Влияние углеводорода сквален на физиологическое состояние, морфологический состав крови и рост крыс при длительном применении

Автор: Кириллов И.Г.

Журнал: Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана @uchenye-zapiski-ksavm

Статья в выпуске: 2 т.242, 2020 года.

Бесплатный доступ

В данной работе представлены результаты по определению хронической токсичности углеводорода сквален и его влияния на физиологическое состояние лабораторных крыс, живую массу и морфологическую картину крови. Проведенные исследования показали, что длительное внутримышечное введение эмульсии сквалена способствует к повышению живой массы подопытных животных, не оказывает отрицательного действия на физиологическое состояние и не вызывает отклонений в гематологических показателях.

Хроническая токсичность, белые крысы, углеводород сквален, гематологические исследования

Короткий адрес: https://sciup.org/142224249

IDR: 142224249 | DOI: 10.31588/2413-4201-1883-242-2-85-88

Текст научной статьи Влияние углеводорода сквален на физиологическое состояние, морфологический состав крови и рост крыс при длительном применении

На организм животных постоянно воздействуют разнообразные факторы, которые вызывают глубокие изменения с появлением определенных патологий [1, 2, 11].

В последние годы большое внимание уделяется разработке и изучению специфических средств, стимулирующих или подавляющих иммунные реакции организма [13, 14]. Установлено, что многие лекарственные вещества обладают способностью повышать общую сопротивляемость организма или его неспецифический иммунитет. Возникла возможность с помощью этих лекарственных препаратов корректировать иммунные процессы организма. Способность этих препаратов повышать общую резистентность организма, ускорять процессы регенерации послужила основанием для их широкого применения в комплексной терапии инфекционных и инфекционно-воспалительных заболеваний. Оказалось, что многие из средств, стимулирующих иммунный статус, оказывают положительное влияние на рост, развитие и продуктивность животных [6, 8]. Но для безопасного использования таких препаратов необходимо проведение всесторонних доклинических исследований с целью полноценного изучения параметров безвредности [3, 5].

Исходя из вышеизложенного, целью наших исследований было изучение хронической токсичности углеводорода Сквален.

Материал и методы исследова- ний. Исследуемое вещество Сквален – это бесцветное масло, которое не имеет запаха и вкуса. Является ненасыщенным углеводородом, который относится к обширной группе изопреноидов. При этом обладает высокой температурой кипения, физической и химической стабильностью [4, 7].

Хроническую токсичность углеводорода сквален оценивали на 48 беспородных белых крысах обоего пола живой массой 60-75 г. Для проведения эксперимента нами было сформировано 4 группы по 12 крыс в каждой. При этом первая, вторая и третья группы были опытными, а четвертая – контрольной. Животным опытных групп внутримышечно вводили эмульсию сквалена в дозах 0,1 мл, 0,5 мл и 1,0 мл в течение 21 суток.

Опыт проводили в соответствии с «Руководством по определению доклинических исследований лекарственных средств» (А.Н. Миронов, 2012) и согласно методике Г.Н. Першина (1971), А.М. Смирнова, В.И. Дорожкина (2008) [9, 10, 12].

С момента первого введения исследуемого углеводорода и на протяжении двадцати одного дня вели наблюдение за клиническим состоянием животных. Взятие крови для гематологических исследований и измерение живой массы проводили в начале эксперимента, затем на 7, 14, 21 сутки.

Полученные пробы крови исследовали на автоматическом гематологическом анализаторе «Abacus Junior 5».

Таблица 1 - Изменение живой массы (г) подопытных крыс при длительном введении эмульсии сквалена, n=12 (M±m)
Срок исследования	Группа
	1	2	3	Контрольная
	0,1 мл	0,5 мл	1,0 мл	Контрольная
Исходные показатели	64,9±1,06	65,8±1,28	65,5±1,14	65,0±1,09
На 7 сутки	71,5±1,24	74,4±1,40 *	75,3±1,48 **	70,2±1,13
На 14 сутки	77,6±1,59	81,1±1,54 **	86,5±1,94 ***	75,8±1,30
На 21 сутки	88,9±1,70 ***	90,8±1,77 ***	96,7±1,89 ***	81,6±1,21
Примечание: * - р<0,05;	- р<0,02; * - р<0,01; *** - р<0,001;

Таблица 2 - Морфологические показатели лабораторных животных при длительном введении эмульсии сквален, n=12 (M±m)

