Влияние витамина парааминобензойной кислоты на морфологию лейкоцитов, биохимический и минеральный состав крови кроликов в весенний период года

Введение. Состав крови характеризует физиологическое состояние животного, а также показывает, насколько организм приспособлен к условиям окружающей среды. С путем наблюдения за изменением картины крови возможно оценить влияние кормления и содержания в определенных условиях на организм животных [1].

Кровь – это жидкая ткань организма, циркулирующая по всему телу, состоящая из плазмы и форменных элементов, которые представляют собой высокоспециализированные клетки: эритроциты, лейкоциты и тромбоциты.

Лейкоциты называют белыми кровяными клетками крови, главная функция которых – защита организма от инородных тел, появляющихся в крови и тканях. Их подразделяют на две большие группы: зернистые (гранулоциты) и незернистые (агранулоциты). К зернистым лейкоцитам относят базофилы, эозинофилы и нейтрофилы, которые, в свою очередь, делятся на палочкоядерные и сегментоядерные. Агрануло-циты делятся на лимфоциты (большие, средние и малые) и моноциты. Как правило, лимфоциты составляют большую часть лейкоцитов (лимфоцитарный профиль крови): у кроликов до 83 %. Лейкоцитарная формула показывает процентное соотношение различных форм лейкоцитов.

Кальций и фосфор имеют большое значение для жизнедеятельности кроликов. Они составляют порядка 60–70 процентов всех минеральных веществ организма, недостаток которых нарушает нормальное течение физиологических процессов, что ведет к задержке роста и развития, возникновению заболеваний различного рода. Их усвоение в организме связано между собой. Около 99 % кальция и 85 % фосфора содержится в костных тканях, которые являются основным депо этих элементов [2]. Кальций участвует в сокращении мышц и свертывании крови, обеспечивает возбудимость нервной и мышечной тканей, понижает проницаемость кровеносных сосудов, защитные силы организма, повышает защитную функцию лейкоцитов. Фосфор входит в состав фосфолипидов мембран клеток, различных белков, липидов, углеводов, коферментов, участвует в обмене энергии. Процесс фосфорилирования имеет боль- шое значение для всасывания и промежуточного обмена ряда веществ [3].

Важнейшая составная часть крови – это белки. Они играют непосредственную роль в образовании иммунитета [2, 4].

Общее количество белка и его фракций является одним из главных биохимических показателей сыворотки крови.

Белки животного и растительного происхождения, витамины группы В, входящие в состав корма играют важную роль в организме и имеют существенное значение для роста и развития животных. Они участвуют в процессах сокращения, регуляции метаболизма, реакциях, которые обеспечивают защиту организма [5].

На лейкоцитарную формулу, количество кальция и фосфора, общего белка и его фракций в крови оказывает влияние возраст животного, пол, порода, условия содержания и кормления, время года и физиологическое состояние.

Парааминобензойная кислота (ПАБК) – витамин В 10 производной бензойной кислоты. Представляет собой белый кристаллический порошок. ПАБК, а также ее производные, имеют широкий спектр биологического действия, обладают активностью антикоагулянта [6–9] и характеризуются низкой токсичностью, Участие в процессах обмена несколько уменьшает явления тиреотоксикоза [10]. Являясь важным фактором роста для многих микроорганизмов, также и для тех, которые населяют кишечник животных и способны к синтезу ряда витаминов, па-рааминобензойная кислота помогает поддерживать в норме баланс кишечной микрофлоры. Возможно, с таким непрямым действием пара-аминобензойной кислоты и связано ее стимулирующее влияние на рост молодых животных, в частности кроликов [11].

Цель исследований. Изучить особенности лейкоцитарной формулы крови, а также содержание общего кальция и неорганического фосфора, количество общего белка и его фракций в сыворотке крови кроликов опытной и контрольной групп в весенний период года при применении парааминобензойной кислоты.

Задачи исследований: оценить эффективность воздействия витамина парааминобензой-ной кислоты на организм кроликов в весенний период года.

Материалы и методы исследований. Исследования проводили в физиологической лаборатории Института прикладной биотехнологии и ветеринарной медицины Красноярского государственного аграрного университета (кафедра внутренних и незаразных болезней, акушерства и физиологии сельскохозяйственных животных). В ходе исследований опытную и контрольную группу кроликов в количестве 10 голов, по 5 в каждой группе, в возрасте 7 месяцев, содержали в весеннее время года в физиологическом дворе на открытом воздухе стационара Института прикладной биотехнологии и ветеринарной медицины КрасГАУ. При этом учитывались температура окружающей среды, влажность воздуха, освещенность, атмосферное давление и радиационный фон.

Рацион питания кроликов опытной и контрольной групп соответствовал нормам кормления и был представлен комбикормом для кроликов: рецепт № ПЭК 91 Гост 3 51551-2000, изготовитель ООО «Красноярский комбикормовый з-д». Комбикорм представляет собой смесь кормов в измельченной, следовательно, наилучшей для усвоения форме в виде гранул.

В рацион кормления кроликов опытной группы витамин парааминобензойную кислоту включали 1 раз в сутки в утреннее кормление в количестве 10 мг на 1 кг живой массы в течение 10 дней.

Подсчет лейкоцитарной формулы, определение количества кальция и фосфора, определение количества общего белка и его фракций в крови кроликов опытной и контрольной групп проводили после включения витамина пара-аминобензойной кислоты в рацион кормления.

Забор крови производили путем прокола иглой небольшого диаметра из ушной вены, которая расположена снаружи по тонкому краю предварительно растертого уха, так как отмечено, что там могут застаиваться некоторые клетки крови [12].

