Влияние пробитического препарата на основе споробразующих бактерий на организм поросят

Введение . Применение интенсивных технологий в животноводстве наряду с интенсификацией производства порождает проблему снижения уровня неспецифической резистентности организма выращиваемых животных. В результате снижается уровень их устойчивости к действию неблагоприятных факторов внешней среды, в том числе патогенной и условно-патогенной микрофлоры, что сопровождается возникновением заболеваний, снижением продуктивности и качества продукции.

Одним из наиболее эффективных способов восстановления дисбаланса между соотношениями основных групп кишечных микроорганизмов является защита нормальной микрофлоры путем кормления животных пребиотическими и пробиотическими препаратами [1, 2]. Традиционно эта проблема решается применением проти-вомикробных препаратов, в основном антибиотиков, которые губительно действуют не только на патогенную микрофлору, но и на нормальную флору кишечника, что приводит к развитию дисбактериоза и снижению иммунобиологической реактивности всего организма в целом. Такая практика употребления лекарств привела к тому, что условно-патогенные бактерии все чаще стали выступать возбудителями кишечных инфекций [3].

Самый неблагоприятный период в развитии поросят – трехнедельный возраст. К этому времени в молоке свиноматки уменьшается количество липидов и лактозы, снижается его калорийность. Происходит резкое снижение иммунитета ко многим антигенам, попадающим в организм, что может вызвать одну из актуальных ветеринарных проблем в свиноводстве – диарею у поросят, решением которой является применение препаратов, органично сочетающихся с физиологическими особенностями организма, а именно желудочно-кишечного тракта, и дающих наиболее эффективный результат. В силу физиологических особенностей такое положение особенно опасно для молодняка. Для поросят в первые три недели жизни характерен период возрастной ахлоргидрии, когда в их желудочном соке отсутствует соляная кислота, без которой ферменты желудочного сока не могут нормально функционировать, и организм животных в этот период является наименее защищенным [4].

Исследования ученых выявили возможность выбора одного из наиболее актуальных на сегодняшний день препаратов – пробиотиков, содержащих живые микроорганизмы, принадлежащих к нормальной, физиологически и эволюционно обоснованной флоре кишечного тракта, являющихся кормовыми добавками и включающих в свой состав лактобактерии, бифидобактерии, бациллы, дрожжи, энтерококки и др. [5–8].

На протяжении многих десятилетий в медицине и ветеринарии используются пробиотики на основе спорообразующих бактерий (бакти- субтил, флонивин, церебиоген, энтерогермин). Антагонизм в отношении патогенных и условнопатогенных микроорганизмов и их самостоятельная элиминация из желудочно-кишечного тракта, стимулирующее действие на пищеварение, анти-аллергическое, общеукрепляющее воздействие на организм делает пробиотические средства привлекательными для создания лечебных и профилактических препаратов.

Благодаря росту и жизнедеятельности полезных микроорганизмов рода Bacillus subtilis организм очищается и в кишечнике образуются специфические антибиотики, ферменты, биоактивные вещества, человеческий интерферон a-2. Под их воздействием модулируются гуморальные и клеточные факторы иммунитета, которые усиливают устойчивость животных к инфицированию бактериями и вирусами. Происходит быстрое выздоровление и восстановление после перенесенных операций, травм, инфекций и различных заболеваний [9].

Цель исследования: изучить влияние пробиотического препарата на основе спорообразующих бактерий на организм поросят.

Задачи исследования : изучить влияние пробиотика «Ветом 1.1» на состав крови и микрофлору кишечника молодняка свиней.

Объект и методы исследования . Объектом исследования были подсосные поросята крупной белой породы животноводческого комплекса ТОО «Предприятие РубиКОМ» Павлодарской области Республики Казахстан в период е подготовки их к отъему.

Для опыта были сформированы три группы поросят по 10 голов в каждой. Режим кормления и содержания первой группы поросят не отличались от общепринятых в хозяйстве. Второй группе поросят для профилактики колибактероза на 2–3-й и 12–14-й дни после рождения вводили из расчета на 100 кг корма биомицин – 60 г, фуразо-лидон – 40 г. Третьей группе поросят перорально, в дозе 50 мг/кг веса, давали пробиотический препарат «Ветом 1.1» один раз в сутки в течение 10 дней с кормом.

