатдегидрогеназы, активность которого увеличилась у подопытных животных на 32 %. Данные изменения говорят об интенсификации функционирования цикла Кребса, что, по-види-мому, необходимо для энергизации клеточного дыхания и усиления поставок энергетических эквивалентов АТФ, НАДН для адаптации клеточного метаболизма в гепатоцитах.

При воздействии нефтепродуктов в течение 1 месяца отмечено статистически значимое увеличение активности ферментов, входящих в систему антиоксидантной защиты организма, глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы - на 22,07 % и глутатионредуктазы - в 2,5 раза в гемолизатах крови. Рост активности фермента глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы связан с необходимостью образования большего количества НАДФН, требуемого для восстановления окисленного глутатиона в реакции, катализируемой глутати- онредуктазой. При этом изменения других показателей АОС у животных опытной группы (активность супероксиддисмутазы и глутатион-трансферазы, уровень свободных SH-групп в гемолизатах крови) не отмечено. Содержание малонового диальдегида, битирозина и триптофана не отличалось от показателей контрольной группы.

Выводы:

• 1.    В результате исследований установлено, что повторное внутрижелудочное введение нефтепродуктов в различных дозах в течение месяца не приводит к появлению выраженных симптомов интоксикации и гибели животных, что свидетельствует об отсутствии у них способности к кумуляции на уровне проявления смертельных эффектов. Коэффициент кумуляции составил >5,1. По степени выраженности кумулятивного эффекта нефтепродукты классифицируются как обладающие слабой кумулятивной активностью (четвертая группа кумулятивности) [4]. Длительное поступление нефтепродуктов оказывало определеннное влияние на функции мочевыделительной системы, которое проявилось в увеличении ОКМ почек, разнонаправленным в зависимости от дозы изменением содержания в моче общего белка, мочевины, креатинина и хлоридов. Отмечено негативное влияние на печень, о чем свидетельствует увеличение ОКМ печени и уровня общего билирубина в сыворотке крови. Повторное поступление нефтепродуктов повлияло на липидный обмен – снижение содержания в сыворотке крови триглицеридов и холестери-

• на и морфологический состав крови – увеличение уровня гемоглобина, гематокрита, тромбоцитов и среднего объема тромбоцита. При поступлении нефтепродуктов развивались изменения в системе «перекисное окисление липидов – антиоксидантная система защиты организма», проявляющиеся накоплением в крови малонового диальдегида и свободных SH-групп в гемолизатах крови, а также увеличением активности ферментов супероксиддисмутазы и глута-тионредуктазы.

• 2.    Нефтепродукты в условиях длительного эпикутанного воздействия на 2/3 поверхности хвостов белых крыс не вызывали клинических симптомов интоксикации, развития эритемы и отека, а также гибели животных. При трансдермальном пути поступления наблюдалось общетоксическое действие на организм, которое проявилось в снижении массы тела подопытных животных. Отмечено негативное воздействие на функциональное состояние мочевыделительной (увеличение содержания мочевины в моче и креатинина в сыворотке, снижении клиренса креатинина) и гепатобилиарной систем (увеличение ОКМ печени). Наблюдалась активация сукцинатдегидрогеназы в гомогенатах печени, что свидетельствует об усилении процессов энергетического обмена в митохондриях клеток. При трансдермальном поступлении нефтепродуктов отмечена активация системы антиоксидантной защиты организма (увеличение активности глюкоза-6-фосфат-дегидро-геназы и глутатионредуктазыв гемолизатах крови).