Диагностика эймериоза крупного рогатого скота

Введение. Распространение протозойного заболевания, такого как эймериоз крупного рогатого скота, в течение прошедших 5 лет значительно увеличилось, а поскольку оно протекает не только в острой, подострой, но и хронической формах, было принято решение изучить глубже причину его возникновения, а также выявить наиболее доступный и эффективный метод диагностики [1–6].

Возбудителем заболевания являются простейшие, относящиеся к подклассу Coccidia, семейству Eimeriidae. Согласно литературным источникам, в семейство Eimeriidae включены и описаны 22 рода простейших. Локализация дан- ных паразитов чаще обнаруживается в кишечнике, тем самым провоцируя воспаление слизистой оболочки и расстройство пищеварения, что проявляется диареей и может вызывать впоследствии гибель животного [7–11].

Диагностика эймериоза крупного рогатого скота берет свое начало в 30-е гг. XX в. Тогда уже было установлено, что передача возбудителя осуществляется алиментарным путем во время контакта здоровых животных с инвазиро-ванными, а также при заражении окружающих предметов, к которым имеет доступ крупный рогатый скот. Кроме того, скученное содержание животных, несоблюдение зоогигиенических правил содержания и кормления животных, отсутствие регулярных мероприятий по профилактике заболеваний (вакцинация, дезинфекция, дезинсекция, дератизация), допущение на территорию фермы бесхозных животных и посторонних лиц – все это является предрасполагающими факторами к возникновению заболевания [12–17].

Чаще всего острому течению заболевания подвержены животные возрастом от 3–5 недель до года, тогда как у взрослых оно протекает хронически [18–22].

Цель исследования – провести сравнительный анализ двух методов диагностики эй-мериоза крупного рогатого скота и выделить наиболее доступный и эффективный из них.

Задачи: установить сезонную динамику заболевания крупного рогатого скота эймериозом; провести сравнительный анализ двух методов диагностики эймериоза крупного рогатого скота и установить наиболее доступный и эффективный из них.

Материалы и методы. По данным анализа эпизоотической ситуации на территории учебноопытного хозяйства МТФ № 3 «Кубань» по инвазионным болезням было установлено, что распространение эймериоза составило 21 %. По данным амбулаторных журналов максимальная зараженность телят и взрослых животных за последние 4 года отмечается в весенний и осенний периоды, тогда как зимой и весной данный показатель составляет лишь 10–15 %. (табл. 1).

Таблица 1

Сезонная динамика экстенсивности инвазии крупного рогатого скота эймериозом, % от общего поголовья

Сезон	Возраст
	1–2 мес.	2–4 мес.	4–6 мес.	1 год и более
Зима	10	11	14	10
Весна	12	22	31	11
Лето	11	14	13	12
осень	13	24	33	10

Область исследования и размер выборки . Для проведения практической части исследования были отобраны пробы фекалий от 215 животных. Исследование было решено проводить на базе кафедры паразитологии, ветеринарносанитарной экспертизы и зоогигиены ФГБОУ Кубанского ГАУ (г. Краснодар).

Размер выборки (n = 215) был рассчитан с использованием ожидаемой распространенности Eimeria spp., которая приблизительно составляет 60 %.

Молодняк и телята были отобраны и распределены по трем возрастным группам: ≥ 1–2, 2–4 и 4–6 месяцев (с наличием клинических признаков кокцидиоза или без них). Телята, дегель-минтизированные за 15 дней до взятия пробы, были исключены из исследования.

Был проведен общий клинический осмотр, в ходе которого учитывали общее состояние, аппетит, активность, наличие жвачки, диареи, рвоты, кахексии, дегидратации, качество стула и наличие визуально различимых посторонних примесей в нем. Проведена поголовная термометрия.

Непосредственно из прямой кишки исследуемых животных для проведения паразитологических исследований были отобраны фекалии массой 15 г. Фекалии были идентифицированы по номеру и кличке, возрасту и полу, и доставлены в герметичном контейнере при температуре около 10 °С на кафедру, где проводилась исследовательская работа. Пробы до их непосредственного исследования хранились герметично в холодильнике при температуре 4 °С.

Результаты и и их обсуждение. Лабораторные исследования проводили при помощи методов Макмастера и Флюллеборна:

• 1.    Методика Макмастера для определения количества фекальных ооцист на 1 г кала (О/г к.). Положительные образцы ≥ 500 О/г к. подвергали процессу споруляции с использованием 2,5 % дихромата калия в чашках Петри и инкубировали при комнатной температуре с последующей оксигенацией образцов каждые 24 ч в течение десяти дней. Ооцисты выделяли флотацией в растворе сахара (удельный вес 1,27), центрифугировали и проводили микро-

• скопию с помощью оптического микроскопа с использованием Velab VE-87 с увеличением в 1 000 раз.

• 2.    Метод Фюллеборна . Пробы фекалий (по 3 г от каждой пробы) помещали в отдельные стерильные тары, к ним добавляли флотационную жидкость в размере 20 мл, перемешивали для создания однородной массы, после чего добавляли еще 80 мл раствора. Полученные взвеси процеживали через марлю (в 1 слой) в сухие стерильные стаканы. В таком виде взвеси оставляли на 50 мин при комнатной температу-

• ре для отстаивания, после чего образовавшиеся поверхностные пленки снимали при помощи петель и переносили их на предметные стекла для последующего микроскопирования.

Идентификация была проведена в соответствии с фенотипическими характеристиками спорулированных ооцист в соответствии с определителем Крылова (рис.).

По результатам проведенных исследований было установлено 72 инвазированных эйме-риями животных (табл. 3).

Таблица 2

Морфология обнаруженных ооцист эймерий

Вид	Морфология ооцисты	Размер ооцисты, мкм
E. bovis	Яйцевидная или субсферическая, бесцветная и гладкая стенка с незаметными микропилями, без полярных гранул	28 × 20
E. zuernii	Субсферический, бесцветный, без микропиль	18 × 16
E. ellipsoidalis	Эллипсоидальная или слегка яйцевидная, бесцветная, без видимых микропиль, полярных гранул	23 × 16

Изображения спорулированных ооцист вида Eimeria, полученные с помощью оптического микроскопа (увеличение 1000 раз): A – E. Bovis; B – E. Zuernii; H – E. Ellipsoidalis, согласно определителю Крылова

Таблица 3

Инвазированность эймериями крупного рогатого скота по возрастным группам (М)

Возрастная группа	Инвазированные животные, гол.
1–2 мес.	16
2–4 мес.	19
4–6 мес.	24
1 год и более	13

Экстенсивность инвазии подсчитывалась по следующей формуле:

Эинв = число инвазированных Eimeria / общее число животных выборки · 100 %.

Э инв = 72/215·100 % = 33 %.

Заключение. Было установлено, что наибольший процент заболевания крупного рогатого скота эймериозом наблюдается весной и осенью, тогда как зимой и летом он значительно снижен. Чаще заболевание диагностируется у телят возрастом 4–6 месяцев, тогда как крупный рогатый скот от года и старше подвержен данному заболеванию значительно меньше.

При проведении лабораторных исследований проб фекалий было определено, что метод Макмастера является более эффективным в связи с точным определением количества фекальных ооцист в стадии споруляции. Однако наиболее доступным методом остается метод Фюллеборна ввиду меньшей трудоемкости и быстроты проведения. В связи с этим было решено рекомендовать метод Макмастера как наиболее надежный и точный метод, а метод Фюллеборна – в качестве способа быстрого определения наличия инвазии в хозяйстве.