Трансферазы в тканях печени у крольчат в растительную фазу питания

Определение активности ферментов в тканях органов у животных в постнатальном онтогенезе позволяет установить закономерности становления обменных процессов в тканях органов и систем организма у растущего молодняка, выявлять их особенности структурнофункционального совершенствования каждого вида животного в отдельные фазы развития и организовать соответствующие питание и уход за ними.

Проведенные исследования отдельных авторов позволили выяснить характер возрастных изменений активности ферментов в тканях разных пищеварительных органов у молодняка животных, в том числе и трансаминаз [3, 4, 5, 7, 8, 9]. Выяснилось, что у растущих животных наиболее интенсивные возрастные изменения ферментов в тканях изучаемых органов происходят в переходные фазы питания и стабилизируются с началом дефинитивного питания. Так, как у каждого вида животного генетически обусловлены свои возрастные биологические особенности совершенствования висцеральных органов. Нами проведены научные исследования по изучению возрастных изменений трансаминах у крольчат с момента рождения до двадцати четырех суточного возраста [1, 2]. В настоящей работе излагаем результаты исследований активности трансаминаз у крольчат с месячного возраста.

Материалы и методы. Для изучения изменений активности ферментов трансфераз (аспрататаминотрансферазы – АсАТ, аланиниаминотрансферазы – АлАТ и гамма-глутамиламинотрансфераза – ГГТ) были отобраны 30, 45, 60, 90 и 120 суточные крольчата породы серый великан, выращенные в личном подсобном хозяйстве Ивановой Л. И., по 5 голов в каждом возрастном сроке. Животных декапитировали [10], из брюшной полости извлекали печень, промывали ее холодным физиологическим раствором, разделяли на шесть долей и замораживали жидким азотом в сосуде Дюара. В условиях научной лаборатории кафедры агрохимии и экологии колориметрическим методом с использованием набора реагентов компании ОАО «Витал Девелопмент Корпорэйшн» СПб определяли активность АлАТ, АсАТ и ГГТ в соответствии с методиками, описанными в справочном пособии [6]. Исследования активности ферментов в пробах тканей печени повторяли дважды. Расчет активности ферментов проводили по калибровочным графикам с использованием программного комплекта

«MicrosoftExcel 2007».

Результаты исследований.

Активность фермента АлАТ (мкмоль/г*ч) у тридцатисуточных крольчат в тканях долей печени определяется следующими величинами: хвостатой – 31,4±0,4, сосцевидной – 23,6±0,2, правой – 23,1±0,3, левой наружной – 29,8±0,2, левой внутренней – 25,6±0,4 и квадратной – 21,5±0,3. По сравнению с двадцатичетырехсуточным возрастом уровень этого фермента в тканях всех исследуемых долей печени снижается: хвостатой – в 1,9 раза, р<0,001; сосцевидной – в 2,5 раза, р<0,001; правой – в 2,8 раза, р<0,001; левой наружной – в 2,0 раза, р<0,001; левой внутренней – в 2,3 раза, р<0,001 и квадратной – в 2,5 раза, р<0,001.

У сорокапятисуточных крольчат активность фермента АлАТ(мкмоль/г*ч) за последующие 15 суток жизни достоверно увеличивается в тканях всех исследуемых долей печени: хвостатой – в 1,5 раза, р≤0,001 до 46,5±1,9; сосцевидной – в 1,4 раза, р≤0,001 до 33,5±2,8; правой – в 2,6 раза, р≤0,001 до 52,2±2,6; левой наружной – в 2,2 раза, р≤0,001 до 64,7±3,6; левой внутренней – в 1,9 раза, р≤0,001 до 48,3±2,5; квадратной – в 3,0 раза, р≤0,001 до 65,7±2,6.

К шестидесятисуточному возрасту величина фермента в тканях исследуемых долей печени продолжает увеличиваться: хвостатой – в 2,2 раза, р≤0,001 до 67,8±2,7; сосцевидной – в 2,7 раза, р≤0,001 до 64,4±2,9; правой – в 2,8 раза, р≤0,001 до 65,7±1,9; левой наружной – в 3,0 раза, р≤0,001 до 89,5±3,2; левой внутренней – в 2,6 раза, р≤0,001 до 65,9±2,8; квадратной – в 3,1 раза, р≤0,001 до 68,4±2,7.

