Влияние синтетического препарата 9-ОДК на качество спермы хряков

Для увеличения производства животноводческой продукции на сельскохозяйственных предприятиях большое значение имеет интенсификация воспроизводства свиней, совершенствование его породных и продуктивных качеств. Оптимальный уровень воспроизводства свиней, позволяющий получать максимум приплода и мясной продукции, обеспечивается нормальным функционированием органов половой системы и других органов у хряков-производителей. Интенсивная эксплуатация хряков-производителей в значительной мере сдерживается из-за возникновения у животных различных патологических изменений в организме и половых органах, ведущих к нарушению их воспроизводительной функции и потере плодовитости.

При несвоевременном выявлении и неэффективном лечении животных заболевания половых органов принимают хронический характер с возникновением необратимых патологических изменений.

Одним из актуальных направлений современной фармакологии является поиск и изучение новых высокоэффективных лекарственных средств на основе продуктов пчеловодства [1]. Среди продуктов пчеловодства особое место занимает «маточное молочко» – секрет аллотрофических (глоточных и верхнечелюстных) желез рабочих пчел. 9-оксо-2Е-деценовая кислота (9-ОДК) – основной компонент «маточного вещества»     медоносных     пчел,     проявляющий     свойства многофункционального ферромона [2]. Полный синтетический аналог 9-ОДК был синтезирован в институте органической химии УНЦ РАН под руководством профессора, доктора химических наук Ишмуратова Г.Ю. [3]

Материалы и методы. Для изучения влияния 9-ОДК на воспроизводительную функцию хряков нами были сформированы 4 группы животных по 4 головы в каждой. Животные первой, второй и третьей групп с кормом получали 9-ОДК из расчета 0,1; 0,2; 0,3 мг/кг соответственно, а животные четвертой группы служили контролем. Все хряки опытных и контрольной групп были подобраны по принципу аналогов (с одинаковой кровностью, живой массой тела, половой нагрузкой и содержащихся на одинаковых рационах кормления).

Исследование спермы проводили макро- и микроскопически, а также с использованием общепринятых биохимических и биологических методов.

Результаты исследований. При исследовании спермы животных опытных и контрольной групп, как в начале, так и в конце опыта, не отмечалось каких-либо патологий. Так, сперма животных при макроскопическом исследовании имела молочно-белый с сероватым оттенком цвет со специфическим запахом и водянистую консистенцию, напоминающую молоко. Наличие загрязненности, хлопьев, патологического окрашивания и посторонних запахов спермы нами не установлено.

На основании проведенных исследований нами установлено, что средний объем эякулята, полученного за одно семяизвержение в начале опыта во всех группах был примерно одинаков и составил 240,0±10,10 – 242,0±17,00 мл.

В конце опыта (через 7 дней) нами было установлено увеличение объема эякулята в опытных группах. Наибольшее увеличение было зарегистрировано в третьей опытной группе, животные которой получали 9- ОДК в дозе 0,3 мг/кг. Так, объем эякулята в этой группе составил 274,9±6,00 (Р<0,05), что больше по сравнению с контролем на 32,80 мл (13,5%) и больше по сравнению с тем же показателем, полученным в этой группе до назначения 9-ОДК.

При определении концентрация сперматозоидов в 1 мл эякулята в сперме хряков всех опытных групп была примерно одинаковой и составила 0,258-0,275 млрд., что соответствует средней густоте.

После применении 9-ОДК во всех опытных группах отмечалось увеличение концентрации сперматозоидов в 1 мл (Р>0,05). Однако учитывая прямую зависимость между объемом эякулята и концентрацией в нем сперматозоидов отмечены существенные изменения. Так, с учетом объема эякулята, получаемого от хряков в начале исследований, весь эякулят содержал 62,37-66,55 млрд. сперматозоидов, а через 7 дней после применения 9-ОДК в дозе 0,3 мг/кг (III группа) – 74,22 млрд.

Достоверное увеличение общего количества сперматозоидов во всем объеме эякулята было установлено в 1 и 2 опытных группах (Р<0,005), однако эти показатели были несколько ниже, чем в третьей опытной группе. Следует отметить, что увеличение дозы 9-ОДК (0,4 мг/кг и 0,5 мг/кг) не привело к достоверному увеличению общего количества сперматозоидов по сравнению с дозой 9-ОДК на уровне 0,3 мг/кг.

Среди сперматозоидов в эякуляте всех видов животных всегда имеется более или менее значительное количество патологических форм, от наличия которых может существенно измениться их оплодотворяющая способность.

Для определения процента подобных форм сперматозоидов мы производили их подсчет в мазках, окрашенных азур-эозином.

