Влияние нового пробиотического препарата на клиническое состояние, морфо-биохимические показатели крови и иммунный статус дойных коров

В ветеринарной практике использование биологически активных веществ связано с нормализацией физиологических, иммунологических механизмов защиты организма животных от болезней, вызываемых патогенными и условно-патогенными микроорганизмами [1, 5]. Пробиотики представляют собой группу полезных для организма микроорганизмов, назначение которых в реальной производственной практике связано с определенными трудностями – это недостаточная доказательная база наиболее эффективных форм выпуска препаратов, отсутствие единого стандарта производства, использование однотипных штаммов пробиотических культур в препаратах [2]. Именно поэтому современная аграрная сфера Российской Федерации все больше проявляет интерес к созданию новых биопрепаратов, добавок с улучшенными биологическими характеристиками для сельскохозяйственных животных [3, 4, 6, 7].

Цель наших исследований – изучить влияние нового пробиотического препарата, клиническое состояние, морфобиохимические показатели и иммунный статус дойных коров.

Материал и методы исследований. Исследования проводились в условиях кафедры технологии животноводства и зоогигиены федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н. Э. Баумана» и скотоводческого предприятия ООО «Дусым» Атнинского муниципального района Республики Татарстан. Данная молочная ферма специализируется на производстве цельного коровьего молока. Доение коров в условиях фермы проводится 2 раза в сутки в период разгара и спада, осуществляется переносными доильными аппаратами. В опыте были задействованы животные (n=24) в возрасте 3,0-3,5 летнего возраста с подтверждённым диагнозом субклинический мастит. Диагноз был поставлен при помощи портативного детектора обнаружения субклинического мастита на ранней стадий лактации с дисплеем на 4 четверти Draminski 4*2Q. Из числа животных по принципу пар аналогов были сформированы 2 группы по 12 коров в каждой. В опытную группу вошли коровы больные субклиническим маститом, соски вымени которых после каждого доения обрабатывались моющим пробиотическим средством на основе бактерии рода Bacillus, обладающим антибактериальным свойством в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов данного хозяйства. Новый пробиотический препарат представляет собой готовый раствор зеленого цвета с кисловатым запахом. Новое средство в своем составе содержит штаммы бактерии Bacillus subtilis и Bacillus amiloliquefaciens с содержанием 1,ОХЮ8КОЕ/см3. Штаммы выделены из жидкого кормового концентрата Споразина в условиях лаборатории ООО ТД «ЭкоФарм сервис». Новый пробиотический препарат используется для наружной гигиены вымени КРС после доения с целью защиты и увлажнения кожи сосков вымени. Инновационное средство наносится сразу после снятия доильного оборудования с применением специального стакана для окунания сосков. Концентрация рабочего раствора пробиотического препарата, предназначенного для обработки вымени лактирующих коров после доения составляет 3 %, а затраты на одно животное – 3-6 мл. В предварительном микробиологическом исследовании установлено, что наилучшие результаты по бактерицидной активности в данном хозяйстве наблюдались у штаммов продуцентов микроорганизмов Bacillus subtilis, штамм В-14293, в концентрации 1х108 КОЕ/мл и Bacillus amiloliguefaciens штамм ЕМТ-В12, в концентрации 1х108 КОЕ/мл. В контрольную группу вошли коровы больные субклиническим маститом, соски вымени которых после каждого доения обрабатывались пленкообразующим средством, изготовленный в ООО «ПК «Вортекс», в состав которого входит молочная кислота (около 5 %), деионизированная вода (30 % и более). Продолжительность опыта составляла 90 дней. Схема опыта представлена на рисунке 1.

Рисунок 1 – Схема опыта

Продуктивность коров определяли по результатам контрольного доения, проводится ежемесячно на протяжении всей лактации.

Кормление коров, используемых в эксперименте, осуществляли с учетом требуемых норм. В хозяйстве ООО «Дусым» преобладает сенажноконцентратный тип кормления, где корма сбалансированы по основным параметрам, включая макро-, микроэлементы и витамины. Режим кормления коров зависит от периода лактации (раздой, разгар и спад). Корма тщательно перемешиваются и раздаются на кормовые столы с использованием механизированной техники и прицепного измельчителя АКМ – 9 (агрегат кормовой многофункциональный), который готовит полноценную кормовую смесь из сена, соломы, силоса, комбикорма и минералов.

