Влияние препаратов «Имунофан» и «Фоспренил» на морфологический состав крови телят

На сегодняшний день острой проблемой в животноводстве остаются болезни молодняка, а именно телят. Болезни молодняка, обусловленные пониженной резистентностью, наносят значительный ущерб хозяйству. Вовремя проведенные диагностические исследования значительно облегчают задачу ветеринарных врачей и соответственно могут предотвратить падеж и болезни стада [1].

Участие оксида азота (II) в различных физиологических и патофизиологических процессах позволяет предполагать его в качестве сигнального звена прогнозирования исхода и течения болезней [2, 5, 6].

NO играет роль универсального модулятора различных функций организма, представляет собой нейтральный радикал с неспаренным электроном, как межклеточный и внутриклеточный мессенджер, он участвует в регуляции дыхания, поддержании иммунного статуса, сердечно-сосудистом гомеостазе, мерцании ресничек эпителия бронхов, клеточном апоптозе [1, 2]. По количеству метаболитов оксида азота (II) в крови можно судить о патогенезе заболевания.

NO, производный от NOS-II, полностью утвердился в качестве важного модулятора в иммунной системе. Многие другие типы клеток иммунной системы производят NO [3].

Оксид азота (II) участвует во врожденном иммунитете как токсичный агент по отношению к инфекционным организмам, но может вызывать или стимулировать гибель иммунной клетки хозяина, регулируя тем самым специфический иммунитет. NO также может вызывать токсические реакции против других тканей хозяина потому, что он генерируется на высоких уровнях при определенных типах воспаления [4].

Исходя из этого, актуальным является вопрос изучения морфологического состава крови во взаимосвязи с активностью нитроксидергической системы при применении иммуномодуляторов, как одного из показателей, характеризующих неспецифическую резистентность организма.

Цель исследования – изучить влияния иммуномодуляторов «Имунофан» и «Фоспренил» на морфологический состав крови телят и уровень стабильных метаболитов оксида азота (II) у телят.

Для достижения цели поставлены следующие задачи: изучить уровень стабильных метаболитов оксида азота (II) в плазме крови телят при применении иммуномодуляторов «Имунофан» и «Фоспренил»; изучить морфологический состав крови телят при применении иммуномодуляторов «Имунофан» и «Фоспренил»; выявить зависимость морфологического состава крови от активности нитроксидергической системы телят.

Материал и методы исследований. Для достижения поставленной цели эксперименты проводились на кафедре физиологии и патологической физиологии ФГБОУ ВО Казанской ГАВМ, а также в условиях лаборатории зооантропонозных инфекций ФГБНУ «ФЦТРБ–ВНИВИ».

Неспецифическую резистентность изучали на телятах голштино-фризской породы в возрасте от 0 до 3 месяцев, которые содержались на базе животноводческого хозяйства ООО «БИРЮЛИ МОЛОКО» Высокогорского района Республики Татарстан.

Животные были разделены на 3 группы: первая группа: контрольная– клинически здоровые телята (n=5); вторая группа: опытная – телята после введения иммуномодулятора «Имунофан»-(n=5); третья группа: опытная – телята после введения иммуномодулятора «Фоспренил»-(n=5).

Иммуномодуляторы вводили согласно инструкции по применению в дозе 1 мл подкожно в область средней трети шеи.

Взятие крови у телят производилось из ярёмной вены с помощью индивидуальной вакуумной системы в 8-9 часов утра. Определение содержания метаболитов оксида азота (II) проводили до введения и через 5 и 20 дней после применения иммуномодуляторов.

Об активности системы оксида азота (II) в крови судили по содержанию нитрат-и нитрит-анионов (NOx) в плазме крови, которую определяли путём восстановления нитратов до нитритов однократной навеской цинковой пыли, обработанной аммиачным комплексом сульфата меди, с последующим фотометрическим определением нитритов с помощью реактива Грисса при длине волны 520,0 нм на КФК-3-01 [7, 8].

