Диагностика микоплазмоза и сальмонеллеза у птиц методом полимеразной цепной реакции

Annotation: the method of polymerase chain reaction in DNA samples isolated from the biomaterial from clinically sick birds was able to identify two carriers of Mycoplasma gallisepticum and Salmonella. Data was presented to veterinary specialist of the farm to take measures to prevent the spread of these infections.

Винастоящееивремятвесьма актуальной проблемой является высокий отход сельскохозяйственной птицы вследствие инфекционных болезней [1]. Данная проблема наносит огромный ущерб в экономическом плане, поэтому ее необходимо устранять. Респираторный микоплазмоз - инфекционная болезнь у кур, поражающая органы дыхания. Возбудитель заболевания — Mycoplasma gallisepticum , представляет собой промежуточную форму между бактериями и вирусами. Бактерия легко проникает в дыхательные пути птицы, а затем поражает ткани и репродуктивную систему [2]. Сальмонеллез птиц — инфекционная болезнь, которая проявляется поражением желудочнокишечного тракта и септицемией, а при подостром и хроническом течении сопровождается пневмонией и артритами. Сальмонеллы относятся к семейству энтеробактерий ( Enterobacteriaceae ), роду сальмонелл ( Salmonella ). Возбудители сальмонеллеза — это мелкие, прямые, с закругленными концами грамотрицательные палочки, спор и капсул не образуют, подвижные (исключение S. gallinorum-pullorum ), факультативные анаэробы.

Единственный способ сократить заболеваемость, это вовремя выявить возбудителя и саму болезнь. Одним из современных способов для выявления патогенов является ПЦР (полимеразная цепная реакция) - это экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определенных фрагментов нуклеиновой кислоты в биологическом материале [3; 4]. Этот способ весьма удобен в использовании, экономичен и занимает мало времени. В ряде исследований показана высокая чувствительность метода, позволяющая выявить в биоматериале всего 10 микробных клеток.

Именно этот метод и был использован в выявлении Mycoplasma gallisepticum и Salmonella у птиц в одной из птицефабрик России. Для их детекции были использованы образцы печени птиц и специальные диагностические наборы для ПЦР фирмы «Интерлабсервис» (Россия).

После проведения реакции было выявлено, что у клинически больных птиц под номерами 5 и 6 обнаружен Mycoplasma gallisepticum (Рис. 1.) . У этих же птиц было выявлено носительство сальмонелл (Рис. 2.). Результаты анализа были отправлены ветеринарным специалистам хозяйства. Благодаря данному исследованию в птичниках были устранены носители данного заболевания.

Рис. 1. Mycoplasma gallisepticum в биоматериале птиц. Дорожки 5 и 6 – носители микоплазмы, дорожка 11 – положительный контроль, дорожка 13 – маркер молекулярных масс фрагментов ДНК.

Рис. 2. Salmonella в биоматер и але птиц. Дорожки 5 и 6 – носители микоплазмы, дорожка 11 – положительный контроль, 12 – отрицательный контроль, дорожка 13 – маркер молекулярных масс фрагментов ДНК