Показатель	I опытная 0,1 мл	II опытная 0,5 мл	III опытная 1,0 мл	Контрольная
Исходные показатели
Лейкоциты, х10^-9/л	15,03±0,68	14,14±0,65	12,89±0,63	13,56±0,71
Лимфоциты, %	60,10±1,60	60,70±1,75	61,77±1,47	63,67±1,97
Моноциты, %	6,05±0,26	5,40±0,32	5,24±0,34	5,90±0,22
Нейтрофильные гранулоциты, %	33,85±1,12	33,90±1,18	32,99±1,27	30,43±1,45
Эритроциты, х10^-12/л	7,36±0,31	7,38±0,25	7,32±0,21	7,43±0,26
Гемоглобин, г/л	137,67±4,12	140,17±4,42	135,08±4,58	144,83±3,94
Гематокрит, %	43,72±1,60	42,36±1,75	45,66±1,43	46,59±1,24
На 7 сутки
Лейкоциты, х10^-9/л	10,44±0,52 ***	11,01±0,46 ***	10,02±0,39 ***	12,34±0,59
Лимфоциты, %	61,60±1,05	59,27±2,23	56,73±1,96	60,17±0,88
Моноциты, %	6,97±0,14 ***	6,54±0,21 ***	6,37±0,14 ***	6,02±0,16
Нейтрофильные гранулоциты, %	31,43±1,83	34,19±1,01	36,90±2,14	33,81±1,08
Эритроциты, х10^-12/л	7,41±0,14	7,24±0,16	7,15±0,11	7,60±0,17
Гемоглобин, г/л	143,01±2,60	137,25±2,23	132,42±2,06	152,58±2,41
Гематокрит, %	42,15±1,31	40,31±1,02	41,54±1,18 *	44,76±1,42
На 14 сутки
Лейкоциты, х10^-9/л	12,72±0,78 *	16,28±0,86	17,69±1,01 ***	15,89±0,70
Лимфоциты, %	59,70±2,44	54,16±1,50 ***	51,03±1,12 ***	58,92±2,15
Моноциты, %	5,57±0,31	6,23±0,12 *	6,01±0,22	5,76±0,28
Нейтрофильные гранулоциты, %	34,73±1,48	39,61±1,15 ***	42,96±1,03 ***	35,32±1,29
Эритроциты, х10^-12/л	7,46±0,10	6,89±0,09	7,03±0,08	7,62±0,06
Гемоглобин, г/л	148,75±1,95 *	123,00±2,10 ***	126,50±2,35	155,67±1,78
Гематокрит, %	40,84±1,12	39,73±0,97	40,52±1,28 **	44,38±1,03
На 21 сутки
Лейкоциты, х10^-9/л	11,76±0,49 ***	13,59±0,72	16,02±0,63 ***	18,06±0,55
Лимфоциты, %	56,31±0,92	62,04±1,23	59,87±1,58	67,10±0,77
Моноциты, %	6,83±0,11 **	5,25±0,25	4,40±0,30	5,34±0,29
Нейтрофильные гранулоциты, %	36,86±1,08	32,71±1,76	35,73±1,45	27,56±1,01
Эритроциты, х10^-12/л	7,09±0,15	7,40±0,19	7,26±0,17	7,51±0,12
Гемоглобин, г/л	130,58±3,90	141,92±3,86	138,92±4,14	148,08±4,76
Гематокрит, %	44,13±1,38	46,10±1,21	43,80±1,59	42,41±1,07

Примечание: * - р<0,05; ** - р<0,02; *** - р<0,01; *** - р<0,001;

Результаты исследований. При оценке физиологического состояния подопытных животных нами было установлено отсутствие каких-либо признаков токсического действия исследуемой эмульсии сквалена, а также отличий от контрольной группы.

Крысы, находящиеся в эксперименте, были активны, охотно принимали корм и пили воду, волосяной покров у них имел блеск и был гладким. При измерении температуры тела и дыхательных движений в течение 21 суток не отмечали никаких отклонений от физиологической нормы. На протяжении всего опыта гибели среди животных не наблюдали. В таблице 1 представлены изменения живой массы подопытных крыс при определении хронической токсичности эмульсии сквалена в разных дозах.

Из таблицы 2 видно, что на 14 сутки содержание гемоглобина в крови животных первой опытной группы повышается на 7,5 % (р≤0,05), а во второй понижается на 12,3 % (р≤0,01), по сравнению с фоновыми показателями. При этом изменения не выходят за рамки физиологической нормы.

Уровень лейкоцитов на 7 сутки после введения сквалена во всех опытных группах был ниже, чем исходные показатели и составил в первой группе 10,44±0,52 х10-9/л, во второй – 11,01±0,46 х10-9/л и в третьей – 10,02±0,39 х10-9/л. Тенденция к снижению количества лейкоцитов наблюдается у подопытных животных первой группы и на четырнадцатый, и на двадцать первый день исследования. А у крыс третьей опытной группы через 2 и 3 недели с начала эксперимента уровень лейкоцитов, наоборот, увеличивается.

