Жизнеспособность и оплодотворяющая способность пыльцы различного срока хранения у линий-восстановителей фертильности рапса озимого в тепличных условиях

Автор: Бочкарева Э.Б., Сырова Ю.Д., Стрельников Е.А.

Журнал: Масличные культуры. Научно-технический бюллетень Всероссийского научно-исследовательского института масличных культур @vniimk

Рубрика: Селекция, семеноводство и биотехнология сельскохозяйственных растений

Статья в выпуске: 2 (194), 2023 года.

Бесплатный доступ

В целях ускорения селекционного процесса по созданию гибридов рапса озимого во ВНИИМК используется фитотронно-тепличный комплекс для получения дополнительных генераций растений. Была изучена жизнеспособность пыльцы и ее оплодотворяющая способность у девяти линий-восстановителей фертильности и четырех материнских ЦМС-линий с целью выявления оптимальных условий гибридизации в теплице, обеспечивающих получение максимально возможного количества семян. Было установлено, что пыльца только что распустившихся цветков у линий-восстановителей фертильности обладает высокой жизнеспособностью - на уровне 80-98 %. При хранении ее в темноте при комнатной температуре 22-24 °С в течение 24 ч теряет жизнеспособность в зависимости от генотипа в 2,0-2,5 раза. Однако такое значительное падение жизнеспособности пыльцы существенно не влияло на завязываемость плодов и семян. Гибриды от скрещивания с отцовскими линиями с жизнеспособностью суточной пыльцы от 15 до 52 % не имели значительных различий по завязываемости семян. Удовлетворительная завязываемость семян у гибридов наблюдалась при использовании пыльцы, хранившейся до пяти суток. При хранении пыльцы в течение десяти суток при температуре 22-24 °С семена в гибридных комбинациях не завязывались. Были обнаружены существенные различия по оплодотворяющей способности между изученными линиями-восстановителями фертильности. В этой связи данному признаку необходимо уделять внимание при создании коммерческих гибридов. Пониженная оплодотворяющая способность пыльцы конкретного восстановителя фертильности будет влиять на урожай гибридных семян на участках гибридизации.

Еще

Рапс озимый, линии-восстановители фертильности, жизнеспособность пыльцы, оплодотворяющая способность пыльцы, завязываемость стручков и семян

Короткий адрес: https://sciup.org/142238375

IDR: 142238375 | DOI: 10.25230/2412-608X-2023-2-194-20-27

Текст научной статьи Жизнеспособность и оплодотворяющая способность пыльцы различного срока хранения у линий-восстановителей фертильности рапса озимого в тепличных условиях

Введение. Мировой опыт показывает, что использование в сельскохозяйственном производстве гибридов рапса озимого позволяет значительно повысить урожайность этой культуры. Для получения гибридов в промышленных масштабах наиболее технологичным является использование цитоплазматической мужской стерильности (ЦМС) и генов восстановления фертильности. Во ВНИИМК программа создания отечественных гибридов рапса озимого осуществляется на базе Ogura ЦМС. Одним из основных факторов успешной работы как по селекции, так и по семеноводству гибридов рапса озимого является изучение биологии цветения и опыления. Прежде всего, это изучение физиологической активности рыльца пестика у растений материнских линий и качества пыльцы у отцовских форм. Для характеристики качества пыльцы используются три основных показателя: фертильность, жизнеспособность и оплодотворяющая способность. Фертильность пыльцы определяется процентом пыльцевых зерен с нормальным гаметофитом от общего числа пыльцевых зерен в пробе путем окрашивания. Жизнеспособность пыльцы измеряется процентом проросших пыльцевых зерен от общего их числа в пробе. Оплодотворяющую способность пыльцы показывает процент завязывания плодов и семян [1]. В практической селекцион- ной работе при проведении скрещиваний чаще всего используются показатели жизнеспособности пыльцы и ее оплодотворяющей способности [2; 3].

Пыльца представляет собой массу мельчайших зерен микроскопических размеров. Ее развитие происходит в пыльниках, которые состоят из четырех клеточных слоев: эпидермиса, эндотелия, среднего слоя и тапетума. Тапетум играет важную роль в поступлении питательных веществ к пыльцевым зернам и их развитии [4].

