Влияние кормовых добавок с содержанием фитаз грибного и бактериального происхождения на биохимические показатели крови японских перепелов (Coturnix japonica)

В последнее время все большее внимание уделяется использованию в кормлении сельскохозяйственной птицы различных препаратов фитазы. Современный рынок предлагает широкий ассортимент фитазных препаратов, в основном на основе фитаз микробного происхождения класса А (PhyА) и класса С (PhyС). Однако при прохождении таких препаратов через желудочно-кишечный тракт птицы происходят существенные потери фермента вследствие кислотной денатурации и протеолиза. Технология инкапсуляции фитазы в клетках дрожжей-продуцентов в качестве микроконтейнеров позволяет существенно сократить потери фермента, а также увеличить его термостабильность. Экстремофильные дрожжи Yarrowia lipolytica - перспективный объект современной биотехнологии, в частности для получения инкапсулированной фитазы. В настоящей работе впервые представлены доказательства высокой усвояемости японскими перепелами породы маньчжурские золотистые фитат-содержащих продуктов в присутствии инкапсулированной ОРФ относительно контроля и коммерческого препарата фитазы Ладозим прокси. Целью работы была оценка влияния кормовых добавок с содержанием фитаз грибного и бактериального происхождения на биохимические показатели японских перепелов. Исследования проводили в 2022 году на базе СГЦ «Загорское ЭПХ» - филиала ФНЦ ВНИТИП РАН (г. Сергиев Посад, Московская обл.) на перепелах (Coturnix japonica) породы маньчжурские золотистые. В рационе перепелов использовали наработанные пилотные партии кормовой добавки, содержащей микроинкапуслированную фитазу Obesumbacterium proteus , и коммерческую фитазу Ладозим прокси из Aspergillus ficuum (ООО «Биопрепарат», Россия), с активностью соответственно 500 и 4500 ед. фитазы/г. Для получения кормовой добавки на основе микроинкапуслированной фитазы O. proteus была проведена модификация методики получения биомассы клеток дрожжей Yarrowia lipolytica Po1f pUV3-Oр, трансформированных геном фитазы из O. proteus на основании вектора pUVLT2 с промотором митохондриального порина VDAC (Voltage Dependent Anion Channel). Было сформировано шесть групп перепелов 1-суточного возраста по 25 гол. в каждой, которые получали следующие типы корма: I группа (контроль+) - корм с содержанием общего фосфора 0,8 % (0,45 % доступного фосфора) без добавок; II группа (контроль-) - корм с содержанием общего фосфора 0,6 % (0,35 % доступного фосфора) без добавок; III группа - корм с добавкой микроинкапсулированной фитазы O. proteus в дозе 500 ед. фитазы/кг корма и содержанием общего фосфора 0,6 % (0,35 % доступного фосфора); IV группа - корм с добавкой микроинкапсулированной фитазы O. proteus в дозе 500 ед. фитазы/кг корма и содержанием общего фосфора 0,8 % (0,45 % доступного фосфора); V группа - корм с добавкой, содержащей искусственно внесенную коммерческую фитазу Ладозим прокси из A. ficuum в дозе 4500 ед. фитазы/кг корма, и содержанием общего фосфора 0,8 % (0,45 % доступного фосфора); VI группа - корм с добавкой, содержащей искусственно внесенную коммерческую фитазу Ладозим прокси из A. ficuum в дозе 4500 ед. фитазы/кг корма, и содержанием общего фосфора 0,6 % (0,35 % доступного фосфора). При выведении перепелов из эксперимента на 42-е и 60-е сут были отобраны образцы крови и тканей у 4 особей из каждой группы и определены гематологические показатели на автоматическом анализаторе URIT-3020 No 3020E01663 (КНР). Образцы тканей (грудные и бедренные мышцы) использовали для получения гистологических препаратов. Криосрезы анализировали с помощью микроскопа Axio Imager D2 («Zeiss», Германия) при увеличении ½400. На первом этапе развития (42-е сут) введение в рацион перепелов фитаз уменьшало показатели печеночных аминотрансфераз, щелочной фосфатазы и глюкозы, а также увеличивало содержание белка сыворотки крови. При введении в рацион птицы коммерческого препарата при дефиците фосфора в возрасте 60 сут наблюдалось возрастание содержания аспартатаминотрансферазы, щелочной фосфатазы, холестерина и триглицеридов, в то время как при применении инкапсулированной фитазы из O. proteus отмечалось увеличение количества общего белка и снижение печеночных ферментов. В 60-суточном возрасте в условиях полноценного приема фосфора кормовая добавка увеличивала содержание фосфора в сыворотке крови на 60 и 40 % для групп бактериальной и грибной фитазы, соответственно. Микроструктурный анализ гистологических срезов грудных мышц показал, что в мышцах перепелов, принимающих фитазу в качестве кормовой добавки, наблюдалась более упорядоченная архитектура миофибрилл с четко выраженными саркомерами, окрашенными ядрами миоцитов и поперечной исчерченностью волокон, что свидетельствовало о высоких качественных и технологических свойствах мяса.