Влияние препарата Устилагин на течение экспериментального эндометрита

Актуальность проблемы воспалительных заболеваний органов репродуктивной системы определяется их высокой частотой, склонностью к длительному течению, которое сопровождается нарушением репродуктивной функции и развитием полисистемных расстройств [1]. Перспективность использования лекарственных средств на основе природных соединений позволяет рассматривать их как необходимый компонент при комплексном лечении воспалительных заболеваний матки. Возможность сочетания противовоспалительного и утеротонического действия в одном комплексном препарате обеспечивает дополнительные преимущества при лечении эндометритов. Поэтому, несмотря на то, что современный арсенал противовоспалительных препаратов достаточно обширен, проблема изыскания новых высокоэффективных, безвредных и удобных в применении средств остается нерешенной.

Материалы и методы исследований. Экспериментальные исследования проводились на белых беспородных половозрелых крысах [2] с исходной массой тела 230-250 г. Животных содержали в условиях стационара кафедры ветеринарной хирургии и вводили в опыт после двухнедельного карантина.

Экспериментальное повреждение матки, острый эндометрит, производили введением 0,2 мл 2% водного раствора формалина (формалин вводили уретральным катетером с мандреном в полость рога матки под контролем УЗИ) [3].

Патологоанатомическое исследование проводили после эвтаназии животных на 3 и 8 сутки эксперимента (декапитация под эфирным наркозом). Изучали морфологические изменения в выделенном органокомплексе репродуктивной системы у двух здоровых крыс и 18 крыс после моделирования воспаления в процессе консервативного лечения (рис.1).

Для гистологического исследования материал фиксировался в 10% нейтральном формалине по Лилли и после соответствующей проводки по спиртам возрастающей концентрации и обезвоживания [4,5] заливался в парафин. Изготавливались продольные и поперечные гистологические срезы толщиной 5-7 мкм, которые окрашивались гематоксилином и эозином, а также по ван Гизону.

Схема эксперимента.

• 1 .Моделирование острого эндометрита.

• 2 . Изучение действия препарата Устилагин.

Группы животных:

1-ая - интактные крысы (n=2)

2-ая – крысы, которым вызывали экспериментальное повреждение матки (острый эндометрит) введением 0,2 мл 2% водного раствора формалина (формалин вводили уретральным катетером с мандреном в полость рога матки под контролем УЗИ).

После моделирования острого эндометрита формировали экспериментальные группы:

• -    1 группа - контрольная группа (6 животных) - подкожно вводили физиологический раствор в дозе 0,2 мл 1 раз в сутки в течение 7 дней после введения формалина;

• -    2 группа - 1-ая опытная группа (6 животных), подкожно вводили препарат Устилагин в дозе 0,2 мл 1 раз в сутки в течение 7 дней после введения формалина;

• -    3 группа – 2-ая опытная группа (6 животных) – подкожно вводили Устилагин в дозе 0,2 мл 2 раза в сутки в течение 7 дней после введения формалина.

Результаты исследований. Морфологические характеристики матки при патологии. В результате проведенных исследований нами выявлено, что введение 0,2 мл 2% водного раствора формалина провоцирует развитие воспалительного процесса в матке. Независимо от патологического состояния репродуктивной системы хорошо выражена дифференциация матки на анатомические отделы: шейку, тело, и рога (Рис.1). Патологически измененный рог матки макроскопически характеризуется увеличением длины и диаметра, выраженным сосудистым рисунком, расширением полости, скоплением в ней содержимого. В нашем случае присутствовал слизисто-геморрагический экссудат. Увеличение длины и диаметра исследуемого рога по отношению к интактному является характерным признаком его патологического состояния.

Эндометрий занимает

Рис.1. Выделенный органокомплекс репродуктивной системы крысы на 2 сутки после введения формалина (левый рог интактный, правый с выраженными признаками воспаления).

Гистологические исследования

Гистологическое строение матки крысы в норме. Двураздельная матка крысы, состоящая из тела и маточных рогов, образована слизистой оболочкой (эндометрий), мышечным слоем (миометрий) и серозной оболочкой (периметрий). Вокруг матки имеется скопление жировой клетчатки (параметрий).

около 2/3 всей толщины стенки матки и выстлан однослойным призматическим эпителием. Хорошо различаются функциональный и базальный слои. Встречаются различной длины простые трубчатые, в основном ветвистые маточные железы, проходящие через всю толщу эндометрия, иногда проникающие в поверхностные слои миометрия. Эпителий желез низкий цилиндрический, аналогичный по строению поверхностному эндометриальному. Ядра удлиненной формы, занимают большую часть клетки, интенсивно и гомогенно окрашиваются гематоксилином. Митозы отсутствуют. Строма богата клетками (фибробласты, лимфоциты, отдельные гранулоциты) и соединительнотканными волокнами. Собственная пластинка слизистой оболочки представлена рыхлой волокнистой неоформленной соединительной тканью, содержащей макрофаги и ретикулярные клетки.

Мышечная оболочка тела и рогов образована тремя слоями: кольцевым, косым и продольным, состоящими из гладкомышечных клеток с прослойками рыхлой волокнистой соединительной ткани.

Периметрий образован мезотелием и примыкающей к мышечной оболочке рыхлой волокнистой соединительной тканью.

Гистологическое строение матки крысы после введения формалина.

Во всех наблюдениях в маточных рогах, куда вводился формалин, имела место воспалительная реакция разной степени выраженности. Стенка матки была полнокровна, имелся выраженный периваскулярный и интерстициальный отек, распространяющийся и на миометрий. Воспаление в ряде случаев захватывало не только эндометрий, но и мышечный слой (метроэндометрит). В некоторых наблюдениях было тотальное поражение всех слоев матки с вовлечением ее тела и параметрия и наличием лейкоцитов в просвете маточного рога.

