Влияние гомогената трутневого расплода на половое поведение лабораторных животных

Проблема воспроизводства в животноводстве весьма многогранна. Она включает в себя вопросы физиологии полового цикла, как основы для правильного выбора времени осеменения; своевременной диагностики беременности и бесплодия; закономерностей родов и послеродового периода и многие другие, а также данные о факторах, влияющих на процессы размножения [4, 6].

Воспроизводство молодняка в скотоводстве является важнейшим процессом, так как от количества и качества полученного потомства зависит эффективность работы животноводческого предприятия. На процессы получения доброкачественного потомства влияет генетический статус родительского стада и его репродуктивные свойства. В регуляции полового созревания и формировании полноценного репродуктивного статуса большое значение имеет обеспеченность важнейшими биологически активными веществами [6, 12]

Современный период развития сельского хозяйства характеризуется значительными достижениями в области создания натуральных биологически активных добавок и применения их в кормлении сельскохозяйственных животных с целью нормализации полового поведения.

Они обладают широкой биологической активностью, влияют на репродуктивную, нейроэндокринную и иммунную системы, способствуют увеличению продолжительности жизни экспериментальных животных, проявляют антистрессорные свойства [8, 12].

Одним из перспективных продуктов, обладающих данными свойствами, является трутневый расплод. Трутневый расплод способствует более быстрому восстановлению биохимических показателей – концентрации тестостерона в крови и фруктозы в содержимом семенных пузырьков – и массаметрических параметров семенников, семенных пузырьков и предстательной железы у крыс-самцов после односторонней кастрации [2,10].

Благодаря позитивному влиянию трутневого расплода на репродуктивную функцию животных, открываются перспективы его практического применения при половых дисфункциях, связанных с андрогенной недостаточностью, в частности, вызванных психоэмоциональным перенапряжением, астенией, необходимостью длительного применения лекарственных средств, обладающих побочным действием в виде антиандрогенной активности [3, 7, 9, 11].

Цель данного исследования заключалась в исследовании влияния трутневого расплода на показатели половой активности лабораторных крыс-самцов.

Материал и методы исследований. Научный эксперимент проводился в условиях вивария ФГБОУ ВО Пензенский ГАУ на лабораторных крысах потомства Вистар в 2018-2021 гг.

Объектом исследования являлись лабораторные крысы самцы – потомство Вистар, возраста 6 месяцев (молодые половозрелые без опыта спаривания, М), возраста 12 месяцев (взрослые половозрелые с опытом спаривания без периода воздержания, В), возраста 24±3 месяца (старые с опытом спаривания и длительным периодом воздержания 6 мес., С). Животных помещали в экспериментальную комнату, в которой был установлен инверсионный режим освещения: искусственное освещение включалось в 20:00 (лампы дневного света) и выключалось в 8:00. Эксперимент начинали после полной адаптации животных к измененному световому режиму (через 3 недели). Воду и пищу (полнорационный комбикорм) животные получали adlibitum.

Отбор взрослых самцов осуществляли с помощью копуляторного теста, в опыт включали самцов, у которых в копуляторном тесте эякуляция происходила в течение первых 30 минут после предъявления рецептивной самки. В группе «молодые половозрелые без опыта спаривания» первичный копуляторный тест являлся первым опытом спаривания. В опыт отбирали самцов, у которых в первой эякуляционной сессии эякуляция происходила в течение первых 30 минут после предъявления рецептивной самки. На основании копуляторного теста животных распределяли в опытную и контрольную группу, с соблюдением однородности выборки. Животных с пограничными значениями показателей копуляторного теста из исследования исключали.

Старые животные, имевшиеся в наличии (9 особей), включались в эксперимент без отбора, с равномерным распределением показателей первичного теста между опытной и контрольной группами.

Копуляторный тест проводили в клетке из оргстекла размерами 80*50*25 см (длина*ширина*высота). После 20-25 минут адаптации самца к клетке в нее подсаживали рецептивную самку в искусственном эструсе (после овариэктомии). Искусственный эструс вызывали введением за 48 часов эстрадиола (коммерческий препарат «Месалин», в 1 мл содержит 0,2 мг эстрадиола бензоата, изготовитель – Интервет Интернешнл Б.В., Голландия, в дозе 0,1 мл подкожно) и за 4 часа до начала теста – подкожным введением 0,1 мл 1 % масляного раствора прогестерона. Тест проводили в период между 13 и 18 часами, контрольную и опытную группу обследовали в один день. На время проведения теста в помещении включали лампу красного цвета мощностью 20 ватт. Результаты теста записывали на видеопленку с последующей расшифровкой.

