Взаимосвязь мутационного статуса генов JAK2, CALR и MPL с фенотипическими особенностями эссенциальной тромбоцитемии



А. Х. Габдулхакова, В. А. Овсепян, Е. В. Трегубова, Е. Л. Назарова

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства», г. Киров

ВЗАИМОСВЯЗЬ МУТАЦИОННОГО СТАТУСА ГЕНОВ JAK2 , CALR И MPL

С ФЕНОТИПИЧЕСКИМИ ОСОБЕННОСТЯМИ ЭССЕНЦИАЛЬНОЙ ТРОМБОЦИТЕМИИ

Введение. Эссенциальная тромбоцитемия (ЭТ) — миелопролиферативное заболевание характеризующееся повышенной продукцией мегакариоцитов в костном мозге и тромбоцитозом в периферической крови. Ключевым звеном патогенеза ЭТ является неконтролируемая активация клеточного сигнального пути JAK-STAT, в основе которой лежат соматические точечные мутации генов, кодирующих тирозин-киназу (JAK2) и белок кальретикулин (CALR), а также гена рецептора тромбопоэтина (MPL). В последние годы установлена молекулярная картина ЭТ, что предопределило необходимость дальнейшего изучения влияния указанных мутаций на течение,риск развития осложнений и прогноз заболевания.

Цель исследования. Оценить распространенность драйверных соматических мутаций у пациентов с ЭТ и определить их взаимосвязь с временем дебюта заболевания и некоторыми клинико-лабораторными показателями.

Материалы и методы. Проведен анализ историй болезни 193 пациентов с ЭТ, наблюдавшихся в ФГБУН КНИИГиПК ФМБА России с 1995 по 2019 гг. Возраст обследованных в дебюте заболевания колебался от 18 до 90 лет (меди- ана 57 лет), из них 65 (33,7 %) мужчин и 128 (66,3 %) женщин, сопоставимых по возрасту. Мутации генов JAK2, CALR и MPL определяли с помощью праймеров ЗАО «Евроген» (г. Москва) и компании «Синтол» (г. Москва), используя геномную ДНК путем полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией продуктов реакции в полиакриламидном геле. Статистическая значимость различий в случае нормального распределения количественных показателей оценивалась с помощью критерия Стьюдента при отсутствии нормального распределения — критерия Манна-Уитни. Статистически значимыми считали отличия при р < 0,05.

Результаты. Мутация V617F гена JAK2 обнаружена у 130 (67,4 %) человек, мутации гена CALR — у 35 (18,1 %) пациентов, в 1 (0,5 %) случае выявлена мутация W515L гена MPL (MPL+). У 26 (13,5 %) пациентов не обнаружено ни одной драйверной мутации. Они отнесены к обследованным с так называемым тройным негативным статусом (TN+). Мутационный статус гена CALR складывался из like мутаций p. L367fs*46 (делеция в 52 п. о. — тип 1) и p. K385fs*47 (инсерция в 5 п. о. — тип 2). Мутации типов 1/like и 2/like обнаружены у 18 (51,4 %) и 17 (48,6 %) пациентов соответственно. При сравнительном анализе полученных данных установлено, что в дебюте ЭТ пациенты с мутацией в гене JAK2 были значительно старше больных с мутациями гена CALR типа 2/like (медианы возраста 58 (24–81) и 39 (31–78) лет соответственно, р = 0,008) и пациентов с TN+ (медианы возраста 58 (24–81) и 48 (18–90) лет соответственно, р = 0,002). У больных с мутацией гена JAK2 уровень гемоглобина (Hb) превышал аналогичный показатель пациентов с мутациями CALR типа 1/like (медианы уровня Hb 147 (102–219) и 131 (117–161) г/л соответственно, р = 0,007) и с TN+ (медианы уровня Hb 147 (102–219) и 136 (93–176) г/л соответственно, р = 0,004). Содержание тромбоцитов у носи- телей мутации в гене JAK2 было значимо ниже чем у пациентов с мутациями CALR типа 2/like (медианы количества тромбоцитов 729 х 109/л (448-2074) и 1197 х 109/л (676-3766) соответственно, р = 0,000006). Межгрупповые различия по возрасту в дебюте заболевания и содержанию тромбоцитов обнаружены и при разных типах мутаций гена CALR. Те, у кого обнаружили мутации гена CALR типа 1/like, характеризовались более старшим возрастом в дебюте заболевания по сравнению с носителями мутаций типа 2/like (медианы возраста 63,5 (31–88) г. и 39 (31–78) лет соответственно, р = 0,008) и более низким содержанием тромбоцитов в периферической крови (медианы количества тромбоцитов 819 х 109/л (623-1727) и 1197 х 109/л (676–3766) соответственно, р = 0,01). Больные с тройным негативным статусом отличались от пациентов с мутациями гена CALR типа 1/like более ранним дебютом заболевания (медианы возраста 48 (18–90) лет и 63,5 (31–88) г. соответственно, р = 0,005), а от носителей мутаций типа 2/like более низким уровнем тромбоцитов (медианы количества тромбоцитов 838 х 109/л (457-1657) и 1197 х 109/л (676-3766) соответственно, р = 0,002).

Выводы . Частота выявления драйверных мутаций у больных ЭТ согласуется с результатами общемировых и российских исследований. Подтверждена ассоциация мутации V617F гена JAK2 с дебютом заболевания в пожилом возрасте и более высоким уровнем гемоглобина чем у носителей других драйверных мутаций. Пациенты с мутациями в гене CALR типа 2/like в сравнении со всеми исследуемыми группами имели наибольшее количество тромбоцитов. Установлено статистически значимое отличие больных по возрасту дебюта заболевания и содержания тромбоцитов в зависимости от типа выявленной мутации гена CALR .