Валидация молекулярно-генетических маркеров гена восстановления Rfo у рапса селекции ВНИИМК

Перспективы современной селекции рапса направлены на создание гибридов, которые могут давать прибавку урожайности и увеличение сбора масла до 50 %. Для промышленного производства гибридов используются технологии с привлечением линий с цитоплазматической мужской стерильностью (ЦМС) и линий, обладающих геном восстановления фертильности (Rfо), которые обеспечивают контролируемую гибридизацию. Использование маркеров гена Rfо может способствовать сокращению времени и стоимости получения гибрида. В связи с этим актуальна валидация маркеров гена восстановления фертильности для внедрения в селекционную практику. Для валидации маркеров гена Rfо испытали четыре пары праймеров и изофермент PGI2 на линияхвосстановителях фертильности пыльцы рапса и линиях с ЦМС, а также 103 растениях, фенотипированных по признаку фертильность – стерильность по наличию или отсутствию пыльцы в период цветения. Подобрана оптимальная буферная система для разделения изоферментов PGI2 в крахмальном геле. Аллель, обозначенный как Pgi2 FF, показал ассоциацию с геном Rfо. Однако визуализация маркера сложна, трудозатратна, дорога, в связи с чем использование белкового маркера неэффективно. Анализ линий рапса с помощью аллельспецифичных праймеров выявил ассоциацию трех ДНКмаркеров с признаком восстановления фертильности пыльцы. Их валидирование на фенотипированных растениях рапса, показало амплификацию ожидаемых маркерных фрагментов у растенийносителей гена Rfо в среднем в 96 % случаев. Обсуждаются возможные причины несоответствия фенотипического проявления признака и аллельного состояния маркера. С помощью ПЦР в режиме реального времени был оптимизирован процесс отбора носителей гена Rfо.