В тест включали две следующие друг за другом эякуляторные сессии, регистрировали компоненты половой активности: латентный период садки (ЛПС) – время от подсаживания самки до первой садки, число садок до эякуляции (без интромиссий и с интромиссиями) (САД), латентный период интромиссии (ЛПИ) – время от подсаживания самки до первой интромиссии, число интромиссий (ИНТР) до эякуляции, латентный период эякуляции (ЛПЭ) – время от первой интромиссии до эякуляции, рассчитывали вторичные показатели: частоту садок (ЧС) как среднее время между 2-мя садками в серии (ЛПЭ/САД), частоту интромиссий (ЧИ) как среднее время между двумя интромиссиями (ЛПЭ/ИНТР), постэякуляторный интервал (ПЭИ) – время между эякуляцией и первой интромиссией следующей сессии. Все временные интервалы выражали в секундах.

После проведения первичной оценки половой активности в копуляторном тесте животных распределяли по группам (опытная и контрольная) каждого возраста. Опытной группе в стандартный обще виварный рацион добавляли сухой гомогенат трутневого расплода в количестве 3 г на 1 кг корма. Контрольная группа получала стандартный обще виварный рацион. После 3-х недель применения сухого гомогената трутневого расплода повторяли копуляторный тест.

Для комплексной оценки половой активности предложены интегральные индексы, отражающие показатели либидо и потенции. Расчет интегральных индексов проводили из ранжированных значений.

Статистическую значимость различий значений интегральных индексов до и после проведения исследования проводили вычислением парного критерия Стьюдента.

Результат исследований.

Показатели половой активности молодых животных, полученные в первой эякуляторной сессии (Таблица 1), свидетельствуют о том, что первичный копуляторный тест (первый опыт спаривания), проведенный у животных, явился стимулятором последующей активности. Так, в контрольной группе изменились показатели САД и ИНТР в сторону увеличения, несколько увеличивался ЛПЭ, а длительность ПЭИ имела тенденцию к снижению. Однако изменение этих показателей не было статистически значимым.

Таблица 1 – Ранжированные показатели половой активности молодых животных в первой эякуляторной сессии

Показатель /группа	САД	ИНТР	ЛПС	ЛПИ	ЛПЭ	ПЭИ	ЧС	ЧИ
МК до	3,0± 0,65	2,86± 0,63	2,43± 0,29	2,57± 0,37	3,29± 0,47	3,14± 0,4	3,29± 0,36	3,14± 0,40
МК после	4,57±	4,29±	2,43±	2,43±	3,71±	2,71±	2,43±	2,71±
	0,43	0,47	0,53	0,53	0,57	0,64	0,30	0,18
МО до	2,75± 0,31	2,63± 0,37	3,25± 0,37	3,25± 0,37	2,63± 0,46	2,87± 0,64	2,75± 0,49	2,62± 0,46
МО после	5,0***±0,0	4,75**±	1,5**±	1,5**±	2,75±	2,38±	1,5**±	1,75**±
	0	0,25	0,19	0,19	0,37	0,38	0,33	0,41

Примечание: звездочками указана статистическая значимость отличий при проведении сравнения парным критерием Стьюдента (первичное и повторное обследование), * - Р<0.05; ** - P<0.01; *** - P<0.001

Таблица 2 – Ранжированные показатели половой активности молодых животных во второй эякуляторной сессии

Показатель/ группа	САД	ИНТР	ЛПЭ	ЧС	ЧИ
МК до	2,57±0,37	2,57±0,48	2,71±0,52	3,14±0,34	3,14±0,34
МК после	3,57±0,53	3,14±0,51	3,28±0,64	2,29±0,29	2,57±0,48
МО до	3,25±0,56	3,38±0,59	3,13±0,44	2,88±0,44	2,75±0,49
МО после	3,88±0,39	3,75±0,37	2,38±0,49	1,75*±0,31	1,63*±0,26

Примечание: звездочками указана статистическая значимость отличий при проведении сравнения парным критерием Стьюдента (первичное и повторное обследование), * - Р<0,05;

** - P<0,01; *** - P<0,001

Так, при первичном обследовании наблюдалось не увеличение числа садок и интромиссий по сравнению с первой сессией, а уменьшение, и соответственно уменьшался латентный период эякуляции. При вторичном испытании в контрольной группе наблюдалась тенденция к повышению числа садок и интромиссий с некоторым увеличением длительности латентного периода эякуляции. В опытной группе сохранялась тенденция к увеличению числа САД и ИНТР, но с уменьшением ЛПЭ.

