Влияния аминосислотного комплекса "Витаамин" на биохимические показатели крови мышей

В связи с глобальным загрязнением окружающей среды особую актуальность приобретает изучение влияния на организм животных новых источников кормовых средств, имеющих натуральное происхождение. Известно, что химически насыщенные кормовые добавки и премиксы оказывают отрицательное влияние на организм, снижается репродуктивность, рождаются животные с патологиями, без желчного пузыря и прочее. А получаемая от таких животных и птиц продукция приобретает химический привкус и запах, снижается её ценность и качество [1, 9].

Воздействие малых доз токсикантов изменяет характер течения многих заболеваний, нарушаются обменные процессы, искажаются иммунные ответы организма. Хронические токсические воздействия ведут к развитию неспецифических изменений органов и систем. Токсические влияния малой интенсивности вызывают явления псевдоадаптации, при этом временно компенсируются скрытые патологические процессы. Это способствует метаболической переориентации организма и изменению обмена веществ. В целом снижается воспроизводительная способность и уровень продуктивности животных и ухудшается биологическая ценность животноводческой продукции [2, 3, 4].

Объективным индикатором служит система полноценного и правильного кормления животных, сбалансированности по питательным и биологически активным веществам, а также усвоение этих веществ в их организме [8, 9, 10, 12]. Научные достижения в области кормления животных в последние десятилетия значительно опережают успехи практического животноводства, большинство специалистов-практиков ощущают нехватку в современных знаниях о нормированном кормлении животных экологически безопасными компонентами рациона [5, 6, 7, 11]. С целью точного прогнозирования положительного эффекта важен правильный расчёт дозировок, лабораторные испытания безопасности скармливания новых добавок и кормовых средств.

Материал и методы исследований. Цель настоящей работы – выяснить влияние аминокислотного комплекса «ВитаАмин» на общее состояние организма и биохимические показатели крови у лабораторных мышей при изучении хронической токсичности.

Объектом исследования для выполнения намеченной цели выбраны лабораторные животные – беспородные белые мыши. Определение хронической токсичности у них позволит выяснить степень повреждающего действия аминокислотного комплекса при длительном применении, определить наиболее чувствительные органы и системы у мышей.

Предметом изучения стал аминокислотный комплекс «ВитаАмин», изготовленный методом ферментативного гидролиза, имеет натуральное (животное) происхождение, включает до 17

аминокислот (34,74±5,21 г/100 г продукта), которые обладают высокой биологической активностью, массовая доля белка составляет 35,5±0,20 % (таблица 1).

Таблица 1 – Химический состав аминокислотного комплекса «ВитаАмин»

Показатель, ед.	Содержание
Аспарагиновая кислота, г/100 г продукта	3,31±0,50
Глутаминовая кислота г/100 г продукта	2,88±0,43
Серин, г/100 г продукта	0,70±0,11
Гистидин, г/100 г продукта	0,52±0,08
Глицин, г/100 г продукта	0,95±0,14
Треонин, г/100 г продукта	0,60±0,09
Аргинин, г/100 г продукта	0,89±0,13
Аланин, г/100 г продукта	1,30±0,19
Тирозин, г/100 г продукта	1,15±0,17
Цистин, г/100 г продукта	0,32±0,05
Валин, г/100 г продукта	1,82±0,27
Метионин, г/100 г продукта	0,42±0,06
Фенилаланин, г/100 г продукта	1,76±0,26
Изолейцин, г/100 г продукта	3,18±0,48
Лейцин, г/100 г продукта	4,46±0,67
Лизин, г/100 г продукта	7,41±1,11
Пролин, г/100 г продукта	3,10±0,46
Витамин А (ретинол), МЕ/л	8300±2000
Витамин D 3 (колекальциферол), МЕ/л	510 000±120 000
Витамин В 1 (тиамин), г/л	4,31±0,26
Витамин В 2 (рибофлавин), г/л	3,2±0,26
Витамин В 6 (пиридоксин), г/л	2,38±0,19
Медь, мг/кг	7,6±1,8
Цинк, мг/кг	45,3±9,5

Кроме аминокислот комплекс богат витаминами А, D и группы B, содержит микроэлементы медь и цинк.