Морфологический состав крови телят определяли с помощью автоматического гематологического анализатора Mindray BC-2800-VET (Китай) с использованием стандартного набора реактивов.

Статистическую обработку результатов эксперимента проводили с использованием критерия Стьюдента. Нормальность распределения выборки определяли по методу Колмогорова-Смирнова.

Результат исследований. В ходе экспериментов было установлено, что содержание нитрат- и нитрит-анионов в плазме крови у контрольной группы здоровых телят составляет 28,9± 1,89 мкмоль/л. В первой группе телят, которым вводили препарат «Имунофан», суммарный уровень стабильных метаболитов оксида азота (II) на 5 сутки составил 42,44±4,17 мкмоль/л, что превышает в 1,47 раза (р<0,01) аналогичный показатель контрольной группы. На 20 сутки уровень стабильных метаболитов оксида азота (II) составил 45,91±2,24 мкмоль/л, что также превышает показатель контроля в 1,59 раза (р<0,001).

Рисунок 1 – Уровень нитрат - и нитрит-анионов в сыворотки крови телят, мкмоль/л. Примечание: * - достоверно по сравнению с контрольной группой (р<0,01); ** - достоверно по сравнению с контрольной группой (р<0,001)

Таблица 1 – Влияние иммуномодуляторов «Имунофан» и «Фоспренил» на морфологический состав крови телят, (n=5)

Показатель	OS CO Щ CD и к	о	Опытные группы
			I группа		II группа
			на 5 сутки	на 20 сутки	на 5 сутки	на 20 сутки
RBC(эритроциты), 1012/л	9,0-10,2	8,65±0,56	6,81±0,28*	7,91±0,21	7,94±0,34	7,68±0,39
WBC(лейкоциты), 109/л	6,1-9,1	7,86±0,19	9,5±0,1	7,78±0,24	9,5±0,24***	10,12±0,11
Hb(гемоглобин),г/л	90-140	101,8±4,4	92,44±2,01	92,9±1,39	93,88±3,37	93,86±1,57
Ht(гематокрит),%	35-37	32,96±1,29	26,74±1,59*	29,18±1,79	31,1±2,36*	27,28±1,29
LYM(лимфоциты),%	40-65	47,6±1,1	59,6±1,48***	57,0±1,3***	56,4±0,89***	49,4±1,4
MCV(сред.     объем эритроцита), fl, фл	39-55	36,13±1,54	32,5±4,50	43,7±14,17	36,5±1,62	42,23±11,27
MCH(сред.    содер. гемоглобина       в эритроците), пг	12-18	16,4±6,92	12,57±1,12	25,17±19,21	16,5±6,9	22,95±16,5
PLT(тромбоциты), 109/л	260,0700,0	628,0±37,63	554,0±34,3	593,4±22,50	669,4±35	596,2±22,5
PCT(тромбокрит),%	(0,1-0,5)	0,36±0,015	0,30±0,03	0,4±0,03	0,4±0,02	0,40±0,01
Палочкоядерные, %	2-5	5,2±0,42	6,8±0,95	8,4±1,03*	6,6±0,91	9,0±0,61***
Сегментоядерные,%	20-35	39,0±2,84	25,8±0,95***	27,6±1,14***	28,6±1,95**	35,0±1,26
EO(эозинофилы),%	5-8	2,2±0,55	1,6±0,27	1,8±0,22	2,0±0,35	2,0±0,35
BAS(базофилы),%	0-2	1,2±0,22	1,8±0,42	1.4±0,27	1,4±0,27	1,4±0,27
MON(моноциты), %	2-7	4,8±0,55	4,4±0,76	3,8±0,65	5,0±0,35	3,2±0,42*

Примечание: * - p<0,05; ** - p<0,01; *** - p<0,001 в сравнении с контролем

Во второй группе телят, которым вводили препарат «Фоспренил», на 5 сутки уровень стабильных метаболитов оксида азота (II) достоверно не изменился. На 20 сутки уровень стабильных метаболитов оксида азота (II) составил 52,97±3,96, что превышает аналогичный показатель контрольной группы в 1,82 раза (р<0,001) (Рисунок 1).