Зрелые пыльцевые зерна желтой окраски, удлиненно-эллиптические, с пористой сетчатообразной поверхностью (рис. 1) [2]. Их оболочка состоит из двух слоев: наружного – экзины и внутреннего – интины. Экзина представляет собой липидно-белковую матрицу, сформированную тапетумом, она защищает пыльцу от высыхания и участвует в адгезии и гидратации пыльцевых зерен во время опыления. Интина в своем составе содержит белки, сформировавшиеся позднее в самих пыльцевых зернах [5]. Общее количество пыльцевых зерен, образуемых одним цветком рапса, составляет 30–36 тыс. шт. размером 27,6–29,8 × 38,2– 41,5 мкм [6].

Рисунок 1 – Внешний вид пыльцевого зерна и его оболочки под электронным микроскопом. Увеличение: а – ×500;

б – ×1000. Изображение взято из статьи Zubkova T. [et al.] (2022) [7]

Раскрытие цветков рапса во время цветения обычно происходит рано утром (8– 9 ч) в зависимости от погодных условий. Цветки остаются открытыми до трех дней, ночью они частично могут закрываться и повторно открываться утром [8].

При наиболее благоприятной температуре для опыления 20 °С пыльцевые зерна начинают высвобождаться из микроспорангиев в состоянии физиологического покоя с замедленным метаболизмом [9]. При попадании пыльцы на рыльце пестика происходит регидрота-ция, которая сопровождается изменением формы и восстановлением объема пыльцевого зерна (гармомегатия). Гидратация начинается через 1–2 мин после осаждения пыльцы на рыльце пестика и продолжается в течение 30 мин, после чего жизнеспособные пыльцевые зерна начинают прорастать [10].

В оптимальных для культуры рапса условиях жизнеспособность пыльцы высокая. На уровень этого показателя влияют: генотип, факторы окружающей среды (влажность, температура) и количество питательных элементов в пыльцевом зерне (кислоты, сахара) [6].

Растения, испытывающие водный стресс во время цветения, характеризуются обезвоженными пыльцевыми зернами во время их созревания, данные факторы способствуют снижению жизнеспособности. Высокая влажность, напротив, влияет на повышение уровня содержания воды в вакуолях пыльцевых зерен, что благоприятствует быстрой потере жизнеспособности во время опыления и при последующем хранении пыльцы [11].

Высокая температура воздуха во время цветения – более 30 °С – способствует уменьшению растворимых углеводов. Они, в том числе сахароза, участвуют в водном гомеостазе, а также играют важную роль в повышении устойчивости пыльцы и пыльцевых трубок к неблагоприятным условиям и действуют как термозащита против теплового стресса [12].

Пыльца с высокой жизнеспособностью является залогом успеха селекционных работ как по созданию сортов, так и гибридов. Зачастую при проведении гибридизационных работ селекционеру необходимо сохранить пыльцу отцовских линий, у которых не совпадают сроки цветения с материнскими.

Многими учеными были проведены исследования по определению жизнеспособности пыльцы при разных условиях ее хранения. Как правило, успешное сохранение пыльцы наблюдается при низкой температуре с пониженной влажностью и отсутствием света, то есть при условиях, когда жизненные процессы максимально замедлены. В опытах Осиповой Г.М. пыльца рапса в стерильных условиях и при пониженной температуре сохранялась в течение года. При комнатной температуре пыльца хранилась 2–3 недели, но спустя 3–4 дня степень завязываемо-сти семян снижалась [13].

Лыгина Л.М. в своих исследованиях по горчице показывала, что при хранении пыльцы горчицы при температуре от 0 до 5 °С в начале происходило снижение оплодотворяющей способности, а через 30 дней этот показатель повышался. При хранении пыльцы при температуре 20– 25 °С без эксикатора на свету качество пыльцы снижалось на 3-й день, стручков завязывалось в 8 раз меньше, чем при опылении свежей пыльцой [1]. По результатам исследований Голубинского И.Н. у многих плодовых культур, а также у ячменя пыльца, взятая в момент раскрытия пыльников, имела несколько пониженную скорость прорастания пыльцевых трубок, но при хранении пыльцы в течение 1–2 дней данный показатель заметно повышался. Возможно, пыльца подобно семенам должна некоторое время «дозревать» [14].

