Влияние «Аркусита» на биохимические, иммунологические показатели сыворотки крови у серебристо-черной лисицы (silver-black fox)

Для коррекции и поддержания гомеостаза зверей используют пробиотики, пребиотики, сорбенты. Они различаются по биологической природе и, соответственно, по механизму действия, но существует потребность в новых биопрепаратах, которые восстанавливают нарушение нормальной микрофлоры, восстанавливают дисбактериоз [4], поддерживают гомеостаз, а также продуктивные качества и физиологическое состояние пушных зверей [5, 7]. Использование биологически активных веществ в звероводстве подтверждено многочисленными исследованиями, и все чаще стала появляется информация о положительных результатах, полученных в результате их применения [8, 13]. Об исследованиях применения биологически активных веществ у серебристо-черной лисицы доступны единичные сведения, в них изучено влияние на биохимическую картину крови в зависимости от сезонов года, типов кормления Balakirev N.A., и др. A. Kizhina и др., изучали биохимические показатели у определенной группы норок разного пола и возраста или при введении в рацион биологически активной добавки. Березина Ю.А., [9, 10] изучала биохимическую картину крови серебристого песца и серебристо-черной лисицы только в зависимости от пола, возраста и сезона. Использование антиоксидантных препаратов является новым направлением их практического использования в клеточном пушном звероводстве [11, 13].

В своей работе мы использовали Аркусит, ТУ 9325-005-51022776-2007, (Разработаный институтом Биохимфизики им. Н.М. Эмануэля РАН и МГАВМиБ им. К.И. Скрябина) [1, 2], который оказывает положительное влияние на физиологическое состояние животных, повышает защитные механизмы организма и приросты живой массы.

Материал и методы исследований . В работе было использовано поголовье серебристо-черной лисицы, принадлежащее ООО племзвероводческому хозяйству «Вятка» Кировской области. Из племенных самок серебристо-черной лисицы (silver-black fox) по принципу групп-аналогов сформированы 2 группы: контрольная (n=1235) и опытная (n=1164). Во время эксперимента звери обеих групп получали общехозяйственный рацион. Опытные группы лисицы в течение 2-х месяцев перед гоном и до щенения 10-дневными курсами с 10-дневными перерывами получали дополнительно к корму препарат «Аркусит» в дозе 20 мкг/кг массы тела. Навеску препарата «Аркусит» растворяли в воде, подогретой до 50 ⁰С. Полученный раствор добавляли в корм и тщательно перемешивали. Звери контрольной группы препарат не получали.

Кровь для исследований у серебристо-черной лисицы брали (n=10 каждой группы) из латеральной подкожной вены голени (telae Vienna tibia) до начала опытов и в конце проведения опытов.

Белковые фракции в сыворотке крови определяли нефелометрическим методом по В.Я. Антонову с соавт. [3]. Лизоцимную активность сыворотки крови – по В. Г. Дорофейчук [12]. Активность щелочной фосфатазы, аланинаминотрансферазы (АлАТ), аспартатаминотрансферазы (АсАТ), глюкозы, общего белка сыворотки крови определяли на полуавтоматическом биохимическом анализаторе «Biochim SA» (США, 2019 г.) при помощи наборов реактивов фирмы Бактерицидную активность сыворотки крови определяли по методу Т.А. Кузьминой, О.В. Смирновой [14]. Опсоно – фагоцитарную реакцию – по А.С. Лабинской.

Полученные данные обрабатывали с использованием пакетов программ MS Excel и Statgraphics общепринятыми методами вариационной статистики, сравнение различий между группами проводили с применением непараметрического критерия (U) Вилкоксона-Манна-Уитни. Статистически значимыми считали различия с р<0,05. Эксперименты на животных проводили в соответствии с методическими указаниями Балакирева Н.А. и др., [6]. Работа выполнена с соблюдением международных принципов Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным, принципов гуманности, изложенных в директиве Европейского сообщества (86/609/ЕС), и правил проведения работ с экспериментальными животными. Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных. [Приложение к Приказу МЗ СССР № 755 от данных осуществлена с использованием пакетов программ MS Excel и Statgraphics. Для сравнения изученных показателей между разными группами был использован непараметрический критерий (U) Вилкоксона–Манна–Уитни, статистически значимыми считали различия при p<0,05.

Результат исследований. Изучение белков сыворотки крови в связи с многообразием выполняемых биологических функций является актуальным, они поддерживают вязкость крови, осмотическое давление, транспорт многих веществ, регулируют постоянство рН крови, участвуют в свертывании крови, в иммунных процессах. Белковые фракции сыворотки крови позволяют провести дифференциацию отдельных видов гипо - и гиперпротеинемий, а также выявить профиль белковых фракций сыворотки крови при ряде заболеваний и состояний, не сопровождающихся изменениями общего содержания белка. (Таблица 1). Белковый индекс - это соотношение альбуминов к глобулинам (А/SГ), он показывает интенсивность белкового обмена. Предполагают, что от этого коэффициента зависит скорость оседания эритроцитов. Она повышается при увеличении глобулинов. У собак белковый индекс равен - 0,5-1,3, мы использовали данную норму, исходя из того, что лисица относится к семейству псовых.