Воспалительные инфильтраты очагового или диффузного характера были представлены преимущественно нейтрофилами с примесью лимфоцитов, макрофагов, отдельных эозинофилов и плазматических клеток. Иногда встречались как микроабсцессы, так и более обширные лейкоцитарно-некротические массы с расплавлением ткани. Наблюдалась пролиферация эндометриального эпителия, его некроз на отдельных участках и десквамация с частичной облитерацией полости рога матки. В ряде случаев эпителий отсутствовал на большом протяжении полости рога. Маточные железы часто были подвержены деструкции.

При этом не оставались интактными и маточные рога, куда формалин не вводился. Здесь имело место расширение просвета и полнокровие сосудов, интерстициальный и периваскулярный отек. Маточные железы были гиперплазированы. В ряде случаев имелась незначительная нейтрофильная инфильтрация вокруг сосудов.

Гистологическое строение матки крысы после введения формалина на фоне подкожного введения физраствора.

Введение физраствора не оказывало каких-либо изменений на гистологическую картину воспалительного процесса в матке.

Гистологическое строение матки крысы после введения формалина на фоне лечения Устилагином.

В данной группе наблюдений интенсивность воспалительной реакции была значительно ниже. Практически отсутствовали случаи диффузной воспалительной инфильтрации, сохранялись отдельные скопления клеток в толще эндометрия вокруг сосудов и в подслизистом слое. Происходило перераспределение состава воспалительного инфильтрата в сторону макрофагов и лимфоцитов с уменьшением нейтрофилов. Иногда обнаруживались небольшие лимфоидноклеточные инфильтраты округлой формы, напоминающие небольшие лимфоидные фолликулы. Воспаление чаще всего ограничивалось эндометрием, без вовлечения мышечного слоя. Деструктивно-некротические процессы, как правило, не встречались. Эндометриальный и железистый эпителий находились в состоянии умеренной гиперплазии без нарушения нормальной гистологической структуры.

Следует отметить и тот факт, что, в отличие от группы, где препарат не применялся, противоположный введению формалина маточный рог оставался совершенно интактным, без видимых изменений.

В то же время нам не удалось выявить каких-либо отличий в реакции матки на одно- или двукратное введение Устилагина. Реактивные изменения в обеих группах были идентичными, уровень снижения воспалительного процесса был практически одинаковым.

Выводы : 1. Введение формалина в полость маточных рогов позволяет моделировать острую воспалительную реакцию от эндометрита и метроэндометрита вплоть до тотального поражения всех слоев с вовлечением окружающей клетчатки (параметрит). 2. При введении формалина в один из маточных рогов противоположный рог не остается интактным. В нем развиваются определенные патологические изменения, прежде всего, микроциркуляторные расстройства. 3. Введение Устилагина значительно снижает воспалительную реакцию, ограничивает распространение воспаления далее слизистой оболочки и предотвращает развитие деструктивно-некротических процессов. Противоположный маточный рог при этом остается неизмененным. 4. Частота введения препарата Устилагин (1 или 2 раза в день) не влияла на степень выраженности гистологических признаков, характеризующих воспалительные процессы в матке.

Заключение. Результаты проведенного исследования демонстрируют высокую эффективность препарата Устилагин при применении его на ранних сроках воспалительного процесса в матке. По данным гистологического исследования уменьшается воспалительная реакция, изначально протекающая с наличием обширных лейкоцитарнонекротических масс и травматического отека, ускоряется процесс пролиферации.

Анализируя полученные результаты, можно отметить, что помимо противовоспалительного действия препарат Устилагин повышает тонус гладкой мускулатуры матки. Препарат не оказывает негативного влияния на общее состояние животного, не вызывает значимых изменений морфологического состава крови.

На основании данных, полученных в ходе изучения специфической активности препарата Устилагин на модели асептического экспериментального эндометрита, можно сделать заключение о перспективности применения этого препарата клинически больным животным при лечении острого эндометрита.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Андреев Н.А. О некоторых различиях в патологии соединительной ткани при воспалительных и дистрофических процессах / Н.А. Андреев // Соединительная ткань в норме и патологии.— Новосибирск: Наука, 1968.—С.402—407. 2. Антоньев А.А. О влиянии экспериментального дерматита на состояние внутренних органов и функции кожи у животных / А.А. Антоньев, В.Ф. Прицепов, Е.М. Марьясис // Вопросы экспериментальной дерматологии.—1975.—Вып. 6.—С.96—99. 3. Ботоева Е.А. Фармакотерапия экспериментального эндометрита средством растительного происхождения / Е.А. Ботоева // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН.—2011.—№1, Часть 2—С.247—248. 4. Ромейс Б. [Romies В.]. Микроскопическая техника. – М.: Изд-во иностр. лит., 1954. – 720 с. 5. Меркулов Г.А. Курс патологической техники.-М.:Медгиз, 1956.

ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА УСТИЛАГИН НА ТЕЧЕНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ЭНДОМЕТРИТА

Валеева А.Н., Шакирова Ф.В., Цыплаков Д.Э., Капай Н.А., Файзуллина Н.З Резюме

В ходе исследования проведено гистологическое исследование биопсийного материала из рогов матки с описанием макроморфологических характеристик матки крыс при моделировании экспериментального эндометрита. Доказано, что препарат Устилагин оказывает противовоспалительное действие, повышает сократительную способность миометрия, способствует улучшению микроциркуляции в органах малого таза.

EFFECT OF USTILAGIN DURING THE EXPERIMENTAL ENDOMETRITIS

Valeeva A.N., Shakirova F.V., Tsyplakov D.E., Kapay N.A., Fayzullina N.Z.