Влияние пробиотика Клостат на микрофлору кишечника у поросят-отъемышей

Введение. Применяемые в животноводстве антибиотики имеют ряд существенных недостатков: происходит аккумулирование их в продуктах животноводства; при длительном их использовании происходит привыкание со сто- роны организма, вследствие чего развивается устойчивость микроорганизмов к этому препарату; происходит нарушение баланса микроорганизмов в желудочно-кишечном тракте. Использование антибиотиков приводит к наруше- нию баланса кишечной микрофлоры, что, в свою очередь, отражается на здоровье кишечника животного.

Дефицит в организме поросят симбиотической микрофлоры, которая помогает в переваривании пищи, усвоении витаминов и аминокислот, а также оказывает антагонистическое действие на патогенную и условно-патогенную микрофлору, наблюдается при использовании антибиотиков в свиноводстве. Несмотря на дешевизну, надежность и простоту применения, использование антибиотиков несет экономические риски в долгосрочной перспективе [1].

Сегодня вопросы о необходимости внедрения препаратов, которые не вызывают накопления в организме животного, обладают выраженными антимикробными действиями, стали актуальными в животноводстве. Решение данной проблемы можно найти в применении пробиотиков в кормлении животных и правильном подборе стартерного комбинированного корма.

Препараты, содержащие живые микроорганизмы, которые относятся к нормальной микрофлоре желудочно-кишечного тракта, называются пробиотиками. Микроорганизмы, положительно влияющие на организм животного, способствуют восстановлению и нормализации пищеварения, повышают иммунитет, а также способствуют повышению эффективности вакцинации. Они не токсичны, оказывают положительное действие на организм поросят за счет формирования безопасного бактериального фона как в пищеварительной системе, так и в местах содержания животных, способствуя нормальному, здоровому развитию.

Пробиотики позволяют снизить заболеваемость, количество фармакологических обработок и, как следствие, финансовые затраты. Научно доказано, что естественная микрофлора кишечника способствует нормальной работе иммунной системы, создает природный барьер для болезнетворных бактерий и микроорганизмов. Микроорганизмы принимают активное участие в переваривании пищи, синтезе витаминов и аминокислот, нейтрализуют токсины, а также защищают клетки кишечника от перерождения. Применение пробиотиков способствует борьбе с вирусами [2].

Переход с молока свиноматки на твердый корм; стресс и ограниченное потребление пита- тельных веществ после отъема, слабая пищеварительная и ферментная система поросят, слабое здоровье пищеварительного тракта и диарея характерны для поросят в первые дни их жизни, приводят к недостаточному потреблению корма поросенком-отъемышем, дефициту энергии, отставанию и задержке роста. Указанные проблемы приводят к большим затратам на лечение животных за счет снижения продуктивности и гибели поросят [3].

Исследования пробиотиков указывают на их положительные характеристики: они не приводят к привыканию со стороны патогенной и условно-патогенной микрофлоры, не аккумулируются в органах и тканях животных, улучшают качество готовой продукции. Высокая антагонистическая активность производственных штаммов микроорганизмов относительно патогенной и условно-патогенной микрофлоры, повышенная функциональная деятельность иммунной системы, лучшее усвоение питательных веществ, поступающих с кормом, подтверждают лечебный и профилактический эффект пробиотиков [4].

Применение пробиотиков способствует профилактике заболеваний пищеварительной системы, лечебному эффеку уже имеющихся заболеваний желудочно-кишечного тракта, повышению или стимуляции иммунитета, профилактике расстройств пищеварительного тракта [6].

Сегодня уже доказана широкая востребованность пробиотиков, так как они направлены не на уничтожение части имеющихся кишечных микроорганизмов, а на заселение кишечника конкурентоспособными штаммами бактерий пробиотиков, которые контролируют численность условно-патогенной микрофлоры. Именно это и отличает пробиотики от антибиотиков.

Трехнедельный возраст поросят является самым неблагоприятным периодом их жизни, так как в этот период в молоке свиноматки уменьшается количество липидов и лактозы, снижается его калорийность, происходит резкое снижение иммунитета ко многим антигенам, попадающим в организм. Все эти признаки могут вызывать диарею поросят, в том числе для молодняка, что является актуальной ветеринарной проблемой свиноводства.

Первые три недели жизни поросят - это период возрастной ахлоргидрии, когда в их желудочном соке отсутствует соляная кислота, без которой ферменты желудочного сока не могут нормально функционировать, и организм животных в этот период более уязвим [7]. Решением этой проблемы является использование препаратов, органично сочетающихся с физиологическими особенностями организма, а именно желудочно-кишечного тракта, показывающих наиболее эффективный результат.