Таблица 1 - Белковые фракции сыворотки крови у серебристо-черной лисицы до и после применения препарата «Аркусит»

Примечание: различия между группами лисиц достоверны * - Р<0,05

Как видим из таблицы № 1, у серебристо-черной лисицы после применения препарата «Аркусит» наблюдается достоверное увеличение общего белка и в - глобулинов в 1,4 раза (Р<0,05), а и y глобулиновых фракции - в 1,2 раза (Р<0,05). Белковый индекс в контрольной группе зверей был в 2 раза достоверно выше по сравнению с опытом, что указывает на уменьшение поступления белков с кормом, нарушение его переваривания, а, следовательно, приводит к алиментарной белковой недостаточности. При определении аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы, рассчитывали коэффициент де Ритиса, отражающий соотношение между активностью аминотрансфераз. В организме важно не только содержание веществ аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы крови, но и их соотношение друг к другу. В результате изучения биохимических показателей крови у серебристо-черной лисицы до и после применения препарата «Аркусит» были получены следующие результаты (Таблица 2).

Таблица 2 - Биохимические показатели сыворотки крови у серебристо-черной лисицы до и после применения препарата Аркусит

Примечание: различия между группами лисиц достоверны *- Р<0,05

Как видим из таблицы № 2, у опытной группы зверей снизилась концентрация щелочной фосфатазы в сыворотке крови в 1,8 раза (Р<0,05), показатель АлАТ - в 1,2 (Р<0,05), а содержание глюкозы в опытной группе повысилось в 2 раза (Р<0,05), по сравнению с контрольной группой. Уровень глюкозы в крови строго постоянен, так как используется как источник энергии, и она может быть в любой момент затребована организмом. Именно, глюкозой клетка организма быстро пополняет свой энергетический запас. Понижение глюкозы указывает о снижение запасов гликогена в печени и в мышцах, что мы наблюдаем у контрольной группы зверей. Этот период совпадает у самок серебристо-черной лисицы с подготовкой к щенению и активным использованием энергии в организме.

При исследовании иммунологических показателей в опытной группе после применения препарата «Аркусит» отмечали достоверное увеличение ОФР, фагоцитарного индекса, лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови (Таблица 3).

Таблица 3 - Иммунологические показатели у серебристо-черной лисицы до и после применения «Аркусит»

Примечание: различия между группами достоверны *-Р<0,05

Как видим из таблицы № 3, лизоцимная активность сыворотки крови повысилась в 1,3 раза (Р<0,05), реакция ОФР и фагоцитарный индекс - в 1,4 раза (Р<0,05), бактерицидная активность сыворотки крови - в 1,8 раза (Р<0,05) у животных опытной группы.

Фагоцитарная реакция филогенетически является одним из защитных механизмов животных и человека и характеризует его иммунную реакцию. Клеточная иммунная реакция представляет собой образование ретикулоэндотелиальной системы в ответ на введение антигена мелких долгоживущих лейкоцитов, сенсибилизированных лимфоцитов, которые принимают активное участие в нейтрализации болезнетворного антигена. Лизоцим – белковое вещество, фермент с молекулами небольшого размера, содержит 120 аминокислот, образующих единую полипептидную цепь. Противомикробное действие лизоцима объясняется тем, что он разрушает мукополисахаридную структуру бактериальной стенки, при этом нарушается осмотическое давление бактериальной клетки и она лизируется. Лизоцим, помимо прямой антибактериальной активности, обладает также свойством активации клеток РЭС и стимуляции фагоцитоза, а также активизирует продукцию нормальных и иммунных антител [15].

Заключение. Применение «Аркусита» в дозе 20 мкг/кг массы тела свидетельствует о благотворном влиянии на факторы неспецифической резистентности серебристо-черной лисицы. Концентрация щелочной фосфатазы в сыворотке крови у опытной группы снизилась в 1,8 раза (Р<0,001), показатель АлАТ – в 1,2 (Р<0,05). Концентрация глюкозы в опытной группе повысилась в 2 раза (Р<0,05) по сравнению с контрольной группой. У животных опытной группы лизоцимная активность сыворотки крови повысилась в 1,3 раза (Р<0,05), реакция ОФР и фагоцитарный индекс – в 1,4 раза (Р<0,05), бактерицидная активность сыворотки крови – в 1,8 раза (Р<0,05). Аркусит стимулирует синтез гамма-глобулинов, способствует повышению опсоно–фагоцитарной, бактерицидной активности сыворотки крови. Таким образом, анализ экспериментальных данных свидетельствует, что препарат «Аркусит» обладает выраженным иммуностимулирующим эффектом, обеспечивая активацию факторов неспецифической резистентности организма серебристо-черной лисицы.

Применение «Аркусита» в дозе 20 мкг/кг массы тела свидетельствует о благотворном влиянии на факторы неспецифической резистентности серебристо-черной лисицы. Концентрация щелочной фосфатазы в сыворотке крови у опытной группы снизилась в 1,8 раза (Р<0,001), показатель АлАТ – в 1,2 (Р<0,05). Концентрация глюкозы в опытной группе повысилась в 2 раза (Р<0,05) по сравнению с контрольной группой. У животных опытной группы лизоцимная активность сыворотки крови повысилась в 1,3 раза (Р<0,05), реакция ОФР и фагоцитарный индекс – в 1,4 раза (Р<0,05), бактерицидная активность сыворотки крови – в 1,8 раза (Р<0,05). «Аркусит» стимулирует синтез гамма-глобулинов, способствует повышению опсоно–фагоцитарной, бактерицидной активности сыворотки крови. Таким образом, анализ экспериментальных данных свидетельствует, что препарат «Аркусит» обладает выраженным иммуностимулирующим эффектом, обеспечивая активацию факторов неспецифической резистентности организма серебристо-черной лисицы.