Влияние транспортировочного стресса на динамику соотношения гетерофилов к лимфоцитам крови у цыплят с разной стрессовой чувствительностью под действием лития цитрата

Широкое распространение в птицеводстве находят соли лития , которые применяются в качестве антистрессовых средств для кур и цыплят . Несмотря на многочисленные исследования отечественных и зарубежных ученых , касающихся изучения фармакодинамики солей лития значительное число аспектов воздействия лития на нервную систему не раскрыто . Один из таких аспектов – особенности воздействия лития цитрата на птиц с разной стрессовой чувствительностью , представляется нам актуальным , вследствие углубления представлений об антистрессовом действии солей лития и изучения стрессовой чувствительности кур .

В этой связи определенного внимания заслуживает вопрос оценки профилактической эффективности лития цитрата при транспортном стрессе у цыплят с разной стрессовой чувствительностью . В связи с вышеизложенным целью настоящей экспериментальной работы была оценка антистрессовой активности лития цитрата при транспортировке цыплят с разной стрессовой чувствительностью .

Материалы и методы . Эксперименты проводили в виварии ФГБОУ ВПО « Уральская государственная академия ветеринарной медицины » и в условиях ЗАО « Уралбройлер » Аргаяшская птицефабрика на цыплятах мясного направления продуктивности , полученных от кур кросса ISA F15 и петухах M99. На птицефабрике применяется напольная система содержания родительского поголовья и клеточная технология содержания цыплят .

Цыплят на птицефабрике делили на 4 группы , первая и третья группы состояли из стресс - чувствительных цыплят , цыплята второй и четвертой группы относились к стресс - устойчивым ( табл . 1). Тестирование и отбор кур по степени стрессовой чувствительности проводили собственным методом , путем внутрикожного введения 70% раствора скипидара в область бородки и оценки результатов реакции по степени выраженности локального адаптационного синдрома .

Первой и второй группе кур за 2 суток до транспортировки , в день транспортировки и в течение 2 суток после транспортировки применяли водный раствор лития цитрата в дозе 35 мг на 1 кг живой массы , куры третьей и четвертой группы служили контролем , им препарат не применяли ( табл . 1).

Транспортировку осуществляли летом , автомобильным транспортом по маршруту протяженностью 220 км , общее время в пути составляло около 3 часов . Для оценки особенностей проявления адаптационных реакций и стрессового воздействия у кур с разной стрессовой чувствительностью были изучены лейкограммы , с учетом показателя процентного отношения гетерофилов к лимфоцитам ( Г / Л ) в состоянии относительного покоя до транспортировки , непосредственно сразу после транспортировки и через сутки после транспортировки . Показатель соотношения Г / Л является надежным признаком , отражающим степень стрессированности птиц (Gross, W.B., Siegel, H.S. 1983, Забудский Ю . И ., 2002).

Кровь для приготовления мазков брали путем пункции гребешка , в одно и то же время в период с 13 до 14 часов . Мазки окрашивали по Романовскому - Гимзе , подсчет клеток крови осуществляли унифицированными методами , в каждом мазке подсчитывали 200 лейкоцитов .

В таблицах уровень достоверности Р рассчитан с помощью однофакторного дисперсионного анализа и t критерия Стьюдента для независимых переменных, при этом значение Р соответствует межгрупповому сравнению между всеми группами, а значение P1 соответствует показателю статистической значимости между стресс-чувствительными и стресс-устойчивыми цыплятами 1-2 и 3-4 групп соответственно. Для того чтобы избежать проблем множественных сравнений при интерпретации результатов дисперсионного анализа, уровень достоверности был принят Р≤0,01.

Результаты собственных исследований и обсуждение . Результаты исследования крови цыплят в состоянии относительного покоя перед транспортировкой , непосредственно после транспортировки и через сутки после транспортировки представлены в таблице 1.