Производителем является Россия, г. Москва фирма ООО «Семирамида» (ТУ 20.14.42-001-27361838-2019, сертификат соответствия РОСС RU.HB56.H01245). Аминокислоты легко проникают через стенки клеток желудка, кишечника и быстро усваиваются организмом, стимулируя усвоение веществ пищевого рациона.

Научно-исследовательская работа проводилась в виварии на кафедре хирургии, акушерства, фармакологии и терапии ФГБОУ ВО Ульяновский ГАУ. Исследование крови проводили современными методами на приборе «Stat Fax 1904 Plus» в кафедральном центре «Морфолог». Сформировали группы белых мышей со средней живой массой 34,7 г в 4 группы (в каждой группе было по 10 животных): 1-я контрольная и 3-и опытных (Таблица 2).

Таблица 2- Схема опыта на лабораторных животных

Группа животных	I – группа контроль	II – группа опыт	III – группа опыт	IV– группа опыт
Количество мышей	10	10	10	10
Условия кормления	ОР	ОР +0,02 мл/гол/сут Вита-Амин	ОР +0,04 мл/гол/сут Вита-Амин	ОР +0,06 мл/гол/сут ВитаАмин

Животные содержались в виварии в     товом режиме и свободном доступе к пище стандартных клетках при 12-часовом све-      и воде в соответствии со стандартами, утвержденными МЗ РФ. Опытным животным аминокислотный комплекс «Вита-Амин» давали энтерально 1 раз в день, каждому животному на голодный желудок в течение 60 дней. Небольшие кусочки хлеба пропитывали в рассчитанной дозировке «ВитаАмин». Контрольной группе животных давали кусочки хлеба без добавки, 2-й группе – кусочки хлеба пропитанные «ВитаАмин» в дозе 0,5 мл/кг (что составило 0,02 мл на голову), 3-й группы -в дозе 1 мл/кг (что составило 0,04 мл на голову), 4-й группы – в дозе 1,5 мл/кг (что составило 0,06 мл на голову). Рацион животных соответствовал норме.

На протяжении опыта наблюдали за поведением животных, проводили контрольные взвешивания. В 4-й группе отмечали явления токсикоза, снижение массы. В конце эксперимента было проведено вскрытие животных, отобраны пробы печени, проведен забор крови и изучены ее биохимические показатели. Результаты статистически обрабатывали с помощью компьютерной программы «Statistika».

Результат исследований. Включение натуральной добавки в рацион белых мышей оказало влияние на биохимический состав их крови (Таблица 3). Все показатели контрольной группы находились в пределах физиологической нормы. Как следует из данных, представленных в таблице 3, биохимические показатели 2-й и 3-й групп имели определенные колебания. Однако эти колебания статически недостоверны в сравнении с показателями контрольной группы, все изменения показателей не выходили за пределы верхних и нижних границ нормы.

Таблица 3 – Биохимические показатели крови белых мышей при использовании аминокислотного комплекса «ВитаАмин»

Показатель	1-группа	2-группа	3-группа	4-группа
Общий белок, г/л	60,1±0,7	60,9±1,1	62,08±2,1	74,1±0,8
% к контролю	100,00	101,3	103,3	123,3
АСТ, Е/л	112,9±0,06	119,06±0,1	159,03±12,7	278,03±20,7
% к контролю	100,00	105,9	140	246,2
АЛТ, Е/л	52,3±4,5	49,3±0,3	62,01±2,3	71,9±2,8
% к контролю	100,00	94,2	118,5	137,47
Креатинин, мкмоль/л	54,4±0,3	55,3±0,6	56,09±4,1	61,1±22,05
% к контролю	100,00	101,6	113,9	112, 3
Глюкоза ммоль/л	4,1±0,7	4,6±1,1	5,9±1,8	8,1±5
% к контролю	100,00	112,2	120,4	197,56

Примечание: нормы у лабораторных мышей содержания общего белка 45-60 г/л, АЛТ – 52,059,0 Е/л, АСТ –112,0-127,0 Е/л, креатинин 51,0-59,0 мкмоль/л, глюкоза 2,5-7,0 ммоль/л

Анализ биохимических данных применения в качестве кормовой добавки комплекса «ВитаАмин» показал, что такой показатель, как содержание общего белка в сыворотке крови лабораторных животных в 1-й, 2-й и 3-й группах заметно не отличался и был в пределах физиологической нормы 60,1±0,7 – 62,08±2,1 г/л. Использование препарата у животных в 4-й группе способствовало увеличению этого параметра на 23,3 % по сравнению с контролем.