У девяностосуточных крольчат уровень АлАТ в тканях долей печени, наоборот, достоверно снижается: хвостатой – на16,6%, р≤0,05 до 56,5±2,6; сосцевидной – на 16,7%, р≤0,05 до 53,6±2,9; правой – 20,2%, р≤0,01 до 52,4±1,7 и левой наружной – на 43,9%, р≤0,001 до 50,2±1,2. В тканях левой внутренней доли активность снижается на 13,3%, р≤0,05 до 57,1±2,8 и квадратной доли – на 11,1%, р≤0,05 до 60,8±2,7, однако такие разницы недостоверные.

К возрасту четырех месяцев активность этого фермента у крольчат в тканях долей печени стабилизируется на уровне трехмесячных.

Следовательно, наиболее интенсивные возрастные изменения активности АлАТ у месячных крольчат обнаруживаются в тканях сосцевидной и квадратной (2,5 раза), правой (2,8 раза), у сорокапятисуточных - выявляются в тканях левой наружной долей (2,2 раза), правой (2,6 раза) и квадратной (3,0 раза)

Активность фермента АсАТ (мкмоль/г*ч) у месячных крольчат в тканях исследуемых долей печени определяется следующими величинами: хвостатой – 59,8±1,4, сосцевидной – 47,9±0,9, правой – 59,3±1,6, левой наружной – 60,5±2,6, левой внутренней – 57,7±1,9 и квадратной – 58,4±0,9. У месячных крольчат, при сопоставлении с крольчатами двадцатичетырехсуточного возраста, выявляется увеличение уровня фермента в тканях исследуемых долей печени: хвостатой – в 2,7 раза, р<0,001; сосцевидной –в 2,5 раза , р<0,001; правой – в 4,4 раза, р<0,001; левой наружной – в 3,8 раза, р<0,001; левой внутренней – в 3,7 раза, р<0,001 и квадратной – в 4,1 раза, р<0,001.

У сорокапятисуточных крольчат активность фермента достоверно снижается в тканях левой наружной доли, на 24,7%, р≤0,05 до 45,5±2,4 и в тканях левой внутренней доли на 17,8%, р≤0,05 до 47,4±1,3. Изменение активности в тканях остальных изучаемых долей печени недостоверно и колеблется в пределах уровней месячных крольчат.

У двухмесячных крольчат, при сравнении с предыдущим возрастом, выявляется дальнейшее достоверное снижение величины АсАТ в тканях следующих исследуемых долей печени: хвостатой – на 16,6%, р≤0,05 до 35,7±0,9; сосцевидной – на 35,7%, р≤0,001 до 34,8±0,7; правой – 22,9%, р≤0,01 до 35,3±0,9 и левой наружной – на 43,9%, р≤0,001 до 34,8±0,9. В тканях левой внутренней доли активность фермента снижается на 13,3%, р≥0,05, до 33,2±0,9 и квадратной доли – на 11,1%, р≥0,05 до 34,5±0,7, однако такие возрастные изменения недостоверные.

Уровень АсАТ у трехмесячных крольчат по сравнению с предыдущим возрастом достоверно снижается в тканях правой, левой наружной и левой внутренней долей соответственно на 16,7%, р≤0,01 до 29,4±0,4, на 18,7%, р≤0,001 до 28,3±0,5 и на 25,9%, р≤0,05 до 31,1±0,8. В тканях таких долей как хвостатой, правой и квадратной долей возрастное изменение активности фермента несущественно.

Уровень АсАТ, также как и уровень АлАТ, с четырехмесячного возраста в тканях изучаемых долей печени стабилизируется.

Следовательно, наиболее интенсивные изменения активности фермента АсАТ у месячных крольчат происходят в тканях квадратной (4,1 раза) и правой (4,4 раза), у сорокапятисуточных крольчат - обнаруживаются в тканях левой наружной доли (на 24,7%), шестидесяти суточных – в тканях сосцевидной (на 35,7%) и левой наружной (на 43,9%)

Активность фермента ГГТ (мкмоль/г*ч) в тканях исследуемых долей печени у месячных крольчат имеет следующие показатели: хвостатой – 123,7±4,4, сосцевидной – 131,6±3,8, правой – 93,4±2,9, левой наружной – 186,3±4,6, левой внутренней – 60,9±3,1 и квадратной – 83,3±2,5.Показатель активности фермента в тканях изучаемых долей печени, по сравнению с предыдущим возрастом, снижается: хвостовой – в 1,9 раза, р<0,001;сосцевидной – в 1,6 раза, р<0,001; правой – в 2,1 раза, р<0,001; левой наружной – в 1,2 раза, р<0,01; левой внутренней – в 3,6 раза, р<0,001 и квадратной – в 3,4 раза.