Расчетные показатели частота садок и частота интромиссий в опытной группе молодых крыс во второй эякуляторной сессии статистически значимо уменьшались.

Данные изучения половой активности старых животных представлены в таблицах 5 и 6.

Таблица 3 – Ранжированные показатели половой активности взрослых животных в первой эякуляторной сессии

Показатель / группа	САД	ИНТР	ЛПС	ЛПИ	ЛПЭ	ПЭИ	ЧС	ЧИ
ВК до	3,0± 0,63	3,0± 0,55	2,2± 0,37	2,4± 0,51	2,2± 0,37	2,4± 0,40	2,6± 0,69	2,6± 0,51
ВК после	3,0±	3,0±	3,6*±	3,6*±	3,4*±	3,2±	3,4±	3,2±
	0,00	0,00	0,40	0,40	0,24	0,20	0,67	0,58
ВО до	3,4± 0,68	3,2± 0,80	3,6± 0,40	3,4± 0,40	3,2± 0,49	3,4± 0,51	3,4± 0,68	3,6± 0,74
ВО после	3,2±	3,2±	3,2±	3,6±	3,6±	3,0±	3,2±	3,4±
	0,49	0,20	0,58	0,61	0,51	0,63	0,66	0,51

Примечание: звездочками указана статистическая значимость отличий при проведении сравнения парным критерием Стьюдента (первичное и повторное обследование), * - Р<0,05; ** - P<0,01; *** - P<0,001

Таблица 4 – Ранжированные показатели половой активности взрослых животных во второй эякуляторной сессии

Показатель/ Группа	САД	ИНТР	ЛПЭ	ЧС	ЧИ
ВК до	2,8±0,66	2,6±0,51	2,6±0,24	2,6±0,24	2,6±0,24
ВК после	3,2±0,80	3,2±0,80	3,2±0,49	3,2±0,49	3,2±0,49
ВО до	3,2±0,58	4,0±0,71	3,2±0,49	3,4±0,40	3,2±0,49
ВО после	3,6±0,51	3,4±0,51	3,2±0,49	2,8±0,58	2,8±0,58

Таблица 5 – Ранжированные показатели половой активности старых животных в первой эякуляторной сессии

Показатель/ Группа	САД	ИНТР	ЛПС	ЛПИ	ЛПЭ	ПЭИ	ЧС	ЧИ
СК до	3,0±	4,0±	3,3±	3,0±	3,8±	3,7±	4,0±	4,0±
	0,71	0,58	0,25	0,0	0,48	0,76	0,58	0,58
СК после	2,8±	2,8±	1,5±	2,0±	2,5**±	3,0±	2,8±	3,0±
	0,25	0,63	0,50	0,58	0,29	0,82	0,50	0,41
СО до	3,4±	3,0±	2,8±	3,0±	3,2±	2,8±	3,0±	3,2±
	0,81	0,71	0,58	0,71	0,80	0,56	0,71	0,80
СО после	2,6±	2,6±	1,0±	2,6±	2,6±	2,8±	2,4±	2,4±
	0,81	0,98	0,00	0,98	0,74	0,76	0,75	0,75

Примечание: звездочками указана статистическая значимость отличий при проведении сравнения парным критерием Стьюдента (первичное и повторное обследование), * - Р<0,05;

** - P<0,01; *** - P<0,001

Ранжированные показатели половой активности взрослых животных опытной группы, представленные в таблицах 3 и 4, свидетельствуют о том, что введение в рацион кормления гомогената трутневого расплода не повлияло на временные интервалы и численные показатели у взрослых половозрелых животных, имеющих длительный опыт спаривания до начала эксперимента.

При изучении половой активности старых животных (Таблицы 5 и 6) отмечали статистически значимое укорочение латентного периода эякуляции у животных контрольной группы в первой эякуляторной сессии.