При подсчете патологических и незрелых форм сперматозоидов нами было установлено, что во всех группах в начале опыта, а также в контрольной группе по окончании опыта в эякуляте хряков-производителей присутствовали сперматозоиды с закрученными хвостиками, что указывало на недостаток электролитов в жидкой среде эякулята. Отмечалось такженаличие сперматозоидов с утолщенной соединительной частью, что указывало на нарушение спермиогенеза. Содержание патологических форм сперматозоидов находилось в пределах 11,92±0,12–14,10±0,11%, а количество незрелых форм не превышало 7,89 ± 0,16%. Таким образом, общая активность спермотазоидов хряков контрольной и всех опытных групп колебалась в пределах от 7,85±0,03 до 8,97±0,06 баллов.

При исследовании мазков спермы хряков опытных групп после 7дневного применения 9-ОДК в трех дозах нами было установлено достоверное уменьшение процента как патологических, так и незрелых форм сперматозоидов.

Так, в первой опытной группе количество патологических форм сперматозоидов снизилось, по сравнению с началом опыта, на 4,11 %, а количество незрелых форм сперматозоидов на 1, 45%. Во второй и третьей опытных группах те же показатели снизились соответственно на 4,75% и 5,27% тогда как в контроле эти показатели остались практически без изменения. Кроме того понижения количества патологических и незрелых форм сперматозоидов в опытных группах значительно повысилась их активность с наибольшим значением 8,97±0,06 баллов (Р<0,01) в третьей группе, животные которой получали в течение 7 дней 9-ОДК в дозе 0,3 мг/кг.

Необходимо отметить тот факт, что в опытных группах, где применялась 9-ОДК в различных дозах, патологические формы сперматозоидов в основном были представлены гигантскими и карликовыми формами, а содержание клеток плоского, переходного эпителия семенных канальцев, форменных элементов крови и гиалиновых включений во всех случаях было единичным и незначительным. Однако в сперме контрольной группы патологические формы сперматозоидов, как и в начале опыта, были представлены сперматозоидами с утолщенной соединительной частью и с закрученными хвостиками.

В опытных группах, где животным задавалась 9-ОДК в различных дозах, заметно изменился электролитный состав эякулята. На фоне повышения рН увеличилось содержание калия и хлорида натрия, основных элементов, необходимых для поддержания нормального осмотического

• 1.    Качественные показатели спермы хряков при применении 9-ОДК

  Показатели оценки спермы	Вначале опыта				Через 7 дней после применения 9-ОДК
  	Контроль	I группа	II группа	III группа	Контроль	I группа	II группа	III группа
  Объем эякулята, мл	240,0±10,10	241,74±9,68	240,5±12,74	242,0±17,00	242,10±8,28	259,36±9,35	262,0±7,00	274,9±6,00
  Число сперматозоидов в 1 мл, млрд.	0,264±0,012	0,258±0,009	0,269±0,005	0,275±0,03	0,260±0,004	0,261±0,010	0,270±0,009	0,270±0,01
  Количество патологических сперматозоидов, %	11,92±0,12	14,00±0,2	13,90±0,20	14,1±0,11	12,64±0,25	9,89±0,05	9,15±0,09	8,83±0,12
  Незрелых сперматозоидов, %	8,59±0,33	6,18±0,14	6,36±0,11	7,28±0,16	8,44±0,29	4,73±0,11	5,34±0,14	3,38±0,26
  Активность сперматозоидов, баллы	7,85±0,03	7,86±0,03	7,87±0,03	7,89±0,16	7,84±0,08	8,46±0,08	8,66±0,05	8,97±0,06
  рН Эякулята, Н+	7,24±0,31	7,28±0,16	7,26±0,28	7,31±0,09	7,26±0,11	7,34±0,19	7,39±0,05	7,41±0,09
  Содержание калия, мг %	240,1±10,61	238,74±7,39	244,67±7,46	238,15±9,22	244,67±5,84	245,04±3,68	245,31±4,19	253,26±3,74
  Содержание NaCl, мг %	474,12±0,83	470,43±0,95	469,17±1,12	477,16±1,21	475,91±1,17	477,37±0,64	480,18±0,41	481,06±0,34
  Оплодотворяющая способность сперматозоидов	64,3±2,2	66,8±1,9	66,6±1,7	64,9±3,1	65,78±1,18	71,12±2,4	74,33±0,85	76,85±1,7

• 2.    Показатели выживаемости сперматозоидов хряков при применении 9-ОДК (баллы)

Примечание: Р<0,01-0,005

давления и обеспечения двигательной активности сперматозоидов. Наиболее качественные изменения электролитного состава спермы отмечены в третьей группе, где рН стала более щелочной на 0,10 Н+, а содержание калия и NaCl увеличилось на 15,11 мг% (6,34%) и 3,9 мг% (0,82%) соответственно по сравнению со значениями, полученными в начале опыта. Для более полной характеристики качества спермы нами был определен абсолютный показатель выживаемости сперматозоидов (продолжительность их жизни) в неразбавленном виде.

