Динамика маркеров воспаления и окислительного стресса при консервативном лечении открытой формы пиометры у собак

Введение. Пиометра представляет собой распространенное и серьезное заболевание репродуктивной системы, наносящее значительный ущерб здоровью животных. Помимо прямой угрозы для животного, открытая форма пиометры, сопровождающаяся выделением патогенного экссудата, который создает дополни- тельные эпидемиологические риски, особенно в условиях скученного содержания животных [1,2].

В физиологических условиях метаболизм кислорода приводит к генерации активных форм кислорода (АФК), включая радикалы, такие как супероксид-анион и гидроксильный радикал, а также нерадикальные производные, например, перекись водорода [3]. В умеренных концентрациях АФК выполняют роль важных сигнальных молекул в клеточных процессах. В частности перекись водорода выступает в качестве ключевого посредника в окислительно-восстановительной сигнализации, опосредуя сигнальные пути факторов роста и влияя на жизненно важные клеточные функции [4].

Живые организмы поддерживают динамическое равновесие между окислительным стрессом и антиоксидантными защитными механизмами [5]. Антиоксидантная система включает ферментативные и неферментативные компоненты, регулирующие поток АФК и предотвращающие повреждение клеток. Ключевыми ферментативными компонентами являются суперок-сиддисмутаза (СОД), каталаза, восстанавливающая перекись водорода, а также ферменты, связанные с метаболизмом глутатиона. Преобразование перекиси водорода в воду и кислород происходит благодаря синергетической активности этих систем. Окислительный стресс возникает, когда образование АФК начинает существенно превышать возможности антиоксидантной защиты, что свидетельствует о дисбалансе между про- и антиоксидантами и лежит в основе многих патологических состояний [6].

Циклические изменения в эндометрии организма самок, регулируемые половыми стероидами, сопровождаются вариабельной экспрессией антиоксидантов. Активные формы кислорода играют критическую роль в репродуктивной биологии, модулируя маточную среду. При патологических состояниях, таких как эндометриоз, повышенный окислительный стресс может способствовать патологическим изменениям [7]. Избыток АФК способен нарушать раннее эмбриональное развитие и влиять на рецептив-ность эндометрия, нарушая баланс медиаторов, необходимых для имплантации Коэнзим [8].

У собак уникальный моноэструсный цикл с продолжительной лютеиновой фазой (диэст-русом) независимо от наличия беременности. Эти характерные особенности, в частности длительное воздействие прогестерона на эндомет- рий, повышают восприимчивость к специфическим заболеваниям, таким как кистозная гиперплазия эндометрия и пиометра [9].

Механизмы того, как антиоксидантные ферменты координируют свою активность для поддержания гомеостаза эндометрия у собак, до конца не изучены, и исследование в данной области является актуальным.

Цель исследования - провести сравнительный анализ эффективности монотерапии аглепристоном и комбинированной терапии аг-лепристоном с клопростенолом в коррекции системного воспаления и оксидативного стресса у собак с открытой формой пиометры на основании динамики комплекса биохимических маркеров.

Задачи: оценить исходные показатели продуктов воспаления и оксидативного стресса у собак с открытой формы пиометры для сопоставимости групп; изучить динамику маркеров антиоксидантной защиты и перекисного окисления липидов при разных схемах терапии; провести сравнительный анализ скорости снижения белков острой фазы и щелочной фосфотазы на фоне монотерапии аглепристоном и его комбинации с клопростенолом; оценить восстановление белково-синтетической функции печени (общий белок, альбумин, АЛТ) к 8-му дню лечения; определить наиболее эффективную схему консервативной терапии открытой формы пио-метры у собак.

Материалы и методы. Диагноз «пиометра с открытой шейкой матки» был установлен всем животным на основании совокупности клинических признаков (гнойные или кровянистые выделения из влагалища, вялость, анорексия, угнетение, дегидратация), данных физикального осмотра, результатов лабораторных анализов и ультразвукового исследования. При УЗИ оценивали характер внутриматочного содержимого, отмечая высокую васкуляризацию эндометрия, усиление маточного кровотока и снижение резистентности маточных артерий. Критериями исключения из исследования служили наличие тяжелых системных заболеваний (дисфункция почек или печени, сепсис, перитонит) либо закрытая форма пиометры.