После введения препарата «Имунофан» в организме телят отмечаются следующие морфологические изменения состава крови на 5 сутки эксперимента: уровень эритроцитов в крови уменьшается в 1,27 раза (6,81±0,28*1012/л против 8,65±0,56*1012/л в контроле, р<0,05); гематокрит также уменьшается в 1,22 раза (26,74±1,59 % против 32,96±1,29 % в контроле, р<0,05); уровень лимфоцитов телят повышается в 1,24 раза (59,6±1,48 % против 47,6±1,1 % в контроле, р<0,001); палочкоядерные нейтрофилы повышаются в 1,3 раза (6,8±0,95 % против 5,2±0,42 % в контроле); уровень сегментоядерных нейтрофилов понижается в 1,51 раза (25,8±0,95 % против 39,0±2,84 % в контроле, р<0,001).

На 20 сутки эксперимента после введения препарата «Имунофан»: количество лимфоцитов повышается (57,0±1,3 % против 47,6±1,1 % в контроле, р<0,001); палочкоядерных нейтрофилов увеличивается в 1,6 раза (8,4±1,03 % против 5,2±0,42 % в контроле, р<0,05); сегментоядерных нейтрофилов понижается в 1,41 раза (27,6±1,14 % против 39,0±2,84 % в контроле, р<0,001).

Анализируя изменения морфологического состава крови телят после введения препарата «Фоспренил» на 5 сутки отметили следующие изменения: количество лейкоцитов повышается в 1,2 раза (9,5±0,24 109/л против 7,86±0,19 109/л в контроле, р<0,001); сегментоядерных нейтрофилов понижается в 1,35 раза (28,6±1,95 % против 39,0±2,84 % в контроле, р<0,01); лимфоцитов повышается в 1,17 раза (56,4±0,89 % против 47,6±1,1 % в контроле, р<0,001).

На 20 сутки после введения препарата «Фоспренил» в организме телят отмечаются следующие морфологические изменения состава крови: количество лейкоцитов повышается в 1,29 раза (10,12±0,11*109/л против 7,86±0,19*109/л в контроле); лимфоцитов повышается в 1,03 раза (49,4±1,4 % против 47,6±1,1 % в контроле); моноцитов уменьшается в 1,5 раза (3,2±0,42 % против 4,8±0,55 % в контроле, р<0,05); уровень палочкоядерных нейтрофилов повышается в 1,73 раза (9,0±0,61 % против 5,2±0,42 % в контроле, р<0,001).

Таким образом, установлена зависимость между уровнем стабильных метаболитов оксида азота (II) и общим количеством лейкоцитов в крови. Повышение количества лейкоцитов крови обусловлено повышением количества палочкоядерных нейтрофилов. Этот факт доказывает участие NO в механизмах неспецифического иммунитета за счет повышения активности нейтрофилов.

Заключение. Повышение уровня стабильных метаболитов оксида азота (II) в плазме крови телят после применения иммуномодуляторов «Имунофан» и «Фоспренил» свидетельствует об участии NO в реакциях неспецифического иммунитета, а также в механизмах действия иммуномодуляторов в организм.

Установленная зависимость между уровнем стабильных метаболитов оксида азота (II) и количеством палочкоядерных нейтрофилов доказывает, что NO является одним из регуляторов активности нейтрофилов.

Резюме

Целью работы являлось изучение влияния иммуномодуляторов «Имунофан» и «Фоспренил» на интенсивность образования оксида азота (II) и морфологический состав крови у телят. Повышение уровня стабильных метаболитов оксида азота (II) в плазме крови телят после применения иммуномодуляторов свидетельствует об участии NO в реакциях неспецифического иммунитета. Также установленная зависимость между уровнем стабильных метаболитов оксида азота (II) и количеством палочкоядерных нейтрофилов доказывает, что NO является одним из регуляторов активности нейтрофилов.