Сегодня, благодаря активным исследованиям в области применения пробиотиков в животноводстве, появилась возможность выбора наиболее актуальных препаратов из этой группы, содержащих живые микроорганизмы, которые принадлежат к нормальной, физиологически и эволюционно обоснованной флоре кишечного тракта, являются кормовыми добавками и включают в свой состав лактобактерии, бифидобактерии, бациллы, дрожжи, энтерококки и др.

В медицине и ветеринарии на протяжении долгого времени используют пробиотики на основе спорообразующих бактерий (бактисубтил, флонивин, церебиоген, энтерогермин).

Привлекательность пробиотических средств при создании лечебных и профилактических препаратов определяется антагонизмом в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, их самостоятельной элиминацией из желудочно-кишечного тракта, стимулирующим действием на пищеварение, анти-аллергическим, общеукрепляющим воздействием на организм.

Благодаря росту и жизнедеятельности полезных микроорганизмов рода Bacillus subtilis организм очищается, и в кишечнике образуются специфические антибиотики, ферменты, биоактивные вещества, человеческий интерферон a-2. Такие вещества способствуют модулированию гуморальных и клеточных факторов иммунитета, усилению устойчивости животных к инфицированию бактериями и вирусами, при этом наблюдается быстрое выздоровление поросят, их восстановление после перенесенных операций, травм, инфекций и различных заболеваний [8].

Проблему поддержания микроклимата кишечника можно решить, применяя пробиотик КлоСТАТ фирмы Kemin методом добавления сухой смеси в комбинированные корма при его производстве. Характерными особенностями этого пробиотика являются высокая устойчивость к ферментам желудочно-кишечного тракта животных, антагонистическая активность к патогенным и условно-патогенным микроорганизмам. Установлено, что такой пробиотик может нормализовать микрофлору кишечника, повысить резистентность организма сельскохозяйственных животных, а также улучшить процесс пищеварения, что в свою очередь оказывает положительное влияние при переходе поросят- отъемышей на самостоятельное питание. В составе пробиотика КлоСТАТ (CloSTAT) содержатся споры запатентованного штамма бактерий Bacillus subtilis PB6, которые обеспечивают баланс микрофлоры кишечника и формируют естественные защитные механизмы против патогенной и условно-патогенной микрофлоры. Способность Bacillus subtilis PB6 в желудочнокишечном тракте выделять специфические соединения, обладающие выраженными противовоспалительными свойствами, ингибирующие патогенные штаммы Clostridium perfringens и другие виды Clostridium, Bacillus, делает возможным применять их в качестве пробиотика в рационе питания как альтернативу антибиотикам. Применение данного пробиотика позволяет укреплять здоровье животного, способствовать улучшению его роста и повышать эффективность использования корма. Все эти процессы происходят за счет преобразования микрофлоры желудочно-кишечного тракта. Такой пробиотик можно использовать моногастричным животным и КРС, его используют в производстве органических продуктов питания, при этом установлено, что при лечении животных он не накапливается в мышечной ткани и внутренних органах по сравнению с антибиотиками, и как следствие – не является вредным для здоровья человека [9].

Цель исследований – изучить влияние пробиотика КлоСТАТ на микрофлору кишечника у поросят-отъемышей.

Задачи : определить влияние препарата КлоСТАТ на динамику формирования нормального кишечного биоценоза у поросят; оценить эффективность применения препарата КлоСТАТ для профилактики желудочно-кишечных заболеваний поросят неинфекционной этиологии.

Объекты и методы. Исследования проводились в лаборатории химического анализа ТОО «Рубиком» «Комбикормовый завод – элеватор» и животноводческом комплексе (ЖК) ТОО «Рубиком» (с. Павлодарское Павлодарской области Республики Казахстан). ТОО «Рубиком» «Комбикормовый завод – элеватор» запущен в работу в 2008 г. Проект выполнен специалистами фирмы «Трилис» совместно с китайской компанией Muyang.

Полнорационные комбикорма высшей пробы, применяемые в рационах кормления всех видов сельскохозяйственных животных, птицы и рыбы любого возраста, являются основной продукцией завода. Производственная мощность завода – 20 т/ч.