Животные были рандомизированы на две экспериментальные группы. Первая группа (n = 6) получала монотерапию аглепристоном (Ализин®, Virbac) в дозе 10 мг/кг подкожно на 1-й, 2-й и 8-й дни. Вторая группа (n = 6) получа- ла комбинированную терапию: аглепристон по аналогичной схеме с дополнительным введением клопростенола (Ovolute®) внутримышечно в дозе 1 мкг/кг с 1-го по 7-й день. Все животные содержались в условиях стационара, им проводилась поддерживающая инфузионная терапия (0,9 % раствор натрия хлорида) и антимикробная терапия энрофлоксацином и метронидазолом. На 9-й день всем сукам была выполнена овариогистерэктомия.

Образцы крови для анализов отбирали в установленные моменты времени (дни 1-й, 4-й, 6-й, 8-й). Биохимические показатели (аланинаминотрансфераза, щелочная фосфатаза, общий белок, альбумин) определяли на автоматическом биохимическом анализаторе с использованием коммерческих наборов. Уровни белков острой фазы (С-реактивный белок, гаптоглобин, сывороточный амилоид А) измеряли с использованием коммерческих наборов для сэндвич-иммуноферментного анализа (ИФА) на микропланшетном ридере в соответствии с инструкциями производителя.

Для оценки окислительно-восстановительного статуса в плазме определяли активность ключевых антиоксидантных ферментов. Активность супероксиддисмутазы (СОД) определяли спектрофотометрически по методу Флохе и Оттинга при длине волны 550 нм, а активность глутатионпероксидазы (ГПх) – при 340 нм. Концентрацию восстановленного глутатиона (GSH) определяли спектрофотометрически при 412 нм с использованием 5,5′-дитио-бис-(2-нитробен-зойной) кислоты, с валидацией метода и построением калибровочной кривой. Уровень перекисного окисления липидов оценивали по количеству веществ, реагирующих с тиобарбиту-ровой кислотой, спектрофотометрически при 532 нм. Окисление белков определяли по содержанию карбонильных групп спектрофотометрическим методом при 380 нм по модифицированному протоколу Левина и др. Концентрацию малонового диальдегида определяли тио-барбитуровым методом, а диеновых конъюгатов – спектрофотометрическим методом. Антиоксидантную обеспеченность также оценивали по активности каталазы в сыворотке крови и гомогенате тканей.

Полученные цифровые данные подвергали статистической обработке с вычислением критерия Стьюдента с использованием программы MS Excel.

Результаты и их обсуждение. На рисунке 1 представлена динамика уровня диеновых конъюгатов в сыворотке крови у собак с пио-метрой в процессе медикаментозной терапии в сравнении с контрольной группой здоровых животных.

Рис. 1. Динамика уровня диеновых коньюгатов в сыворотке крови у собак с пиометрой на фоне медикаментозной терапии, мкмоль/мл Dynamics of the level of diene conjugates in the blood serum of dogs with pyometra during drug therapy, μmol/ml

Анализ данных рисунка 1 показывает выраженные различия в динамике уровня диеновых конъюгатов между контрольной группой здоровых собак и животными с пиометрой, получавшими медикаментозную терапию.

В контрольной группе показатель оставался стабильно низким на протяжении всех восьми дней наблюдения, колеблясь в узком диапазоне от (1,12 ± 0,11) до (1,2 ± 0,10) мкмоль/мл, со средним значением около 1,16 мкмоль/мл. Эта стабильность подтверждает отсутствие существенного окислительного стресса у здоровых животных.