Целью наших исследований было изучение жизнеспособности и оплодотворяющей способности пыльцы линий-восстановителей фертильности рапса озимого в зависимости от срока ее хранения для выполнения скрещиваний в тепличных условиях.

Материалы и методы . Исследования проводили в фитотронном тепличном комплексе ВНИИМК в 2021–2022 гг. Жизнеспособность пыльцы изучали у девяти линий-восстановителей фертильности рапса озимого: ОРК-4, ОРК-7, ОРК-9, ОРК-10,

ОРК-11, ОРК-13, ОРК-14, ОРК-18 и ОРК-20. Сбор пыльцы проводили с цветков, расположенных на центральной кисти.

Жизнеспособность пыльцы определяли по методике Транковского Б.А. путем подсчета количества проросших пыльцевых зерен на искусственной питательной среде. На предметное стекло наносили пипеткой несколько капель питательной среды, затем свежесобранную пыльцу при помощи пинцета равномерно распределяли по питательной среде. Предметное стекло с пыльцой помещали во влажную камеру чашки Петри, которая исключала подсыхание и изменение концентрации сахарного раствора. Чашки Петри помещали в термостат на сутки при температуре 25 °С для проращивания. Подсчет жизнеспособных и нежизнеспособных пыльцевых зерен проводили в 2-кратной повторности с использованием цифрового микроскопа Биолаб TS-2000 при 40-кратном увеличении в десяти полях зрения. Также определяли жизнеспособность пыльцы через 0,5; 4; 6 и 24 ч после ее сбора.

В опытах по изучению оплодотворяющей способности пыльцы использовали две материнские ЦМС-линии: ВН-14 и ВН-18, и три линии-восстановители фертильности: ОРК-9, ОРК-10, ОРК-14. В 2022 г. в опыты были включены еще две перспективные материнские ЦМС-линии ВН-4 и ВН-2. Пыльцу, собранную с опытных растений, подсушивали, хранили в стеклянном бюксе при комнатной температуре 22–24 °С в темноте. Для опыления материнских линий использовали пыльцу, хранившуюся: сутки, трое, пять и десять суток. В качестве контроля растения опыляли свежей пыльцой «спред-методом». На растениях материнских линий для каждого варианта опыления оставляли по 15 бутонов под изолятором из агро-спанбонда. По каждому варианту подсчитывали процент завязавшихся стручков и семян. Потенциальную продуктивность репродуктивных органов, т.е. число семязачатков в завязи цветка, учитывали по методике Федоренко Т.С. [15].

Результаты и обсуждение. Результаты исследований показали, что свежая пыльца в условиях ФТК имеет высокую жизнеспособность у всех изученных линий-восстановителей фертильности и составляет в среднем за два года от 80 до 98 %. По мере увеличения срока хранения данный показатель снижался по всем вариантам опыта (табл. 1).

Таблица 1

Жизнеспособность пыльцы разного срока хранения рапса озимого (%)

ФТК, ФГБНУ ФНЦ ВНИИМК, 2021–2022 г.

Линия	Срок хранения, час, по годам
	0,5			4			6			24
	8	8	ср.	8	8	ср.	8	8	ср.	8	8	ср.
ОРК-4	80	79	80	73	63	68	55	52	53	46	36	41
ОРК-7	86	88	87	75	80	77	60	62	61	45	25	35
ОРК-9	98	90	94	94	79	86	89	72	80	85	52	68
ОРК-10	90	91	91	87	86	87	65	43	54	37	32	34
ОРК-11	92	89	90	79	70	75	64	45	54	36	24	30
ОРК-13	97	99	98	84	62	73	65	46	55	52	20	36
ОРК-14	98	80	89	96	61	78	91	35	63	78	15	46
ОРК-18	91	92	92	88	77	82	57	47	52	45	33	39
ОРК-20	86	81	83	87	79	83	88	43	65	70	10	40
НСР 05	0,7	0,3	-	0,3	0,4	-	0,4	0,8	-	0,5	0,6	-

Пыльца линии ОРК-9 с жизнеспособностью свежей пыльцы 94 %, через 24 ч после хранения сохраняла наиболее высокие показатели этого признака – на уровне 68 % в среднем за 2 года (рис. 2).