Таблица 6 – Ранжированные показатели половой активности старых животных во второй эякуляторной сессии

Показатель/ группа	САД	ИНТР	ЛПЭ	ЧС	ЧИ
СК до	2,7±0,29	3,0±0,50	3,0±0,50	3,0±0,00	3,0±0,00
СК после	3,0±0,82	2,5±0,96	2,5±0,96	2,8±1,03	3,0±0,91
СО до	3,5±0,86	3,0±0,73	3,3±0,76	3,0±0,73	3,0±0,73
СО после	3,3±0,76	2,5±0,86	1,8±0,67	1,8±0,43	1,8±0,50

Изменение ИИП в контрольной группе животных

Рисунок1 – Изменение интегрального индекса потенции при введении гомогената трутневого расплода

Изменение ИИП в опытной группе животных

Изменение ИИЛ в контрольной группе животных

Изменение ИИЛ в опытной группе животных

Рисунок 2 – Изменение интегрального индекса либидо при введении трутневого расплода

Включение в рацион кормления лабораторных животных вызвало изменение интегральных индексов потенции (ИИП) и либидо (ИИЛ) у животных различных возрастных групп

Из данных, представленных на рисунке 1, видно, что в группе молодых животных наблюдалось статистически значимое повышение показателя ИИП как в опытной, так и в контрольной группах, с уровнем значимости в контрольной группе

Р<0,05 и в опытной группе Р<0,001. Интегрированные показатели в группе взрослых и старых животных не изменялись.

На рисунке 2 демонстрируется статистически значимое повышение интегрального индекса либидо у молодых животных опытной (Р<0,001) и контрольной (Р<0,05) группы, а также статистически значимое повышение интегрального показателя либидо у старых животных опытной группы (Р<0,05).

Заключение. В опытной группе после применения гомогената трутневого расплода, наблюдалось статистически значимое увеличение количества садок и интромиссий, а также значительное сокращение ЛПС, ЛПИ, ЧС и ЧИ, что говорит о положительном влиянии трутневого расплода на показатели половой активности – либидо и потенцию в первой эякуляторной сессии.

Интересно, что половое воздержание в течение 3-х недель привело к статистически значимому снижению половой активности (увеличению ЛПС и ЛПИ) у контрольной группы животных, а также к удлинению латентного периода эякуляции, что считается положительным при оценке воздействия препаратов, но в данном случае может трактоваться как снижение темпов нарастания возбуждения от интромиссии к интромиссии, что наблюдается в норме. Результаты наших исследований схожи с научными данными Weizenbaum F.A., Matthews M. [13].

Данные, полученные в контрольной и опытной группе во время второй эякуляторной сессии, отличаются от данных, приведенных учеными под руководством Tajuddin. Данные, аналогичные полученным в данном исследовании, приводятся в работах Larsson Ketal и Beach F. [1, 5].

Учитывая, что механизмы регуляции полового поведения, такие как активирующий механизм, повышающий уровень полового возбуждения и приводящий к спариванию (либидо) и механизм, управляющий осуществлением самого спаривания и извержением семени (потенция), имеют различную регуляцию (либидо – передние отделы мозга и гормональный уровень, а потенция – нейронные механизмы спинного и продолговатого мозга), можно сделать предположение, что основное действие гомогената трутневого расплода реализуется за счет активации механизма полового возбуждения в передних отделах мозга.

В данной статье рассмотрена одна из наиболее актуальных проблем современного животноводства – поиск и применение натуральных биологически активных добавок в кормлении животных. В последнее время ведется поиск новых природных биостимуляторов, обладающих мягким стимулирующим действием на репродуктивный статус и половое поведение. Перспективным продуктом, с точки зрения нормализации полового поведения, является гомогенат трутневого расплода. Трутневый расплод представляет собой уникальный продукт пчеловодства, содержащий в сбалансированном сочетании ряд важнейших биологически активных компонентов: пептидов, липидов, аминокислот, гормонов, ферментов. Цель настоящего эксперимента заключалась в изучении влияния гомогената трутневого расплода на показатели половой активности крыс-самцов. Объектом исследования являлись лабораторные крысы самцы – потомство Вистар, возраста 6 месяцев, возраста 12 месяцев и возраста 24±3 месяца. Опытной группе в стандартный общевиварный рацион добавляли сухой гомогенат трутневого расплода в количестве 3 г на 1 кг корма. Контрольная группа получала стандартный общевиварный рацион.

В результате полученных данных установлено положительное влияние гомогената трутневого расплода на показатели половой активности – либидо и потенцию в эякуляторных сессиях молодых животных. Введение в рацион кормления гомогената трутневого расплода не повлияло на временные интервалы и численные показатели у взрослых половозрелых животных, имеющих длительный опыт спаривания до начала эксперимента. Установлено, что в группе молодых животных наблюдалось достоверное повышение интегрального индекса потенции, а также увеличение интегрального индекса либидо у молодых животных опытной и контрольной групп и у старых животных опытной группы.