В 1-й группе (монотерапия аглепристоном) исходный уровень диеновых конъюгатов был в 2 раза выше ((2,24 ± 0,16) мкмоль/мл), чем в контроле ((1,13 ± 0,06) мкмоль/мл). Пик окислительного стресса был зафиксирован на 2-й день, когда значение достигло (2,56 ± 0,19) мкмоль/мл, что превышало контрольный уровень в тот же день более чем на 1,1 раза. В последующие дни наблюдалась тенденция к постепенному снижению показателя. Однако к 8-му дню терапии уровень диеновых конъюгатов ((1,54 ± 0,13) мкмоль/мл) все еще оставался на 33 % выше, чем в контрольной группе ((1,16 ± 0,19) мкмоль/мл).

Во 2-й группе (комбинированная терапия) отмечался наиболее высокий исходный уровень маркера – (3,0 ± 0,21) мкмоль/мл на 1-й день, что почти в 3 раза превышало контрольные значения. Максимальное значение было зафиксировано на 2-й день – (3,01 ± 0,19) мкмоль/мл.

Однако уже с 3-го дня в этой группе началось более интенсивное снижение показателя по сравнению с 1-й группой. К 5-му дню уровень диеновых конъюгатов во 2-й группе ((2,15 ± 0,27) мкмоль/мл) впервые стал ниже, чем в 1-й группе в тот же день ((2,14 ± 0,20) мкмоль/мл), а к 8-му дню достиг значения (1,62 ± 0,17) мкмоль/мл. Хотя этот результат все еще превышал контроль на 40 %, он оказался лишь на 5 % выше, чем в 1-й группе к концу лечения (1,54 мкмоль/мл).

Сравнительная динамика свидетельствует, что оба протокола лечения способствовали снижению окислительного стресса. Однако комбинированная терапия показала более эффективную динамику коррекции, несмотря на более высокие исходные показатели, разница между группами к концу курса лечения составила всего 0,08 мкмоль/мл. Важно отметить, что к 8-му дню уровень диеновых конъюгатов в группе комбинированной терапии снизился почти вдвое (на 46 %) по сравнению с пиковым значением на 2-й день, в то время как в группе монотерапии снижение составило около 40 %. Это позволяет сделать вывод о более выраженной антиоксидантной эффективности комбинированного лечения, направленного на купирование окислительного стресса при пиометре у собак.

Анализ данных по уровню малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови демонстрирует динамику окислительного стресса у собак с пиометрой на фоне двух протоколов медикаментозной терапии (рис. 2).

Рис. 2. Динамика концентрации малонового диальдегида в сыворотке крови собак с пиометрой на фоне различных схем лечения, мкмоль/мл

Dynamics of malondialdehyde concentration in the blood serum of dogs with pyometra against the background of various treatment regimens, μmol/ml

В контрольной группе здоровых животных концентрация МДА оставалась стабильно низкой и практически неизменной на протяжении всего периода наблюдения, варьируя в диапазоне от (2,12 ± 0,13) до (2,41 ± 0,19) мкмоль/мл. Это указывает на физиологический, сбалансированный уровень перекисного окисления липидов.

В 1-й группе (монотерапия аглепристоном) исходный уровень МДА на 1-й день был повышен до (3,58 ± 0,26) мкмоль/мл, что на 52 % выше, чем в контроле ((2,36 ± 0,23) мкмоль/мл). В течение курса лечения наблюдалось постепенное снижение показателя. Однако даже к 8-му дню значение МДА ((2,69 ± 0,18) мкмоль/мл) оставалось на 19 % выше контрольного уровня (2,26 ± 0,16) мкмоль/мл, что свидетельствует о сохранении умеренного окислительного стресса.

Во 2-й группе (комбинированная терапия) зафиксирован самый высокий исходный уровень МДА, составивший (4,14 ± 0,33) мкмоль/мл на 1-й день, что на 75 % превышало контроль. Пик концентрации отмечен на 2-й день ((4,21 ± 0,28) мкмоль/мл). При этом с 4-го дня в данной группе началось более активное снижение показателя по сравнению с 1-й группой. Так, к 8-му дню уровень МДА упал до (3,0 ± 0,21) мкмоль/мл, что на 33 % ниже пикового значения. Хотя этот показатель все еще был на 33 % выше контроля, разница с результатом 1-й группы к концу лечения сократилась до (0,31 ± 19) мкмоль/мл (см. рис. 2).