Рисунок 2 – Проросшие пыльцевые зерна рапса озимого (ОРК-9): а – свежая пыльца, б – пыльцевые зерна через сутки, увеличение ×40 (ориг.)

Самый низкий показатель (30 %) был отмечен у линии ОРК-11, притом что жизнеспособность свежей пыльцы довольно высокая (90 %) (рис. 3).

Рисунок 3 – Проросшие пыльцевые зерна рапса озимого (ОРК-11): а – свежая пыльца, б – пыльцевые зерна через сутки, увеличение ×40 (ориг.)

Для изучения оплодотворяющей способности пыльцы были выбраны три линии, различающиеся по ее жизнеспособности после 24 ч хранения: ОРК-9 (85 % в 2021 г.; 52 % в 2022 г.), ОРК-14 (78 % в 2021 г.; 15 % в 2022 г.) и ОРК-10 (37 % в 2021 г.; 32 % в 2022 г.). Результаты исследований показали, что при опылении пыльцой, хранившейся в течение суток, в большинстве случаев не наблюдалось значительного снижения количества стручков и семян в стручке по сравнению с контрольным вариантом (табл. 2, 3). Так, в гибридных комбинациях с отцовской линией ОРК-10 с жизнеспособностью суточной пыльцы 37 % в 2021 г. завязываемость стручков составила 53,3 %, на кисти сформировалось восемь стручков, завязываемость плодов варьировала от 47,2 до 67,1 % в среднем, отмечалось от 13 до 17 семян в стручке.

В варианте, где в качестве отцовской линии была взята ОРК-14 с жизнеспособностью пыльцы 78 %, завязалось 60 % стручков и от 61,8 до 71,1 % семян. В гибридных комбинациях с использованием ОРК-9 (с жизнеспособностью суточной пыльцы 85 %) завязалось от 60,0 до 66,6 % стручков и от 15 до 21 семени в стручке (табл. 2, 3).

Таблица 2

Результативность опыления цветков

ЦМС-линий рапса озимого пыльцой разного срока хранения

ФТК, ФГБНУ ФНЦ ВНИИМК, 2021–2022 г.

Вариант	Комбинация скрещивания	Кол-во опыленных цветков, шт.	Завязалось стручков, шт.			Завязываемость стручков, %
Вариант	Комбинация скрещивания	Кол-во опыленных цветков, шт.	2021 г.	2022 г.	ср.	2021 г.	2022 г.	ср.
Свежая пыльца	ВН-14 × ОРК-9	15	7	5	6,0	46,6	33,3	39,9
	ВН-14 × ОРК-10	15	7	7	7,0	46,6	46,6	46,6
	ВН-14 × ОРК-14	15	7	6	6,5	46,6	40,0	43,3
	ВН-18 × ОРК-9	15	6	6	6	40,0	40,0	40,0
	ВН-18 × ОРК-10	15	6	7	6,5	40,0	46,6	43,3
	ВН-18 × ОРК-14	15	7	13	10,0	46,6	86,6	66,6
НСР 05			0,1	0,3	-	0,1	0,9	-
Суточная пыльца	ВН-14 × ОРК-9	15	10	7	8,5	66,6	46,6	56,6
	ВН-14 × ОРК-10	15	8	5	6,5	53,3	33,3	43,3
	ВН-14 × ОРК-14	15	9	3	6,1	60,0	20,0	40,0
	ВН-18 × ОРК-9	15	9	6	7,5	60,0	40,0	50,0
	ВН-18 × ОРК-10	15	8	8	8,0	53,3	53,3	53,3
	ВН-18 × ОРК-14	15	9	4	6,5	60,0	26,6	43,3
НСР 05			0,2	0,3	-	0,2	0,3	-
3-суточная пыльца	ВН-14 × ОРК-9	15	6	0	3,0	40,0	0	20,0
	ВН-14 × ОРК-10	15	6	0	3,0	40,0	0	20,0
	ВН-14 × ОРК-14	15	6	0	3,0	40,0	0	20,0
	ВН-18 × ОРК-9	15	7	3	5,0	46,6	20,0	33,3
	ВН-18 × ОРК-10	15	6	0	3,0	40,0	0	20,0
	ВН-18 × ОРК-14	15	6	0	3,0	40,0	0	20,0
НСР 05			0,1	-	-	0,1	-	-
5-суточная пыльца	ВН-14 × ОРК-9	15	4	0	2,0	26,6	0	13,3
	ВН-14 × ОРК-10	15	4	0	2,0	26,6	0	13,3
	ВН-14 × ОРК-14	15	5	0	2,5	33,3	0	16,6
	ВН-18 × ОРК-9	15	4	4	4,0	26,6	26,6	26,6
	ВН-18 × ОРК-10	15	4	0	2,0	26,6	0	13,3
	ВН-18 × ОРК-14	15	4	0	2,0	26,6	0	13,3
НСР 05			0,1	- - 0,1 - -

