Влияние экзогенного гепарина на морфологический состав периферической крови при чрескостном остеосинтезе по Илизарову

Известно, что гепарин как лекарственный препарат, обладающий широким спектром действия (липолитическим, противогипоксическим, анальгетическим, спазмолитическим, противовоспалительным и противоаллергическим) часто применяется в медицине. Механизму действия и клиническому эффекту гепарина посвящено немало работ [2, 5, 7, 8]. В то же время работы, по влиянию введения гепарина на состав периферической крови при чрескостном остеосинтезе встречаются крайне редко. В ранее проводимых нами исследованиях было показано действие экзогенного гепарина на репаративный остеогенез, поскольку известно, что между остеогенезом и кроветворением существует тесная взаимосвязь [1, 4].

В связи с этим была поставлена задача - изучить влияние гепарина на морфологический состав периферической крови при удлинении голени по Илизарову.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Эксперименты выполнены на 15 беспородных собаках в возрасте 1-2 года, массой 10-12 кг с длиной голени 12-16 см, которым накладывали аппарат Илизарова и проводили закрытую флексионную остеоклазию берцовых костей голени в средней трети диафиза. Через 7 суток после операции начинали дистракцию по 0,25 мм 4 раза в сутки. Период дистракции продолжался 28 суток, фиксации – 30 суток, через один месяц после снятия аппарата животных выводили из опыта.

Общий срок эксперимента 90 суток.

Животные были разбиты на две группы. В первую (контрольную) группу входило 6 собак, во вторую (опытную) 9 собак, которым внутримышечно вводили нефракционированный гепарин фирмы Рихтер в дозе 750 ед/кг веса тела в сутки (за два приёма). Венозную кровь из оперированной и здоровой конечностей исследовали в периоды: до операции, на 7, 14, 21, 28-е сутки дистракции и через один месяц после снятия ап- парата. Под микроскопом изучали следующие гематологические показатели: количество эритроцитов, ретикулоцитов, лейкоцитов, гематок- рит; проводили подсчет лейкоцитарной формулы. Полученные данные обработаны по Стьюденту.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ

Исходная картина периферической крови находилась в пределах физиологической нормы и на протяжении двух недель с момента операции мало изменялась. К концу 2-й недели периода дистракции у собак контрольной группы прослеживалось достоверное увеличение содержания эритроцитов (р<0,05). На протяжении последующей дистракции (21, 28 суток) количество эритроцитов уменьшалось, через 30 суток после снятия аппарата количество эритроцитов вновь увеличивалось в среднем на 23 % (р<0,05) по сравнению с дооперационным уровнем (рис. 1). Казалось бы, что полученные данные, а именно увеличение эритроцитов на этапах удлинения, противоречат исследованиям, ранее проводимым в нашем институте [1]. В опытной же группе со 2-й недели дистракции количество эритроцитов уменьшалось в среднем до 82 % и на таком уровне сохранялось до конца эксперимента.

Рис. 1. Динамика содержания эритроцитов в периферической крови

Для выявления механизма изменения числа эритроцитов при удлинении голени в обеих группах определяли содержание ретикулоцитов в периферической крови. Не вдаваясь в детальный анализ количественного изменения ретикулоцитов, отметим следующее: у контрольных животных на всем протяжении эксперимента наблюдался выраженный ретикулоцитоз (р<0,05). В опытной же группе активация ретикулоцитоза прослеживалась к концу периода удлинения. Через месяц после снятия аппарата количество ретикулоцитов в периферической крови приближалась к исходному уровню (рис. 2).

7 д         14 д        21 д        28 д       30 б/а периоды эксперимента (сутки)

Рис. 2. Динамика содержания ретикулоцитов в периферической крови

Лейкограмма животных отражала следую- щее: количественный состав лейкоцитов у собак контрольной серии (без введения гепарина) увеличивался сразу же после операции на 60 % (р<0,01) и на таком уровне сохранялся. Через один месяц после снятия аппарата число лейкоцитов в периферической крови приближалось к дооперационному значению (рис. 3).

Рис. 3. Динамика содержания лейкоцитов в периферической крови

В литературе имеет место мнение о том, что лейкоцитоз при удлинении голени связан с активацией белого ростка костномозгового кроветворения [1]. Соглашаясь с этим высказыванием, считаем, что не исключено и то обстоятельство, что в ряде случаев лейкоцитоз связан с процессами, происходящими в оперированной конечности (воспаление, отек). У животных, которым вводили гепарин, количество лейкоцитов в периферической крови на протяжении всего эксперимента почти не менялось по сравнению с дооперационными значениями.

Анализ формулы крови показал, что в период дистракции у животных опытной группы на всем протяжении эксперимента процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов, лимфоцитов, эозинофилов менялось незначительно. По всей вероятности, в данном случае экзогенный гепарин компенсировал дефицит эндогенного гепарина для сохранения стационарного состояния крови, поскольку показано, что при чрескостном остеосинтезе и в частности, на этой же модели опыта наблюдается, увеличение антигепариновой активности.

Под влиянием экзогенного гепарина сосудистая проходимость для клеток была более благоприятной в опытной группе животных. Не исключено и то обстоятельство, что избыток клеток белого ряда мигрировал в ткани, выполняя своё прямое назначение, им свойственна фагоцитарная функция. Нейтрофильные лейкоциты обладают способностью передвигаться, проходить через базальные мембраны и между клеточными элементами, направляясь к местам воспаления, тканевого распада, где находятся вредоносные агенты. Более того, лейкоциты принимают самое широкое участие в обмене гистамина и гепарина, когда реализуются антимикробные, антитоксические и другие важнейшие компоненты иммунологических реакций [5]. Необходимо обратить внимание и на то обстоятельство, что процентное содержание палочкоядерных нейтрофилов несколько возрастало в периоде дистракции, что мы связываем со способностью нейтрофильных лейкоцитов, стимулировать процессы регенерации (рис. 4).

периоды эксперимента (сутки)

Рис. 4. Динамика содержания палочкоядерных нейтрофилов в периферической крови

Особо следует остановиться и на изменениях абсолютного числа моноцитов (рис. 5). Учитывая тот факт, что между моноцитами и остеокластами существует определенная связь, изменения количества моноцитов отражались и на их активности [9]. В период дистракции в опытной группе их количество нарастало в большей мере, чем у контрольных животных. По всей вероятности, в тканях моноциты дифференцировались в органо- и тканеспецифические макрофаги, так как им также принадлежит важнейшая роль в процессах фагоцитоза, они способны удалять из организма отмирающие клетки, остатки разрушенных клеток, денатурирующий белок, бактерии и комплексы антиген-антитело. Более того, макрофаги участвуют в регуляции кроветворения, иммунном ответе, гемостазе, метаболизме липидов и железа [5].

Рис. 5. Динамика содержания моноцитов в периферической крови

Таким образом, введение в профилактической дозе экзогенного нефракционированного гепарина при удлинении голени у собак оказывает влияние на морфологический состав периферической крови.