Исследования крови поросят проводили по общепризнанным методикам. Биохимические исследования сыворотки крови проводили по методу Сомоджи, биуретовым методом, с индикатором мурексидом.

Используемый нами метод определения лизоцима основан на способности сыворотки крови действовать на культуру Мicrococcus lysodeikticus , выращенную на косом агаре [10].

При исследовании фекалий от поросят определяли «скрытую» кровь, желчные пигменты (билирубин, стеркобилин), белковую экссудацию по Вишнякову-Трибуле.

Для микробиологических исследований отбирали пробы химуса. Лабораторные испытания проводили согласно методическим указаниям «Применение бактерийных биологических препаратов в практике лечения больных кишечными инфекциями, диагностика и лечение дисбактериозов кишечника» [11].

В ходе лабораторных исследований определяли бактерии группы кишечной палочки, протея, стафилококков, дрожжей, спорообразующих бактерий путем посева на соответствующие питательные среды (агар Эндо, агар Плоски-рева, Висмут-сульфитный агар, агар Сабуро, желточно-солевой агар (ЖСА), маннит-солевой агар (МСА).

При определении лактоза-положительных и лактоза-отрицательных эшерихий учитывали, что на селективно-дифференциальных средах колонии E. coli принимают цвет, соответствующий окраске среды, а на агаре Эндо лактоза-по-ложительные эшерихии образовывали фукс и ново-красные колонии с металлическим блеском, лактоза-отрицательные – бледно-розовые или бесцветные с темным центром.

Исследование микробиоты кишечника поросят проводили согласно методическим указаниям по бактериологической диагностике колибактериоза (эшерихиоза) животных (МСХ и продовольствия РФ от 27.07.2000 г. № 13-7-2/2117) и методическим указаниям по ускоренной индикации морга-нелл, сальмонелл и энтеропатогенных эшерихий с адгезивными антигенами в патологическом материале, кормах, объектах внешней среды в реакции коагглютинации (МСХ и продовольствия РФ от 11.10.1999 г. № 13-7-2/1758) [12, 13].

Статистическую обработку полученных данных проводили разностным методом Стьюдента, описанным В.А. Чистяковым [14].

Результаты исследования и их обсуждение . Повышение интенсивности обмена веществ в организме поросят опытных групп отразилось на картине крови, о чем свидетельствуют биохимические и морфологические показатели.

Согласно результатам проведенного исследования, влияние применяемых препаратов имеет различия, которые отражены в показателях таблиц 1–3.

В контрольной первой группе в крови показатели Са, Mg, глюкозы, общего белка находятся на нижних пределах нормативных показателей, что указывает на пониженный обмен данных веществ в организме поросят. Наблюдается сдвиг лейкоцитарной формулы влево.

Количество юных форм нейтрофилов повышено на 47 %, палочкоядерных форм нейтрофи лов - на 7 %. Превышение лимфоцитов составило 2 %, моноцитов – 5 %.

Содержание лизоцима в сыворотке крови контрольной группы поросят существенно не отличается от нормативных показателей.

Таблица 1

Сравнительные показатели крови исследуемых групп поросят (n = 10, M±m)

Показатель		Норматив показателей	Первая группа (контрольная)	Вторая группа (биомицин + фуразолидон)	Третья группа («Ветом 1.1»)
Ca, ммоль/л		2,5–3,5	2,6±0,27	2,8±0,24	3,2±0,23
Mg, ммоль/л		2,5–3,5	2,5±0,24	2,8±0,25	3,2±0,26
Глюкоза, ммоль/л		2,5–4,16	2,6±0,25	3,0±0,27	3,7±0,23
Общий белок, г/л		65–85	63±0,24	70±0,24	73±0,28
Эритроциты, млн/мкл		6,0–7,5	6,0±0,23	6,2±0,25	6,8±0,27
Лейкоциты, тыс/мкл		8,0–16,0	13,0±0,30	10,4±0,29	8,3±0,27
(X га га О ф ■& с;	Ю	1,0–1,7	2,5±0,24	1,8±0,23	1,4±0,24
	П	9,5–10,7	11,5±0,26	10,2±0,24	10,5±0,27
	С	18,4–28	17,2±0,26	18,2±0,29	19,3±0,28
	Э	1,3–2,7	2,7±0,27	2,1±0,23	2,2±0,24
	Лф	60,2–60,5	62,2±0,32	61,3±0,27	60,7±0,26
	Мон	2,6–3,5	3,7±0,22	3,2±0,17	3,2±0,22
Лизоцим, мкг/мл		23,9±1,21	20,9±1,11	29,9±1,13*	35,4±1,16*

* Р < 0,05 (достоверность различий с соответствующим показателем контрольной группы).