В приготовлении сухой кормовой смеси для поросят-отъемышей используют престар-терный корм ViaPig-30124 (собственного изготовления), в состав которого входят экструдированные злаки, экструдированные семена льна, овсяные хлопья, молочные продукты, соевый белок, картофельный белок, растительные жиры, глюкоза, монокальций фосфат, поваренная соль, синтетические аминокислоты, органические кислоты, ароматизатор, подсластитель, витамины, микроэлементы, ферменты, и КлоСТАТ HC SP сухой (производства фирмы Kemin), в 1 грамме которого содержится 2х109 КОЕ спорообразующих бактерий Bacillus subtilis PB6; гидрокарбонат натрия (81,0–99,0 %); мальтодекстрин (8,1–9,9 %) из расчета 500 г пробиотика на тонну корма. Смешивание компонентов производят по технологии, принятой на производстве.

Экспериментальные исследования на животных проводились в ЖК ТОО «Рубиком», где согласно поставленной цели было отобрано 40 голов поросят крупной белой породы в возрасте от 25 до 28 дней, из них были сформированы экспериментальные группы (контрольная и опытная) по 20 голов в каждой. Условия кормления и рационы поросят соответствовали типовым стандартам кормления. В качестве основного рациона поросят на комплексе использовали престартерный корм ViaPig-30124. Поросятам опытной группы скармливали кормовую смесь престартерного корма ViaPig-30124 и пробиотика КлоСТАТ. В опыте были использованы клинически здоровые поросята. Условия содержания подопытных животных в группах были одинаковыми. Поросята находились в отдельных загонах по 10 голов до 60-дневного возраста. В период проведения опыта проводили микробиологические исследования фекалий здоровых поросят и поросят, заболевших во время эксперимента. Лабораторные исследования фекалий поросят исследуемых групп проводили в областной ветеринарной лаборатории. Исследования кишечной микрофлоры поросят проводили на 7-й, 15-й и 30-й день после начала эксперимента.

Статистическую обработку полученных данных проводили методом вариационной статистики по Стьюденту.

Результаты и их обсуждение. Анализ полученных данных по применению кормовой смеси с пробиотиком КлоСТАТ выявил различия в количественном составе микрофлоры кишечника животных исследуемых групп (табл. 1).

Таблица 1

Результаты исследования микрофлоры кишечника поросят в lgКОЕ/г фекалий (М±m, n=40)

Показатель	Группа поросят	Срок исследования (дней)
		7	15	30
Общее микробное число (ОМЧ), млн lgКОЕ/г	Контрольная	1,59∙10 6	1,54∙10 6	1,89∙10 6
	Опытная	1,59∙10 6	1,59∙10 6	1,27∙10 6*
E. coli , млн lgКОЕ/г	Контрольная	320±42,2	330±35,2	325±38,3
	Опытная	310±40,7	300±39,8	295±37,5*
Молочнокислые бактерии, млн lgКОЕ/г	Контрольная	320±45,2	310±35,1	320±43,2
	Опытная	320±40,1	340±41,2	390±41,1*
Стафилококки, тыс. lgКОЕ/г	Контрольная	3,5±2,2	3,4±2,7	4,0±2,4
	Опытная	2,8±1,8	2,1±1,5*	2,1±1,7**
Стрептококки, млн lgКОЕ/г	Контрольная	7,16±4,2	6,89±5,2	7,0±4,2
	Опытная	7,16±5,8	7,11±6,7	5,67±5,8**

Примечание. Здесь и далее разница по отношению к контрольной группе достоверна: * – Р<0,05,

** – Р<0,01.

Согласно представленным данным, установлено, что общее микробное число (ОМЧ) у всех поросят на протяжении эксперимента существенно не изменялось. Снижение этого показателя стало заметным только на 30-й день после начала эксперимента, когда произошло видимое уменьшение ОМЧ в опытной группе на 32,8 % по сравнению с контролем.

Динамика количества ОМЧ, стафилакок-ков и стрептококков у поросят исследуемых групп представлена на рисунках 1, 2.

Lg КОЕ/г 8

Стафилококки - К

Стафилококки - О

-*- Стрептококки - К

Стрептококки - О

дни

ОМЧ - К

ОМЧ - О

Рис. 1. Динамика количества ОМЧ, стафилококков и стрептококков у здоровых поросят под воздействием пробиотика КлоСТАТв lgKOE/г фекалий:

– контрольная группа, – опытная группа

Lg КОЕ/г 450

• — ♦— E. coli - К

• — •— E. coli - О

• - *- Молочнокислые бактерии - К

Молочнокислые бактерии - О

7                 15                30

дни

Рис. 2. Динамика количества E. coli и молочнокислых бактерий у здоровых поросят под воздействием пробиотика КлоСТАТ в lgКОЕ/г фекалий:

