Влияние антиоксидантов на формирование иммунитета при вакцинации собак против чумы плотоядных

Напряженность иммунитета после вакцинации у собак и кошек зависит от целого ряда факторов . По мнению ряда авторов (Devlin P. et al., 2000; Smith B.H.E. et al., 2000; Koelsch S. et al., 2001) иммунный ответ на биопрепараты можно стимулировать , включая в рацион кормления мелких домашних животных антиоксиданты .

Недавние исследования специалистов центра WALTHAM показали , что включение в рацион животных повышенной дозы антиоксидантов стимулирует иммунные реакции . Сообщалось , что исследователи обогащали рацион собак « антиоксидантным коктейлем ». Стимулирующий эффект был достигнут как у щенков , так и у взрослых собак (Harper E.J., 2002).

Кроме того, «антиоксидантный коктейль» использовался для активизации гуморального иммунитета у котят. В качестве объектов исследования были выделены две группы котят: опытная и контрольная. Всех котят содержали до отъёма на базисном сбалансированном рационе для растущих котят, а затем опытной группе начали вводить «антиоксидантный коктейль». В возрасте 9 и 12 недель всех котят иммунизировали против вируса герпеса кошек (FHV), вируса панлейкопении кошек (FPV), калицивируса кошек (FCV). Взятие образцов крови и определение титров специфических противовирусных антител проводили перед первичной вакцинацией для определения иммунологического фона, затем через 1и 2,5 недели после неё, перед повторной вакцинацией и через 1,2 и 4 недели после неё. Титры антител против FHV и FCV определяли методом нейтрализации сыворотки, а против FPV- методом ингибирования агглютинации. У котят, рацион которых был обогащён комплексом антиоксидантов, гуморальный ответ на иммунизацию против FHV был выражен сильнее, чем у котят контрольной группы. Различия в титрах антител были статистически достоверны в сроки от 4 до 7 недель после вторичной вакцинации. Была выражена тенденция к усилению иммунного ответа на иммунизацию против FPY у котят опытной группы. Достоверных различий в иммунном ответе на вакцинацию против FCV выявлено не было. Таким образом, «диета для иммунитета» оправдала своё название. Из данных последнего исследования вытекает заключение о значительном усилении иммунных реакций организма при снабжении его кормами, обогащёнными комплексом антиоксидантов. У котят опытной группы иммунный ответ развивался быстрее и носил более выраженный характер.

В 2003 году Осиповой С . А . с соавт . были проведены исследования по изучению влияния антиоксидантов , входящих в состав кормов суперпремиум класса , которые производит компания “MARS”. Было установлено , что уровень противохламидийных антител , выявляемых в РСК и ИФА , у кошек , которых кормили готовыми рационами “Advance”, через 4 недели после вакцинации против хламидиоза был достоверно выше , чем у кошек , которые питались обычными кормами . Титры антител были в среднем соответственно на 1,2 и 1,8 log₂ выше , чем у животных контрольной группы .

В 2004 году Равиловым Р . Х . с соавт . было изучено влияние антиоксидантов , входящих в состав корма “WHISKAS”, который производит компания “MARS”. Было установлено , что уровень противохламидийных антител , выявляемых в РСК и ИФА , у кошек , которых кормили готовыми рационами , через 4 недели после вакцинации против хламидиоза были в среднем соответственно на 1,14 и 1,57 log₂ выше , чем у животных контрольной группы .

В 2006 году Кашов В . Н . с соавт . изучали влияние антиоксидантов , входящих в состав готовых рационов компании “MARS” премиум класса – “PEDIGREE” на уровень специфических антител после вакцинации собак против хламидиоза . Было установлено , что уровень противохламидийных антител , выявляемых в РСК и ИФА , у собак , которых кормили готовыми рационами , через 4 недели после вакцинации против хламидиоза были в среднем соответственно на 1,22 и 1,74 log 2 выше , чем у животных контрольной группы .

Полученные экспериментальные данные показали новые возможности оптимизации иммунного ответа при вакцинации кошек и собак .

Целью наших исследований было изучение влияния комплекса антиоксидантов , входящих в состав корма “PEDIGREE”, на иммунный ответ при вакцинации собак против чумы плотоядных .

Было проведено три серии опытов , в каждой из них по принципу аналогов были подобраны опытные и контрольные группы животные ( по 3 в каждой ). Опытные группы животных кормили готовыми рационами компании “MARS” премиум класса – “PEDIGREE”, контрольные – обычными кормами ( мясом , субпродуктами , крупами и овощами ).

Поскольку любая резкая смена питания является сильным стрессом для организма и может вызвать проблемы с пищеварением и усвоением пищи , смена рациона должна быть постепенной и занимать по времени не менее одной недели . В течение этого периода пищеварительный тракт животного и , в первую очередь , ферментные системы печени и поджелудочной железы , адаптируются к новому типу рациона . В данном случае мы использовали дробный переход на сухой корм , каждые 3 дня увеличивая его содержание по отношению к общему объему на 25% ( таблица 1).

1. Схема перевода собак с обычных кормов на готовые рационы

Дни	Состав рациона
	Обычные корма		Готовый рацион
	количество	%	количество	%
1-3	75	75	15	25
4-6	50	50	30	50
8-9	25	25	45	75
10	0	0	60	100

Нормирование объема рациона проводилось согласно рекомендациям компании - изготовителя с учетом живой массы каждого . Одним из существенных условий для оптимизации усвоения рационов был постоянный доступ к свежей питьевой воде .