Изучение активности сывороточных ферментов: аспартат и аланинаминотрансферазы (АСТ и АЛТ) позволило выявить следующую картину: добавление к рацио- ну мышей 2-й группы дозировки «Вита-Амин» 0,02 мл/гол/сут не оказало заметного влияния на уровень активности данных ферментов; введение животным 3-й группы 0,04 мл/гол/сут способствовало увеличению активности аминотрансфераз на 40,0 и 18,5 %; применение дозы 0,06 мл вызвало повышение активности АСТ в 2,5 раза и АЛТ на 37,47 %, по сравнению с контролем (Рисунок 1).

Следовательно, использование в кормлении мышей повышенной дозировки аминокислотного комплекса 0,06 мл/гол/сут для лабораторных животных 4-й группы является началом деструктивных изменений в тканях их печени. По- казатели активности аминотрансфераз в сыворотке крови мышей превышают нормативные значения, возможно, вследствие повышения проницаемости клеточных мембран.

Уровень креатинина в 4-й опытной группе составил 61,1±22,05 мкмоль/л, что на 12,3 % выше показателей в контроле. В то же время у животных 2-й группы этот параметр был на одном уровне, а в 3-й -возрастал на 13,9 % по сравнению с 1-й. Все колебания были в пределах физиологической нормы. Этот показатель характеризует наращивание мышечной массы на фоне препарата.

Рисунок 1 – Активность АСТ и АЛТ в крови мышей при использовании аминокислотного комплекса «ВитаАмин»

С целью тестирования степени повреждающего действия аминокислотного комплекса было проведено исследование содержания глюкозы в крови, как чувствительного показателя выраженности деструктивных процессов в тканях поджелудочной железы. В ходе опыта установлена концентрация глюкозы в сыворотке крови мышей контрольной группы в рамках 4,1±0,7 ммоль/л. Скармливание аминокислотного комплекса «ВитаАмин» в дозах 0,02 и 0,04 мл не оказало достоверного влияния на содержание глюкозы в сыворотке крови мышей 2-й и 3-й групп. Использование дозировки 0,06 мл способствовало повышению уровня глюкозы до 8,1±2,8 ммоль/л, что на 97,56 % выше по сравнению с 1-й группой. Это указывает на замедление утилизации глюкозы печенью, вероятно, в результате повреждения и деструкции гепатоцитов, что согласуется с ростом активности печеночных трансфераз, в частности АСТ- как признак эндогенной интоксикации.

Заключение. Проведённое лабора- торное исследование по скармливанию аминокислотного комплекса «ВитаАмин» белым мышам показало, что вводить его в рацион лучше в диапазоне 0,02-0,04 мл на голову раз в сутки. Такая норма скармливания препарата является безопасной и наиболее эффективной. Использование дозировки 0,06 мл/гол/сут способствует более напряжённой работе печени животных и нарушению структуры её клеток, оказывает токсическое действие на организм мышей.

Резюме

Изучено влияние аминокислотного комплекса «ВитаАмин» на биохимические показатели белых беспородных мышей в различных дозировках. Опыт организован в условиях вивария на кафедре хирургии, акушерства, фармакологии и терапии в течение 60 дней. Были сформированы 4 группы по 10 мышей: 1-я группа (контроль) «ВитаАмин» не получала, 2-й, 3-й и 4-й группе дополнительно в рацион вводили «ВитаАмин» в дозировках: 0,02, 0,04, 0,06 мл на голову один раз в сутки. В эксперименте участвовали 40 белых мышей. Анализ результатов показал, что скармливать аминокислотный комплекс «ВитаАмин» в качестве добавки к рациону лучше в диапазоне 0,02-0,04 мл на голову раз в сутки. Такая норма скармливания препарата является безопасной и наиболее эффективной. Использование дозировки 0,06 мл/гол/сут способствует более напряжённой работе печени животных и нарушению структуры её клеток, оказывает токсическое действие на организм мышей.