1. Соотношение Г / Л в процессе эксперимента , M ± m

Показатель	Группы
	1 СЧ + ЛЦ n=6	2 СУ + ЛЦ n=6	3 СЧ - Контроль n=6	4 СУ - Контроль n=6
до транспортировки
Г / Л	0,26 ± 0,06	0,27 ± 0,07	0,33 ± 0,03	0,29 ± 0,06
P	0,132
P 1	0,666		0,167
непосредственно после транспортировки
	n=5	n=6	n=6	n=6
Г / Л	1,10 ± 0,35	0,72 ± 0,24	0,94 ± 0,20	0,52 ± 0,12
P	0,003
P 1	0,061		0,001
через сутки после транспортировки
	n=5	n=6	n=6	n=6
Г / Л	0,78 ± 0,18	0,54 ± 0,05	0,54 ± 0,11	0,31 ± 0,07
P	<0,001
P 1	0,011		<0,001

Представленные в табл . 1 данные свидетельствуют об отсутствии статистически значимых отличий в соотношении Г / Л у цыплят с разной стрессовой чувствительностью в состоянии относительного покоя , так же не обнаружены отличия показателя у цыплят

Транспортировка существенным образом оказала влияние на поведение цыплят и их внешний вид . Цыплята отказывались от корма и воды , на раздражители реакция либо отсутствовала , либо была незначительна , наблюдалась мышечная дрожь , синюшность слизистых оболочек , у большинства испытуемых отмечалась взъерошенность перьевого покрова . В процессе транспортировки произошла гибель одной головы из группы стресс - чувствительных цыплят , которым не применяли цитрат лития .

Соотношение Г/Л после транспортировки значительно увеличивается у цыплят всех групп, однако степень выраженности этих изменений не равнозначна (Р=0,003). У цыплят первой группы соотношение Г/Л поднимается в 4,2 раза (Р<0,001), у цыплят второй группы в 2,7 раз (Р=0,001), у цыплят третьей группы в 2,8 раз (Р<0,001) и у цыплят четвертой опытной группы в 1,8 раз (Р=0,002).

Межгрупповые отличия показателя после транспортировки цыплят , которым применяли лития цитрат статистически высокодостоверны ( Р≤ 0,001) и составляют 45%, в отличие от показателей цыплят контрольных групп , где разница так же отличается , но в меньшей степени на 35%, при этом абсолютные показатели у цыплят , которым применяли лития цитрат ниже . Несмотря на существенные отличия представленных данных , в результате дисперсионного анализа показателей после транспортировки цыплят опытных и контрольных групп с одинаковой стрессовой чувствительностью ( сравнение 1 и 3, 2 и 4 групп ), наибольшие отличия отмечаются при анализе показателей содержания моноцитов в крови .

Показатель соотношения Г / Л , отражающий уровень стрессирования организма не имеет существенных отличий и статистическая разница соответствует для стресс - устойчивых цыплят Р =0,0644 и Р =0,3462 для стресс - чувствительных цыплят , что указывает на отсутствие выраженного антистрессового влияния лития цитрата и существенного воздействия его на показатели крови , взятой для анализа непосредственно сразу после транспортировки .

Через сутки после транспортировки наблюдается изменения в лейкограмме цыплят с разной стрессовой чувствительностью опытных и контрольных групп .

Показатель соотношения Г / Л в первой группе снижаясь в относительном выражении на 30% статистически не меняется ( Р =0,108), во второй группе цыплят показатель в относительном выражении снижается на 25,3% ( Р =0,099), в третьей группе цыплят показатель Г / Л снижается на 42,8% ( Р =0,002), в четвертой группе на 40,4% ( Р =0,005).

Оценивая межгрупповые различия лейкограммы цыплят через сутки после транспортировки необходимо отметить , что показатель соотношения Г / Л имеет существенные межгрупповые отличия через сутки после транспортировки цыплят , наименьший уровень показателя отмечается у стресс - устойчивых цыплят , которым применяли лития цитрат .

Анализируя показатели цыплят опытных и контрольных групп с одинаковой стрессовой чувствительностью ( сравнение 1 и 3, 2 и 4 групп ), проводимых для оценки влияния лития цитрата , при анализе количества гетерофилов и показателя соотношения Г / Л необходимо отметить , что имеется выраженная тенденция к более низкому содержанию их количества в крови цыплят опытной группы на 18% ( Р =0,046) и 30,8% ( Р =0,022) соответственно .