Кровь брали непосредственно утром натощак из хвостовой и яремной вены с соблюдение правил асептики и антисептики в вакуумные пробирки с клот-активатором для биохимических исследований (красная крышка) и с ЭДТА К2 LIND-VAC 1 для общего анализа (фиолетовая крышка). В пробирках на стенки для ускорения свертывания крови нанесен активатор образования сгустка (диоксид кремния – SiO 2 , также называется клот-активатор, АС, кремнезем), что способствует разделению сгустка и сыворотки до 48 ч без повторного центрифугирования. ЭДТА является предпочтительным антикоагулянтом для гематологических исследований, предотвращает свертывание крови путем блокирования ионов кальция. Анализы крови и сыворотки были проведены, согласно методикам клинической диагностики животных с использованием лабораторных анализаторов крови. Для проведения общего анализа крови применялся гематологический счетчик Mindray BC-2800 Vet, который определяет 19 параметров с дифференциацией лейкоцитов на 3 субпопуляции и строит гистограммы распределения. Биохимия крови опытных животных исследовалась в ветеринарной лаборатории с применением методики Кочкуровой.

Естественная резистентность представляет собой комплекс защитных механизмов организма от заболевания незаразной и инфекционной этиологии. В связи с этим были проведены исследования отдельных иммунологических показателей крови подопытных коров.

Достоверность полученных результатов осуществляли на компьютерной прогрaмме Excel.

Постановка эксперимента осуществлялась по методике профессора действительного члена ВАСХНИЛ А.И. Овсянникова (1976).

Результат исследований. На первом этапе у животных контрольной и опытной групп были взяты образцы венозной крови с целью диагностики степени проявления мастита (субклинического и клинического). Влияние нового пробиотического препарата на гематологические показатели изучали во время эксперимента по выявлению терапевтической эффективности инновационного средства при лечении скрытого мастита. Результаты сравнивали с контрольной группой, которым соски обрабатывались плёнкообразующим средством фирмы Вортекс. В таблице 1 представлены морфологические показатели крови животных.

Общий анализ крови у коров опытной и контрольной групп, представленный в таблице 1 позволяет сделать вывод, что параметры соответствует физиологической норме. Заметные изменения в сравнении с контролем были отмечены в крови у животных в марте месяце. Использование пробиотического препарата у коров опытной группы достоверно повысила количество форменных элементов крови (эритроциты) на 20 % (Р<0,05). Количество лейкоцитов у животных находились в пределах физиологической нормы и не имели достоверной разницы между обеими группами. Изменения наблюдаются в эритроцитарных индексах, наблюдается достоверное увеличение уровня гемоглобина на 23 % (Р<0,05).

Согласно данным таблицы можно заключить, что у всех животных контрольной и опытной групп биохимические показатели крови были в пределах нормы и не имели достоверной разницы по сравнению друг с другом. В конце эксперимента в опытной группе наблюдалось незначительное увеличение содержания общего белка на 15 % по сравнению с биологическим контролем.

По показателям естественной резистентности можно судить о состоянии здоровья и продуктивности животных. Для оценки состояния иммунитета до и после применения нового пробиотического препарата были взяты образцы венозной крови с целью выявления фагоцитарной активности лейкоцитов. Моноциты, нейтрофилы играют важную роль в защите организма от нежелательной микрофлоры. Результаты исследования представлены в таблице 3.

Таблица 1 – Морфологические показатели крови опытных животных на фоне применения нового пробиотического препарата

Примечание: *Р≤0,05

Таблица 2 – Биохимические показатели крови опытных животных на фоне применения нового пробиотического препарата

Таблица 3 – Показатели иммунитета коров на фоне применения нового пробиотического препарата

Примечание: * Р≤0,05; *** Р≤0,001

На основании результатов по определению влияния нового пробиотического препарата на основе рода Bacillus на показатели естественной резистентности можно сделать вывод, что у опытных коров в конце исследования наблюдались достоверные увеличения фагоцитарной активности на 17 % (*Р<0,05), бактерицидной активности на 6 % (*** Р<0,001) по сравнению с животными контрольной группы. Повышение фагоцитарной активности свидетельствует об активации организма успешно бороться с патогенными и условно-патогенными микроорганизмами. Использование нового пробиотического препарата способствовала увеличению количества Т и В лимфоцитов на 24 и 19 % соответственно. Разница в иммунологических показателях крови (количество Т и В лимфоцитов) опытной и контрольной групп статистически не достоверна.

Заключение. Анализируя полученные данные, можно заключить, что использование нового пробиотического препарата на основе рода Bacillus способствует улучшению отдельных показателей крови, а именно эритроцитов и гемоглобина. Новый пробиотический препарат оказывает терапевтическое действие на организм крупного рогатого скота, что позволяет судить о повышении уровня естественной резистентности.