Полученные пробы крови направлялись в Научно-исследовательский испытательный центр ФГБОУ ВО «Красноярского ГАУ» по контролю качества сельскохозяйственного сырья и пищевых продуктов, где определялось количество общего фосфора, общего кальция и обще- го белка биуретовым методом, фракции белка – нефелометрическим методом.

Для выведения лейкоцитарной формулы готовили окрашенные мазки и под иммерсионной системой микроскопа выводили лейкоцитарную формулу по определенной системе. Рассматривая клетки в мазке, периодически сравнивали с рисунком лейкоцитов атласа. Для подсчета лейкоцитов пользовались счетчиком, который имеет одиннадцать клавиш, соответствующих названию отдельных лейкоцитов.

Статистическую обработку результатов производили с помощью программ Statistica 8.

Результаты исследований и их обсуждение. Данные полученных исследований по выведению лейкоцитарной формулы крови у кроликов опытной и контрольной групп в возрасте 7 месяцев в весенний период представлены на рисунке 1.

Во время наших исследований значительных сдвигов в лейкоцитарной формуле не наблюдали, но существует небольшое возрастание отдельных форм лейкоцитов. Количество эозинофилов во время исследования не превышало физиологическую норму, однако в фоновых исследованиях лейкоцитарной формулы выявлено небольшое повышение количества эозинофилов. Это позволяет нам судить, что витамин парааминобензойная кислота снижает действие стресс-факторов на организм кроликов.

Нами было установлено, что у кроликов опытной группы количество сегментоядерных нейтрофилов было выше на 16 % с достовено-стью p<0,0007. Количество палочкоядерных нейтрофилов в опытной группе кроликов по сравнению с контрольными показателями было в пределах физиологических норм и немного меньше. Количество сегментоядерных нейтрофилов в крови у опытных кроликов после применения ПАБК было больше, что оказывает влияние на повышение резистентности организма животных.

Результаты определения количества общего белка, содержания общего кальция и неорганического фосфора в контрольной и опытной группах животных после применения параами-нобензойной кислоты представлены на рисунках 2–4.

Рис. 1. Данные полученных исследований по выведению лейкоцитарной формулы крови у кроликов опытной группы и контрольной групп в возрасте 7 месяцев в весенний период года после применения парааминобензойной кислоты

Количество общего белка, г/л

■ Контрольная группа ■ Опытная группа

Рис. 2. Содержание общего белка в сыворотке крови кроликов опытной и контрольной групп после применения витамина парааминобензойной кислоты

3,5

2,5

1,5

0,5

2,3

2,2

2,1

1,9

1,8

1,7

Содержание общего кальция, ммоль/л

■ Контрольная группа ■ Опытная группа

Рис. 3. Содержание общего кальция в сыворотке крови кроликов опытной и контрольной групп после применения витамина парааминобензойной кислоты

Содержание неорганического фосфора, ммоль/л

■ Контрольная группа ■ Опытная группа

Рис. 4. Содержание неорганического фосфора в сыворотке крови кроликов опытной и контрольной групп после применения витамина парааминобензойной кислоты

Через 10 дней после начала эксперимента количество общего белка, общего кальция и неорганического фосфора в сыворотке крови у кроликов в опытной и контрольной группах находилось в пределах физиологических норм.

Результаты проведенных исследований показывают, что количество общего белка в сыворотке крови в опытной группе у кроликов было выше, чем в контрольной группе, на 9,1 %, с достоверностью p<0,0005. Это связано с тем, что введение в рацион кроликов в вышеуказан- ной дозе витамина парааминобензойной кислоты после начала опыта оказывает стимулирующее влияние на усвояемость белков корма, увеличивает их распад, что положительно сказывается на приросте живой массы у кроликов опытной группы.

Количество общего кальция в сыворотке крови опытной группы кроликов было выше на 14,1 %, с достоверностью p<0,00003, а содержание неорганического фосфора в сыворотке крови в опытной группе. у кроликов через 10 дней после начала эксперимента также было выше, чем в контрольной группе, на 12,7 %, с достоверностью p<0,00006. Таким образом, добавление в рацион кроликов парааминобензой-ной кислоты в дозе 10 мг на 1 кг живой массы в весенний период года оказывает влияние на кальциево-фосфорный обмен, при этом увели- чивается всасывание кальция и фосфора в кровь.

Данные по определению белковых фракций в сыворотке крови у кроликов породы Серый великан после применения витамина парааминобен-зойной кислоты представлены на рисунке 5.

Анализ результатов исследований показал, что в весеннее время года происходит стимуляция выработки альбуминов. В сыворотке крови у кроликов опытной группы количество α-глобулинов и β-глобулинов было выше по сравнению с контрольной группой. Увеличение фракций белка в сыворотке крови при введении в рацион кормления кроликов витамина пара-аминобензойной кислоты в дозе 10 мг на 1 кг живой массы вызвано усилением синтеза белка в тканях организма и белоксинтезирующей функции печени, а также активным транспортом белка с кровью.

■ Альбумины, %

■ α-глобулины, %

■ β-глобулины,%

■ γ-глобулины,%

Рис. 5. Белковые фракции в сыворотке крови у кроликов породы Серый великан после применения витамина парааминобензойной кислоты

Заключение. Проведенные исследования по выведению лейкоцитарной формулы крови, а также общего кальция и неорганического фосфора, определению общего белка и его фракций в сыворотке крови у кроликов опытной группы свидетельствуют, что витамин параамино-бензойная кислота оказывает стимулирующее действие и активизирует минеральный обмен, в частности концентрацию общего кальция и неорганического фосфора, что положительно влияет на физиологическое состояние кроликов, способствует повышению резистентности организма животных.