В 2022 г. жизнеспособность суточной пыльцы линий-восстановителей фертильности была ниже, чем в 2021 г., и составила 15 % у линии ОРК-14, 52 % у линии ОРК-9 и 32 % у ОРК-10 (табл. 1). Однако в гибридах от их скрещивания с материнской линией ВН-18 завязываемость семян была практически одинаковой – в пределах 47,2–61,8 %.

Таблица 3

Завязываемость семян ЦМС-линий рапса озимого в результате опыления пыльцой разного срока хранения

ФТК, ФГБНУ ФНЦ ВНИИМК, 2021–2022 г .

Вариант	Комбинация скрещивания	Число семязачатков, шт.	Колич в ст	ество семян ручке, шт.		Завязываемость семян, %
Вариант	Комбинация скрещивания	Число семязачатков, шт.	2021 г.	2022 г.	ср.	2021 г.	2022 г.	ср.
Свежая пыльца	ВН-14 × ОРК-9	25,3	18	15	16,5	71,1	59,2	65,1
	ВН-14 × ОРК-10	25,3	25	23	24,0	98,8	90,9	94,8
	ВН-14 × ОРК-14	25,3	22	9	15,5	86,9	35,5	61,2
	ВН-18 × ОРК-9	27,5	19	19	19,0	69,0	69,0	69,0
	ВН-18 × ОРК-10	27,5	24	23	23,5	87,2	83,6	85,4
	ВН-18 × ОРК-14	27,5	23	8	15,5	83,6	29,0	56,3
НСР 05			0,2	0,1	-	0,2	0,7	-
Суточная пыльца	ВН-14 × ОРК-9	25,3	21	7	14,0	83,0	27,6	55,3
	ВН-14 × ОРК-10	25,3	17	5	11,0	67,1	19,7	43,4
	ВН-14 × ОРК-14	25,3	18	3	10,5	71,1	11,8	41,4
	ВН-18 × ОРК-9	27,5	15	16	15,5	54,5	58,1	56,4
	ВН-18 × ОРК-10	27,5	13	13	13,0	47,2	47,2	47,2
	ВН-18 × ОРК-14	27,5	17	15	16,0	61,8	54,5	58,1
НСР 05			0,8	0,9	-	0,3	0,8	-
3-суточная пыльца	ВН-14 × ОРК-9	25,3	5	0	2,5	19,7	0	9,8
	ВН-14 × ОРК-10	25,3	13	0	6,5	51,3	0	25,6
	ВН-14 × ОРК-14	25,3	14	0	7,0	55,3	0	27,6
	ВН-18 × ОРК-9	27,5	7	3	5,0	25,4	10,9	18,1
	ВН-18 × ОРК-10	27,5	13	0	6,5	47,2	0	23,6
	ВН-18 × ОРК-14	27,5	14	0	7,0	50,9	0	25,4
НСР 05			0,3	-	-	0,4	-	-
5-суточная пыльца	ВН-14 × ОРК-9	25,3	7	0	3,5	27,6	0	13,8
	ВН-14 × ОРК-10	25,3	8	0	4,0	31,6	0	15,8
	ВН-14 × ОРК-14	25,3	9	0	5,0	35,5	0	17,7
	ВН-18 × ОРК-9	27,5	10	2	6,0	36,3	7,2	21,7
	ВН-18 × ОРК-10	27,5	10	0	5,0	36,3	0	18,1
	ВН-18 × ОРК-14	27,5	8	0	4,0	29,0	0	14,5
НСР 05			0,2	-	-	0,2	-	-