Сравнивая эффективность терапий, можно отметить, что оба протокола способствовали снижению концентрации МДА. Однако комбинированная терапия, несмотря на изначально более тяжелый окислительный стресс, обеспечила более выраженную положительную динамику. Абсолютное снижение уровня МДА с 1-го по 8-й день в этой группе составило 1,14 мкмоль/мл (или 28 %), в то время как в группе монотерапии – 0,89 мкмоль/мл (или 25 %).

Таким образом, лечение, сочетающее агле-пристон и простагландин, продемонстрировало более высокую эффективность в коррекции перекисного окисления липидов, оцениваемого по уровню малонового диальдегида.

Анализ динамики активности фермента каталазы в сыворотке крови позволяет оценить состояние антиоксидантной защиты у собак с пио-метрой на фоне проводимой терапии (рис. 3).

Рис. 3. Динамика активности каталазы в сыворотке крови у собак с пиометрой в ходе консервативного лечения, мкмоль/мл Dynamics of catalase activity in the blood serum of dogs with pyometra during conservative treatment, μmol/ml

В контрольной группе здоровых животных активность каталазы оставалась стабильной на протяжении всего периода наблюдения, колеблясь в узком диапазоне от (3,47 ± 0,31) до (3,89 ± 0,19) мкмоль/мл, что отражает нормаль- ный физиологический уровень ферментативной антиоксидантной защиты.

В 1-й группе (монотерапия аглепристоном) исходная активность каталазы на 1-й день была значительно повышена и составляла 6,12 мкмоль/мл, что на 68 % превышало кон- трольный показатель ((3,65 ± 0,27) мкмоль/мл). Такое повышение можно рассматривать как компенсаторную реакцию организма на выраженный окислительный стресс. В последующие дни активность фермента постепенно снижалась, но к 8-му дню ее уровень ((4,15 ± 0,31) мкмоль/мл) все еще оставался на 18 % выше, чем в контроле ((3,51 ± 0,13) мкмоль/мл).

Во 2-й группе (комбинированная терапия) также отмечалась высокая исходная активность каталазы ((6,33 ± 0,49) мкмоль/мл на 1-й день), превышающая контроль на 73 %. Однако уже на 2-й день наблюдалось резкое снижение показателя до (4,21 ± 0,33) мкмоль/мл. В дальнейшем активность каталазы продолжала плавно снижаться, достигнув к 8-му дню значения (93,54 ± 0,21) мкмоль/мл, что практически соответствовало уровню контрольной группы ((3,51 ± 0,25) мкмоль/мл) и было на 15 % ниже, чем в 1-й группе в этот же день.

Сравнительный анализ динамики показывает, что на фоне лечения активность каталазы снижалась в обеих группах, что отражает уменьшение окислительной нагрузки и постепенную нормализацию антиоксидантного стату- са. При этом комбинированная терапия обеспечила более быструю и полную нормализацию показателя: активность каталазы вернулась к контрольным значениям к концу курса лечения. В то же время в группе монотерапии активность фермента оставалась повышенной. Это может указывать на более высокую эффективность комбинированного протокола в устранении окислительного стресса и восстановлении баланса в антиоксидантной системе у собак с пиометрой.

При гнойно-воспалительных процессах, таких как пиометра, массивное образование АФК нейтрофилами и другими фагоцитирующими клетками в очаге инфекции приводит к системному оксидативному стрессу. В этих условиях активность СОД в сыворотке крови или тканях отражает как степень провокации со стороны про-оксидантов, так и компенсаторные возможности организма [10].

На рисунке 4 отображена динамика активности СОД в сыворотке крови у собак с открытой формой пиометры на фоне консервативной терапии.

Рис. 4. Динамика активности супероксиддисмутазы в сыворотке крови у собак с пиометрой в ходе консервативного лечения, ед/мл

Dynamics of superoxide dismutase activity in the blood serum of dogs with pyometra during conservative treatment, u/ml

Исходные показатели (1-й день) подтверждают развитие значительного оксидативного стресса у животных с пиометрой: активность сОд в группах лечения ((25,33 ± 1,66) и (25,94 ± 2,00) ед/мл) более чем в два раза превышала зна- чения контрольной группы ((12,33 ± 1,33) ед/мл). Минимальная разница между первой и второй группой в начале эксперимента (0,61 ед/мл) позволяет считать их сравнимыми по тяжести состояния.