К – контрольная группа, О – опытная группа

Согласно приведенным данным, содержание кишечной палочки у поросят контрольной группы в течение всего месяца практически находилось на одном уровне – 320–330 млн lg КОЕ/г, тогда как у поросят, в рационе которых присутствовал пробиотик, выявлено незначительное снижение количества E. coli на 4,8 % (Р<0,05). При этом нами отмечено существенное увеличение молочнокислых бактерий в опытной группе животных: на 5,9 % через 15 дней, на 21,9 % на 30-й день по сравнению с первоначальными данными и на 9,2 % по сравнению с контролем (Р<0,05). В кишечнике поросят опытной группы значительно понизилось содержание стафилококков, которое оказалось ниже фонового уровня на 25, а по сравнению с контролем на 47,5 % (Р<0,01). У поросят контрольной группы отмечено некоторое увеличение количества стафилококков (на 14,2 %) на 30-й день эксперимента. Аналогичным образом происходили изменения и со стороны стрептококков: на 30-й день их количество в фекалиях опытных поросят заметно снизилось – на 20,8 % (Р<0,01).

Таким образом, применение пробиотика КлоСТАТ приводит к существенному изменению состава микрофлоры кишечника у поросят- отъ-емышей.

Результаты исследования микрофлоры кишечника заболевших поросят представлены в таблице 2.

Таблица 2

Показатель	Группа поросят	n	Срок исследования (дней)
			7	15	30
Общее микробное число (ОМЧ), млн lgКОЕ/г	Контрольная	5	4,9∙10 9	3,34∙10 6	1,8∙10 6**
	Опытная	1	3,59∙10 6	1,9∙10 6	1,8∙10 6**
E. coli , млн lgКОЕ/г	Контрольная	5	580±42,2	380±35,2	339±48,2 **
	Опытная	1	498±37,7	395±38,8	340±47,5 **
Молочнокислые бактерии, млн lgКОЕ/г	Контрольная	5	220±35,1	300±25,7	350±33,7 **
	Опытная	1	210±28,3	305±21,9	390±47,1 **
Стафилококки, тыс. lgКОЕ/г	Контрольная	5	9,5±1,2	6,4±2,7	3,0±0,4 **
	Опытная	1	9,8±1,9	5,1±1,3	2,9±0,7 **
Стрептококки, млн lgКОЕ/г	Контрольная	5	15,1±2,2	9,8±3,2	7,0±4,2 **
	Опытная	1	17,6±1,7	8,3±1,1	5,4±1,2 **

Результаты исследования микрофлоры кишечника заболевших поросят в lg КОЕ/г фекалий (М±m)

Данные таблицы 2 показывают, что при применении пробиотического препарата выявлено повышенное содержание молочнокислых бактерий и заметное снижение ОМЧ, E. coli, стафилококков и стрептококков. Через неделю после начала исследований среди поголовья поросят выявлено 6 случаев заболеваний диспепсией: 5 в контрольной группе и один в опытной. У поросят контрольной группы в период разгара заболевания ОМЧ было на 63,3 % выше, чем после выздоровления. На 59 % снизилось количество молочнокислых бактерий, число стафилококков и стрептококков увеличилось соответственно в 3,2 и 2,2 раза. У поросят опытной группы в картине кишечной микрофлоры были отмечены характерные изменения (рис. 3, 4).

7                       15                      30

Рис. 3. Динамика количества ОМЧ, стафилококков и стрептококков у поросят, больных диспепсией, под воздействием пробиотика КлоСТАТ в lgКОЕ/г фекалий: К – контрольная группа, О – опытная группа

дни

Рис. 4. Динамика количества E. coli и молочнокислых бактерий у поросят, больных диспепсией, под воздействием пробиотика КлоСТАТ в lgКОЕ/г фекалий: К – контрольная группа, О – опытная группа

В ходе эксперимента нами установлено, что в результате заболевания у поросят происходило снижение количества представителей облигатной микрофлоры, вместе с тем размножались микробы, попавшие извне, или эндогенные виды, устойчивые к лекарственным препаратам, – стафилококки и стрептококки.

Заключение. Исследования микрофлоры кишечника поросят-отъемышей подтверждают наличие лакто- и бифидобактерий, кишечной палочки, стафилококков и стрептококков. В результате приема пробиотиков поросятами-отъемышами опытной группы наблюдалось понижение содержания условно-патогенной микрофлоры с динамичным увеличением облигат- ной, что свидетельствует о положительном их влиянии на формирование микробиоценоза кишечника в послемолочный период. При этом более заметные изменения выявлены при исследовании фекалий поросят опытной группы, в рационе которых присутствовал пробиотик Кло-СТАТ. Результаты таких комплексных исследований оказались наиболее достоверными.