Последовательное снижение количества как стручков, так и семян в стручке наблюдается в вариантах опыления материнских ЦМС-линий пыльцой, хранившейся в течение трех и пяти суток. При этом значительные различия по количеству стручков на растении и семян в стручке также обнаружены по годам исследований и по комбинациям скрещива- ния. В 2021 г. стручки и семена завязались как при опылении 3-суточной, так и 5-суточной пыльцой. Максимальная завя-зываемость семян отмечена в комбинациях с отцовскими линиями ОРК-10 и ОРК-14 при опылении пыльцой, хранившейся трое суток, – 47,2 и 50,9 % соответственно. В 2022 г. в вариантах опыления материнских ЦМС-линий ВН-14 и ВН-18 пыльцой разного срока хранения (3 и 5 суток) стручки и семена завязались только у одного гибрида – ВН-18 × ОРК-9. При опылении пыльцой, хранившейся в течение 10 суток, стручки и семена не завязались.

В 2022 г. были получены аналогичные данные по опылению суточной пыльцой в комбинациях от скрещивания изучаемых отцовских линий с материнской ЦМС-ли-нией ВН-2. У всех гибридов завязывае-мость плодов составила от 46,6 до 53,3 %, что соответствует 7–8 стручкам на кисти (табл. 4).

Таблица 4

Результативность опыления ЦМС-линий рапса озимого пыльцой с разным сроком хранения

ФТК, ФГБНУ ФНЦ ВНИИМК, 2022 г.

Вариант	Комбинация скрещивания	Количество опыленных цветков, шт.	Количество стручков на кисти, шт.	Завя-зывае-мость стручков, %
Свежая пыльца	ВН-2 × ОРК-9	15	15	100
	ВН-2 × ОРК-10	15	14	93,3
	ВН-2 × ОРК-14	15	6	40,0
	ВН-4 × ОРК-9	15	11	73,3
	ВН-4 × ОРК-10	15	10	66,6
	ВН-4 × ОРК-14	15	6	40,0
НСР 05			0,6	0,6
Суточная пыльца	ВН-2 × ОРК-9	15	8	53,3
	ВН-2 × ОРК-10	15	7	46,6
	ВН-2 ×ОРК-14	15	7	46,6
	ВН-4 × ОРК-9	15	6	40,0
	ВН-4 × ОРК-10	15	8	53,3
	ВН-4 × ОРК-14	15	3	20,0
НСР 05			0,8	0,2
3-суточная пыльца	ВН-2 × ОРК-9	15	0	0
	ВН-2 × ОРК-10	15	0	0
	ВН-2 × ОРК-14	15	6	40,0
	ВН-4 × ОРК-9	15	0	0
	ВН-4 × ОРК-10	15	3	20,0
	ВН-4 × ОРК-14	15	0	0

При скрещивании с материнской ЦМС-линией ВН-4 только в одной комбинации с отцовским компонентом ОРК-10 завязалось 8 стручков (53,3 %). В остальных вариантах гибриды с отцовскими линиями ОРК-9 и ОРК-14 значительно уступали в степени завязываемости стручков. Этот показатель составлял от 40 до 20 %. В 2022 г. при опылении 3-су-точной пыльцой материнских ЦМС-ли-ний ВН-2 и ВН-4 стручки завязались только в двух комбинациях: ВН-2 × ОРК-14 и ВН-4 × ОРК-10. При опылении 5-суточной пыльцой ни в одной гибридной комбинации стручки не завязались.

Высокие показатели завязываемости семян – от 56,6 до 98,1 %, были получены во всех комбинациях при опылении свежей пыльцой спред-методом материнских линий ВН-2 и ВН-4 (табл. 5).