В начале опыта показатели активности сперматозоидов находились на уровне 7,85±0,03 – 7,89±0,16 баллов, а выживаемость сперматозоидов до уровня, при котором возможно использование спермы до оплодотворения (минимум 7 баллов), составляла 36 часов с момента окончания эякуляции (таблица 2). Однако по истечении 7 дней, в течение которых хряки опытных групп получали 9-ОДК срок выживаемости сперматозоидов значительно увеличился.

№ группы, препарат и его доза	Время наблюдения, час
	0	12	24	36	48	60	7 2
В начале опыта
Контроль	7,85±0,03	7,73±0,13	7,35±0,47	6,98±0,34	5,66±0,46	4, 37±0,31к	Е П
9-ОДК, 0,1 мг/кг	7,86±0,03	7,69±0,62	7,25±0,15	7,06±0,41	5,99±0,39	4, 55±0,16м	Е П
9-ОДК, 0,2 мг/кг	7,87±0,03	7,81±0,66	7,38±0,20	7,12±0,44	5,87±0,48	4, 24±0,42к	Е П
9-ОДК, 0,3 мг/кг	7,89±0,16	7,84±0,28	7,45±0,27	6,91±0,31	5,56±0,50	4, 37±0,37м	Е П
Через 7 дней после применения 9-ОДК
Контроль	7,84±0,08	7,62±0,22	7,24±0,21	6,89±0,24	5,44±0,57м	4, 71±0,24к	Е П
9-ОДК, 0,1 мг/кг	8,46±0,08	8,39±0,24	8,32±0,29	7,84±0,18	7,31±0,49	6, 58±0,45	5, 84±0,27
9-ОДК, 0,2 мг/кг	8,66±0,05	8,44±0,49	8,36±0,38	7,96±0,29	7,65±0,47	7, 15±0,28	6, 96±0,31
9-ОДК, 0,3 мг/кг	8,97±0,06	8,81±0,12	8,62±0,23	8,34±0,23	7,95±0,64	7, 44±0,34	6, 79±0,42

Примечание: Р<0.01-0.005, к – преимущественно колебательные движения сперматозоидов; м - преимущественно манежные движения сперматозоидов; ЕП – единичные подвижные сперматозоиды,

Так, в первой опытной группе сперма сохраняла активность на уровне 7 баллов до 60 часов, во второй и третьих группах – до 72 часов, тогда как в контрольной группе активность сперматозоидов к 48 часам после эякуляции составляла всего 5,44±0,57 баллов.

Для оценки влияния 9-ОДК на воспроизводительные свойства хряков была поставлена биологическая проба, направленная на определение оплодотворяющей способности сперматозоидов. С этой целью хряков опытных и контрольной групп по истечении 7 дней случали со здоровыми ремонтными свиноматками с последующей регистрацией наступления их супоросности.

Оплодотворяющая способность сперматозоидов в начале опыта находилась на уровне 64,3±2,2 – 66,8±1,9%. В опытных группах после 7дневного применения 9-ОДК в дозах 0,1; 0,2; 0,3 мг/кг оплодотворяющая способность сперматозоидов значительно выросла. Так, в первой опытной группе оплодотворяемость составила 71,12±2,4%, во второй 74,33±0,85%, а в третьей – 76,85±1,7%.

Заключение. Таким образом, на основании проведенных исследований можно сделать выводы, что 9-ОДК, задаваемый хрякам в дозах 0,1; 0,2; 0,3 мг/кг в составе стандартного рациона в течение 7 дней повышает количественные и качественные показатели спермопродукции, позволяя получить доброкачественную, свободную от посторонних примесей сперму, содержащую достаточное количество живых, устойчивых во внешней среде сперматозоидов, способных принять активное участие в процессе оплодотворения.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Антипов В.А. Современное состояние отечественной ветеринарной фармакотерапии и лекарствоведения /В.А.Антипов //Теоретические и практические аспекты возникновения и развития болезней животных и защита их здоровья в современных условиях: материалы Международной конференции. –Воронеж, 2002. –Т.2. –С.3-4. 2. Лебедева К.В. Ферромоны насекомых / Лебедева К.В., Миняйло В.А., Пятнова Ю.Б // М.: Наука. - 1984. – С.286. 3. Ишмуратов Г.Ю. Новое о «маточном веществе» медоносных пчел// Ишмуратов Г.Ю. Ишмуратова Н.М., Толстиков Г.А., Исмагилова А.Ф., Шарипов А.А.//Вестник РАСХН.-2003. - №4 – С.81-82.

ВЛИЯНИЕ СИНТЕТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА 9-ОДК НА КАЧЕСТВО СПЕРМЫ ХРЯКОВ

Исмагилова А.Ф., Белов А.Е.

Резюме

На основе 9-оксо-2Е-деценовой кислоты - синтетического аналога «маточного вещества» медоносных пчел, разработан эффективный препарат, обладающий комплексным лечебным действием, предложена схема его применения, определено влияние его на показатели спермы хряков.

SYNTHETIC PREPARATION 9-ODK INFLUENCE ON THE QUALITY OF THE BOARS SPERM

Ismagilova A.F., Belov A.Ye.