У сорокапятисуточных крольчат активность фермента в тканях всех исследуемых долей достоверно увеличивается: хвостатой – в 2,2 раза, р≤0,001 до 278,4±5,7; сосцевидной – в 2,0 раза, р≤0,001 до 264,5±4,8; правой – в 2,4 раза, р≤0,001 до 227,5±4,9; левой наружной – в 1,6 раза, р≤0,001 до 298,3±5,7; левой внутренней – в 3,7 раза, р≤0,001 до 224,6±4,6 и квадратной – в 3,0 раза, р≤0,001 до 252,7±5,7.

Величина фермента у двухмесячных крольчат в тканях всех изучаемых долей печени, по сравнению с сорока пяти суточными, наоборот, снижается: хвостатой – на 53,4%, р≤0,001 до 129,8±4,9; сосцевидной – на 52,3%, р≤0,001 до 126,6±3,9; правой – на 48,8%, р≤0,001 до 116,4±4,9; левой наружной – 48,3%, р≤0,001

до 154,3±3,8; левой внутренней – на 20,3%, р≤0,001 до 179,1±4,6 и квадратной – на 18,4%, р≤0,01 до 206,1±5,5.

К трехмесячному возрасту крольчат уровень фермента ГГТ повторно, существенно увеличивается в тканях следующих изучаемых долей печени: хвостатой – в 1,5 раза, р≤0,001 до 197,4±4,9; сосцевидной – в 1,6 раза, р≤0,001 до 204,7±5,4; правой – в 1,8 раза, р≤0,001 до 212,9±4,8; левой наружной – в 1,5 раза, р≤0,001 до 237,6±5,7 и левой внутренней – в 1,5 раза, р≤0,001 до 265,6±5,3. В тканях квадратной доли возрастное изменение активности фермента недостоверно.

У четырехмесячных крольчат активность фермента в тканях долей печени поддерживается на том же уровне, что и у трехмесячных.

Обсуждение результатов. У исследуемых крольчат активность АлАТ в тканях долей печени с возрастом увеличивается и максимального значения она достигает в возрасте два месяца. В последующие возрастные сроки происходит стабилизация фермента на относительно высоком уровне.

Активность АсАТ в тканях долей печени наиболее повышена у крольчат в возрасте 30 и 45 суток. С двухмесячного возраста наблюдается снижение уровня фермента в тканях всех долей печени и его стабилизация в последующие возрастные сроки.

Активность ГГТ в тканях долей печени с возрастом крольчат изменяется неравномерно. Она достоверно и существенно возрастает у 45-суточных и значительно снижается у шестидесятисуточных. У четырехмесячных крольчат активность этого фермента в тканях долей печени сохраняется на уровне трехмесячных.

Заключение (выводы). Таким образом, результаты по определению активности трансфераз в тканях разных долей печени с месячного по четырехмесячный возраст крольчат свидетельствуют, что возрастные изменения АлАТ, АсАТ и ГГТ происходят с разной интенсивностью в разные фазы постнатального онтогенеза. Это связано, по-видимому, с тем, что в каждую возрастную фазу отдельные доли печени включаются в разнообразные функциональные системы в связи с изменением состава растительного корма и с неодинаковой потребностью участия ферментов трансфераз в обменных процессах. С окончательным переходом на растительный тип питания, с наступлением физиологической зрелости, с трехмесячного возраста, уровень ферментов АлАТ и ГГТ стабилизируется на более высоком уровне. Активность АсАТ, наоборот, с двухмесячного возраста стабилизируется на более низком уровне.

Резюме

Характер возрастных изменений трансфераз в тканях долей печени у крольчат в растительную фазу питания до трехмесячного возраста разнообразный, и их уровень стабилизируется с наступлением физиологической зрелости.