Таблица 5

Завязываемость семян ЦМС-линий рапса озимого в результате опыления разновозрастной пыльцой

ФТК, ФГБНУ ФНЦ ВНИИМК, 2022 г.

Вариант	Комбинация скрещивания	Число семязачатков, шт.	Кол-во семян в стручке, шт.	Завя-зывае-мость семян, %
Свежая пыльца	ВН-2 × ОРК-9	26,5	26	98,1
	ВН-2 × ОРК-10	26,5	23	86,7
	ВН-2 × ОРК-14	26,5	15	56,6
	ВН-4 × ОРК-9	28,5	26	91,2
	ВН-4 × ОРК-10	28,5	23	80,7
	ВН-4 × ОРК-14	28,5	20	70,1
НСР 05			0,6	0,2
Суточная пыльца	ВН-2 × ОРК-9	26,5	22	83,0
	ВН-2 × ОРК-10	26,5	21	79,2
	ВН-2 ×ОРК-14	26,5	19	71,6
	ВН-4 × ОРК-9	28,5	12	45,2
	ВН-4 × ОРК-10	28,5	20	75,4
	ВН-4 × ОРК-14	28,5	6	22,6
НСР 05			0,8	0,4
3-суточная пыльца	ВН-2 × ОРК-9	26,5	0	0
	ВН-2 × ОРК-10	26,5	0	0
	ВН-2 × ОРК-14	26,5	10	37,7
	ВН-4 × ОРК-9	28,5	0	0
	ВН-4 × ОРК-10	28,5	2	7,5
	ВН-4 × ОРК-14	28,5	0	0

При опылении пыльцой, хранившейся 24 ч, мы наблюдали снижение завязывае-мости семян, например, у комбинации ВН-4 × ОРК-14 она понизилась в 3 раза и составила 22,6 %. Но в варианте опыления материнской линии ВН-2 суточной пыльцой ОРК-14 отмечалось большее количество семян в стручке по сравнению с опылением спред-методом. В данной комбинации с 3-суточной пыльцой завя-зываемость составила 37,7 %.

Полученные данные свидетельствуют о том, что высокая жизнеспособность пыльцы не является обязательным условием ее высокой оплодотворяющей способности. В исследованиях Лыгиной [1] опыление пыльцой с жизнеспособностью, близкой к 100 %, и жизнеспособностью 10–30 % у горчицы сарептской показало одинаковые результаты. По ее мнению, для практической работы важно определить нижний предел жизнеспособности пыльцы культуры. По результатам наших исследований можно предположить, что нижний предел жизнеспособности пыльцы рапса озимого для получения достаточного количества гибридных семян составляет 15–30 %. Так же мы наблюдали, что завязываемость стручков и семян в гибридных комбинациях зависит и от особенностей взаимовлияния компонентов скрещивания. В 2022 г. на качество пыльцы отцовских линий могли повлиять многочисленные обработки растений ядохимикатами против тли. Этот вопрос требует дальнейшего изучения.

Анализируя полученные результаты, можно сделать следующие выводы:

1. Пыльца с только что распустившихся цветков у линий-восстановителей фертильности рапса озимого в условиях фитотрона обладала высокой жизнеспособностью – от 80 до 98 %.
2. При хранении ее в течение суток в темноте при комнатной температуре пыльца теряла жизнеспособность в зависимости от генотипа в 2,0–2,5 раза.
3. Жизнеспособность пыльцы отцовских линий, хранившейся в течение суток, практически не влияла на ее оплодотворяющую способность, количество стручков и семян в стручке у гибридов при использовании отцовских линий с жизнеспособностью пыльцы 15 %, 32 и 52 % не имело значительных различий.
4. Завязываемость стручков и семян при гибридизации в условиях фитотрона зависит также от взаимовлияния родительских компонентов.

Заключение. Экстраполируя полученные данные в условиях фитотронно-тепличного комплекса на условия открытого грунта, можно предположить, что обнаруженные различия в оплодотворяющей способности различных линий-восстановителей фертильности дают основание учитывать этот фактор при проведении гибридизации. Например, при неблагоприятных погодных условиях (дождь, понижение температуры) в практической селекционной работе возможно использование пыльцы, хранившейся при комнатной температуре в течение трех суток.

Статья научная