Высокодостоверные статистические отличия (Р<0,001) наблюдаются при анализе показателей количества лимфоцитов, гетерофилов и соотношения Г/Л. Разница этих показателей у стресс-чувствительных цыплят для лимфоцитов составляет 17,8% в сторону увеличения показателя у опытных цыплят, гетерофилов на 18% меньше и показатель соотношения Г/Л на 30,8% меньше у опытных цыплят по сравнению с контрольными. Различия указанных показателей для стресс-устойчивых цыплят носят туже направленность и составляют соответственно 12,6%, 34% и 42,6%.

Указанные изменения , указывают на выраженное влияние лития цитрата на показатели крови цыплят с разной стрессовой чувствительностью в течение суток после транспортировки . Характер изменений лейкограммы указывает на более высокую антистрессовую активность лития цитрата в отдаленный период после стрессового воздействия при применении стресс - устойчивым цыплятам , чем стресс - чувствительным .

Сравнивая показатели цыплят с исходными данными до транспортировки и с полученными через сутки после воздействия , необходимо отметить , что соотношение Г / Л у цыплят первой группы через сутки после транспортировки выше исходного уровня в 3 раза ( Р <0,001), у цыплят второй группы в 2 раза ( Р <0,001), у цыплят третьей группы на 60,6% ( Р =0,001), у цыплят четвертой группы отличия статистически не достоверны , на уровне 6,9% ( Р =0,566).

Обнаруженные изменения соотношения клеток белой крови непосредственно после транспортировки и через сутки после транспортировки имеют общую направленность для цыплят всех групп , выражающуюся в повышении под действием стрессирующего фактора уровня гетерофилов в крови и снижения количества лимфоцитов . При анализе показателей цыплят , которым применяли лития цитрат и цыплят контрольной группы четко прослеживается закономерность , выражающаяся в обнаруженном антистрессовом действии лития цитрата , ярко проявляющемся через сутки после транспортировки .

Соответствующие изменения показателей лейкограммы , обнаруженные непосредственно сразу после транспортировки , указывают на отсутствие статистически значимых изменений в опытных и контрольных группах , что может указывать на не выраженный стресс - протективный эффект лития цитрата при действии мощных сверхпороговых раздражителей , возможно это связано с особенностями фармакокинетики и фармакодинамики солей лития , обуславливающих выраженное антистрессовое действие солей лития в реализации постстрессовых компенсаторных механизмов , обуславливающее более выраженную нормализацию показателей до исходного уровня через сутки после транспортировки .

Вывод . Стрессовая чувствительность является важным фактором , обуславливающим фармакологическое действие лития .

ЛИТЕРАТУРА : 1. Gross W.B. Evaluation of the heterophil/lymphocyte ratio as a measure of stress in chickens/ W.B. Gross, H.S. Siegel// Avian Diseases. - 27(4). – рр . 972-979. - 1983. 2. Забудский Ю . И . Современные методы диагностики состояния стресса у сельскохозяйственных птиц / Ю . И . Забудский // Третья международная ирано - российская конференция « Сельское хозяйство и природные ресурсы » – М ., 2002. – С . 134–135.

ВЛИЯНИЕ ТРАНСПОРТИРОВОЧНОГО СТРЕССА НА ДИНАМИКУ СООТНОШЕНИЯ ГЕТЕРОФИЛОВ К ЛИМФОЦИТАМ КРОВИ У ЦЫПЛЯТ С РАЗНОЙ СТРЕССОВОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬЮ ПОД ДЕЙСТВИЕМ ЛИТИЯ ЦИТРАТА

Терман А . А .

Резюме

Транспортировка оказывает выраженное влияние на показатели соотношения гетерофилов к лимфоцитам крови . Характер изменений лейкограммы , обнаруженный в эксперименте , указывает на более высокую антистрессовую активность лития цитрата при применении стресс - устойчивым цыплятам , чем стресс - чувствительным .

INFLUENCE OF SHIPPING STRESS ON DYNAMICS OF INTERRELATION HETEROPHIL TO LYMPHOCYTES OF BLOOD AT CHICKENS WITH DIFFERENT STRESSFUL SENSITIVITY UNDER THE INFLUENCE OF CITRATE LITHIUM

Terman A.A.