Собак иммунизировали вакциной Мультикан -8 ( НАРВАК , Россия ), которая содаржит антигенный компонент возбудителя чумы плотоядных . У иммунизированных животных брали кровь до и через 1, 2, 3, 4 и 8 недель после вакцинации . Взятие крови осуществляли из вены сафена . Место пункции выстригали и обрабатывали спиртовым тампоном . Кровь брали в объеме 0,5-1 мл , помещали в термостат при 37⁰ С на 45-60 минут , затем “ обводили ” и оставляли в холодильнике при 4⁰ С на 16-18 часов .

В процессе экспериментальных исследований для выявления специфических антител применяли разработанную нами иммуноферментную тест-систему, с использованием антигенов, изготовленные путем лизиса культур вируса чумы плотоядных (штамм «ЭПМ»).

Позитивные сыворотки получали путем иммунизации собак возбудителем чумы плотоядных . Негативные сыворотки подбирали из числа проб полученных от неиммунных животных .

ИФА выполняли по непрямому методу , на микротитрационных планшетах из полистирола отечественных , изготовленных на ПО ВНИИ медицинской техники ( г . Москва ). В качестве конъюгата использовали белок А , меченный пероксидазой хрена . Исследуемые сыворотки титровали начиная с разведения 1:100.

Результаты учитывали инструментально на фотометрах фирмы Titerter модификации Multiskan при длине световой волны 492 нм , измеряя оптическую плотность ( ОП ) цветной реакции ферментзависимой метки с субстратом . Результат подлежал учету , если среднее значение оптической плотности ( ОП ) отрицательных контролей ( ОП ср . К -) не превышало 0,2 оптические единицы ( о . е .), а среднее значение ОП положительных контролей ( ОП ср . К +) составляло не менее 0,8 о . е . Положительными считали образцы исследуемых сывороток , ОП которых превышала критическое значение ОП ( ОП крит .), которое рассчитывали по формуле : ОП крит .= ОП ср . К - + 0,2 о . е .

Результаты испытания сывороток крови вакцинированных собак в ИФА представлены в таблице 2.

При испытании в ИФА сывороток крови вакцинированных собак установлено , что специфические антитела у животных опытной группы выявлялись иммунопероксидазным методом уже через неделю после прививки у 100% животных .

Обобщенные результаты всех опытов представлены на рисунке 1.

1. Сероконверсия противочумных антител у опытных и контрольных вакцинированных собак

2. Сероконверсия противочумных антител у опытных и контрольных собак

Серия опытов	Группа	№ жив - ых	Титры антител при исследовании через
			1 неделю	2 недели	3 недели	4 недели	8 недель
I	опытная	1	1:100	1:200	1:200	1:400	1:200
		2	1:100	1:200	1:400	1:800	1:400
		3	1:100	1:400	1:800	1:1600	1:400
	контрольная	1	1:100	1:100	1:200	1:400	1:200
		2	1:100	1:200	1:200	1:400	1:200
		3	1:100	1:100	1:100	1:200	1:200
II	опытная	1	1:100	1:200	1:400	1:400	1:200
		2	1:200	1:400	1:800	1:1600	1:800
		3	1:100	1:200	1:400	1:800	1:400
	контрольная	1	-	1:100	1:200	1:200	1:100
		2	1:100	1:200	1:200	1:400	1:200
		3	1:100	1:100	1:200	1:200	1:100
III	опытная	1	1:100	1:200	1:200	1:400	1:200
		2	1:100	1:200	1:400	1:800	1:400
		3	1:100	1:400	1:800	1:800	1:400
	контрольная	1	-	1:100	1:200	1:200	1:100
		2	1:100	1:200	1:200	1:200	1:200
		3	1:100	1:100	1:200	1:400	1:200
В среднем по опытным группам			1:111±9	1:267±16	1:467±34	1:844±41	1:378±29
В среднем по контрольным группам			1:77±4	1:133±10	1:189±13	1:289±16	1:167±15

В результате проведенных исследований установлено , что уровень специфических антител против вируса чумы плотоядных на всем протяжении опыта у собак , которых кормили готовыми полноценными рационами “PEDIGREE” для собак , был достоверно выше , а через 4 недели после вакцинации против чумы плотоядных у собак опытной группы титры антител , выявляемых в ИФА , были в среднем на 1,46 log₂ выше , чем у животных контрольных групп .

Таким образом , полученные нами экспериментальные данные свидетельствуют , что иммунный ответ на вакцину против чумы плотоядных у собак , которых кормили готовыми рационами “PEDIGREE”, содержащими комплекс антиоксидантов (“ антиоксидантный коктейль ”), оказался достоверно интенсивнее .

ВЛИЯНИЕ АНТИОКСИДАНТОВ НА ФОРМИРОВАНИЕ ИММУНИТЕТА ПРИ ВАКЦИНАЦИИ СОБАК ПРОТИВ ЧУМЫ ПЛОТОЯДНЫХ

Сагдиев Д . И ., Равилов Р . Х .

Резюме

Иммунный ответ на вакцину против чумы плотоядных у собак , которых кормили готовыми рационами “PEDIGREE”, содержащими комплекс антиоксидантов оказался достоверно интенсивнее .

INFLUENCE OF ANTIOXIDANTS ON IMMUNITY AT VACCINATION OF THE DOGS AGAINST A DOG DISTEMPER

Sagdiev D.I., Ravilov R.Kh.