По показателям лейкоформулы следует отметить, что процент лимфоцитов на 14 сутки в 1 и 2 опытных группах достоверно снижается. В то же время на фоне такого снижения отмечается достоверное увеличение процентного содержания нейтрофильных гранулоцитов.

Такое изменение уровня лейкоцитов, а также колебания в лейкоформуле в пределах физиологической нормы можно объяснить, как ответную реакцию орга- низма на введенную эмульсию сквалена.

Заключение. Таким образом, анализ полученных результатов показал, что длительное введение эмульсии сквалена способствует к повышению живой массы подопытных животных, не оказывает отрицательного действия на физиологическое состояние и не вызывает отклонений в морфологической картине крови.

Резюме

Список литературы Влияние углеводорода сквален на физиологическое состояние, морфологический состав крови и рост крыс при длительном применении

Балашов, В.В. Применение препарата Ветостим с целью повышения эффективности специфической профилактики Ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита у кур у цыплят-бройлеров и индюшат: дис. канд. вет. наук: 06.02.02 / Балашов Виктор Викторович. - Омск, 2014. - 131 с.
Венгеренко, Л.А. Ветеринарные проблемы птицеводства и их решение / Л. А. Венгеренко // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2007. - № 3. - С. 3-8.
Дорожкин, В.И. Особенности естественной резистентности и обмена веществ телят под действием иммунокорректоров / В.И. Дорожкин, Р.А. Асрутдинова // Материалы 111 - Съезда фармакологов и токсикологов России "Актуальные проблемы ветеринарной фармакологии, токсикологии и фармации", Санкт-Петербург. - 2011. - С. 156-159.
Кириллов, И.Г. Определение острой токсичности и кумулятивных свойств углеводорода сквален / И.Г. Кириллов, Р.А. Асрутдинова, Ф.Ф. Сунагатов, Е.Г. Кириллов // Материалы V-го Международного конгресса ветеринарных фармакологов и токсикологов "Эффективные и безопасные лекарственные средства в ветеринарии". - Санкт-Петербург. - 2019. - С. 86-88.
Кузьминова, Е.В. Некоторые аспекты доклинических исследований обменностабилизирующего препарата / Е.В. Кузьминова, М.П. Семененко, А.Ю. Варивода, Е.В. Тяпкина // Ветеринарный врач. - 2015. - № 1. - С. 44-46.
Мирошкина, И.А. Исследование хронической токсичности потенциального анксиолитика ГМЛ-1 / И.А Мирошкина, А.В. Сорокина, А.В Волкова [и др.] // Фармакокинетика и фармакодинамика. - 2019. - № 1. - С. 44-53.
Музалевская, Е.Н. Сквален: физиологические и фармакологические свойства / Е.Н Музалевская, Л.А. Мирошниченко, В.А. Николаевский [и др.] // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2015. - Том 78 (№6). - С. 30-36.
Набиев, Ф.Г. Современные ветеринарные лекарственные препараты: справочник / Ф.Г. Набиев, Р.Н. Ахмадеев. - 2-е изд., перераб. - Санкт-Петербург: Лань. - 2011. - 816 с.
Першин, Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапии / Г.Н. Першин. - М.: Изд. "Медицина". - 1974. - 143 с.
Руководство по определению доклинических исследований лекарственных средств / А.Н. Миронова. - М.: Изд. "Гриф и К". - 2012. - Ч. 1. - 944 с.
Сагитова, М.Г. Гигиеническое обоснование применения полисахарида "Грамо" в птицеводстве: дис. канд. биол. наук: 06.02.05 / С.М. Габдулхаевна. - Казань, 2015. - 184 с.
Смирнов, А.М. Научно-методологические аспекты исследования токсикологических свойств фармакологических лекарственных средств для животных / А.М. Смирнов, В.И. Дорожкин; Рос. акад. с.-х. наук. - Москва. - 2008. - 120 с.
Aguilar, J.C. Vaccine adjuvants revisited / J.C. Aguilar, E.G. Rodrıguez // Vaccine. - 2007. - №25. - Р. 3752-3762.
Imani Fooladi, A. A. Synergistic effects between Staphylococcal enterotoxin type B and Monophosphoryl lipid A against mouse fibrosarcoma / А.А. Imani Fooladi, М. Sattari, М. Reza Nourani // J BUON. - 2010. - Vol. 15. - № 2. - Р. 340-347.

Еще

Статья научная