Вызревание растений для создания коллекции винограда in vitro

Цель исследования - разработка способа создания коллекции генофонда винограда in vitro при совместном применении биотехнологических методов: модификации питательной среды и культивировании растений в условиях пониженной положительной температуры. В процессе культивирования при повышенном содержании сахарозы в питательной среде (50-70 г/л) появлялась осенняя окраска листьев и происходило вызревание побегов у различных сортов винограда: Сыпун черный, Виерул, Цимлянский черный (клон 2-3), Каберне Совиньон, Кумшацкий, Рупестрис дю Ло, Цимладар, более слабое у сортов Красностоп золотовский, Баклановкий, Сибирьковый. Это способствовало продлению сроков беспересадочного хранения растений. Достаточно высокая жизнеспособность растений при концентрации сахарозы 70,0 г/л в течение первых 5 месяцев культивирования постепенно снижалась при культивировании их в течение 8-9 месяцев. Установлена возможность регенерации in vitro растений из вызревших микрочеренков при культивировании их в течение одного года. Для повышения сохранности и жизнеспособности растений осуществляли хранение вызревших пробирочных растений в фармацевтическом шкафу при пониженной положительной температуре 1-8 °С. Растения хранились в плотно закрытых пробирках на твердой культуральной среде. При хранении в этих условиях в течение 3-4 лет растения имели длину вызревшей части побегов 49,8-70,3 %. Лучшее вызревание по сравнению с аборигенными - у межвидовых сортов винограда и подвоев. Через месяц культивирования одревесневших микрочеренков с живыми тканями на твердой питательной среде Мурасиге и Скуга выявлены единичная регенерация побегов и восстановление растений. Культивирование восстановленных растений в стандартных условиях на твердой питательной среде Мурасиге и Скуга с добавлением регулятора роста «Мелафен» в течение 3 месяцев способствовало дальнейшей регенерации и улучшению ростовых процессов как корней, так и побегов. Произошло полное восстановление растений. Доказана возможность беспересадочного хранения пробирочных растений винограда в течение 3-4 лет при сочетании двух факторов: повышенной концентрации сахарозы в составе питательной среды и пониженной положительной температуры 1-8 °С.