Во второй и третьей опытных группах согласно полученным данным показатели крови не отличаются от таковых контрольной группы, в то время как наблюдается значительное (Р < 0,05) повышение содержания лизоцима в сыворотке крови во второй группе (на 9 мкг/мл) и третьей (14,5 мкг/мл).

При сравнительном анализе содержания в фекалиях кишечной палочки с гемолитическими свойствами в соотношении к общему количеству E. coli к концу экспериментального периода в первой контрольной группе составляло 0,07 %; во второй группе, принимавшей комплекс биомицин + фуразолидон - 0,02; в третьей, где принимался «Ветом 1.1», – 0,003 %.

Состав кишечной микрофлоры поросят, КОЕ (n = 10, M±m)

Таблица 2

Группа	E. coli		Staphylococcus spp.	Proteus spp.	Candida spp.	Enterococcus spp.
	Лактозо (+)	Лактозо (–)
Норма	–	10 6 –10 8	10 4 –10 5	0–10 5	0–10 3	10 5 -10 7
1	5·10 4 ±0,22	7W±0,26	3·10 4 ±0,12	5·10 5 ±0,24	5·10 3 ±0,1	10·10 5 ±0,2
2	5·10 4 ±0,19	3W±0,25	3·10 4 ±0,14	5·10 4 ±0,18	5·10 3 ±0,1	7·10 6 ±0,25
3	3·10 3 ±0,12	9·10 5 ±0,25	2·10 3 ±0,11*	4·10 3 ±0,19	0	12·10 6 ±0,2**

* Р < 0,10; **Р < 0,05 (достоверность различий с соответствующим показателем контрольной группы).

При применении пробиотического препарата у поросят наблюдается достоверное снижение Staphylococcus spp. от 3-104±0,12 КОЕ в контрольной до 2·103±0,11 КОЕ (Р<0,1) в третьей опытной группе. Аналогичные изменения происходили и в популяциях Proteus spp. и Candida spp., более того, последние не были обнаружены у поросят, принимавших пробиотик «Ветом 1.1».

На активизацию полезной микрофлоры в организме указывает существенное увеличение количества энтерококков от 10-10 5 ±0,2 КОЕ в контрольной до 12·10⁶±0,2 КОЕ (Р < 0,05) в третьей группе поросят, которые принимали «Ветом 1.1».

Таблица 3

Группа	Staphylococcus spp. , %	Proteus spp. , %	Candida spp. , %	Enterococcus spp. , %
1	0,04	0,7	0,007	1,4
2	0,01	0,02	0,002	0,023
3	0,002	0,004	0	11,2

Количественный состав микрофлоры кишечника у поросят

Анализы проб фекалий за период исследования на желчные пигменты и билирубин были положительными, а на скрытую кровь и растворимые белки отрицательными, что соответствует физиологическим нормам.

Выводы

• 1.    У поросят, принимавших пробиотик, наблюдается значительное повышение содержания лизоцима в сыворотке крови.

• 2.    Содержание в фекалиях поросят кишечной палочки к концу экспериментального периода заметно снижается до 0,003 %.

• 3.    При применении пробиотического препарата у поросят наблюдается существенное снижение Staphylococcus spp. Аналогичные изменения происходили и в популяциях Proteus spp . и Candida spp. , более того, последние не были обнаружены у поросят, принимавших пробиотик «Ветом 1.1».

• 4.    Активизация полезной микрофлоры в организме объясняется увеличением количества энтерококков в третьей группе поросят, которые принимали «Ветом 1.1».

Таким образом, проведенное исследование свидетельствует об эффективности применения пробиотика «Ветом 1.1» в свиноводстве, который влияет на формирование биоценоза кишечника и таким образом способствует предупреждению развития дисбиотических процессов у поросят.