На 2-й день в обеих группах зафиксирован пик активности фермента, что соответствует острой фазе воспалительного ответа на начало терапии и эвакуации маточного содержимого. Максимальные значения составили (28,31 ± 1,87) ед/мл в 1-й группе и (27,32 ± 1,25) ед/мл во 2-й.

С 3-го дня в обеих группах началось устойчивое снижение активности СОД, свидетельствующее об эффективности проводимого лечения в уменьшении оксидативного стресса. При этом во 2-й группе (комбинированная терапия) снижение происходило более интенсивно. Уже к 5-му дню разница между группами стала заметной: (18,36 ± 1,36) ед/мл в 1-й группе против (16,25 ± 1,25) ед/мл во 2-й (разница 2,11 ед/мл). Эта тенденция нарастала к концу наблюдения. К 8-му дню активность СОД в первой группе составила (13,52 ± 1,32) ед/мл, а во второй - (11,52 ± 1,11) ед/мл, что ниже на 2,00 ед/мл, или примерно на 15 %.

Анализ динамики снижения относительно пиковых значений (2-й день) показывает: в 1-й группе к 8-му дню активность СОД снизилась на 52,2 % (с (28,31 ± 2,16) до (13,52 ± 0,99) ед/мл), а во 2-й группе - на 57,8 % (с (27,32 ± 2,01) до (11,52 ± 1,23) ед/мл). При этом конечный показатель во 2-й группе (11,52 ед/мл) практически достиг среднего уровня контрольных значений (в диапазоне 10,21-13,12 ед/мл), тогда как в 1-й группе он оставался несколько повышенным.

При системном воспалительном ответе, сопровождающем такое заболевание, как пиомет-ра, происходит интенсификация перекисных процессов. В этих условиях активность ГП отражает не только степень оксидативного стресса, но и функциональный резерв и адекватность ответа глутатион-зависимой антиоксидантной системы. Изменения ее активности позволяют судить об эффективности терапии в плане нормализации редокс-статуса организма.

На рисунке 5 показана динамика активности ГП в сыворотке крови у собак с открытой формой пиометры в ходе консервативного лечения.

Рис. 5. Динамика активности глутатионпероксидазы в сыворотке крови у собак с пиометрой в ходе консервативного лечения, ед/мл

Dynamics of glutathione peroxidase activity in the blood serum of dogs with pyometra during conservative treatment, u/ml

Исходные показатели на 1-й день эксперимента демонстрируют выраженное усиление антиоксидантной защиты в ответ на оксидативный стресс, вызванный воспалением. Активность ГП в группах животных с пиометрой была примерно в два раза выше ((152,92 ± 10,23) и (153,21 ± 12,36) ед/мл), чем в контрольной группе ((75,23 ±

6,29) ед/мл). Начальные значения 1-й и 2-й групп были практически идентичны.

С момента начала терапии наблюдается устойчивая тенденция к снижению активности ГП в обеих лечебных группах, что указывает на постепенное уменьшение интенсивности окси-дативного стресса по мере лечения. Однако динамика снижения в группах различалась.

В группе монотерапии аглепристоном (1-я группа) снижение активности носило более плавный характер. Ко 2-му дню значение уменьшилось до (150,29 ± 13,21) ед/мл, а к 8-му дню составило (102,58 ± 9,63) ед/мл. Общее снижение за период лечения составило 50,34 ед/мл, или 32,9 % от исходного уровня.

Во 2-й группе (комбинированная терапия аг-лепристоном и клопростенолом) снижение активности ГП было более выраженным и происходило быстрее. Уже на 2-й день показатель снизился до (143,26 ± 13,65) ед/мл, что было на 7,03 ед/мл ниже, чем в 1-й группе в тот же день. Эта разница между группами в пользу более интенсивного снижения во 2-й группе сохранялась на протяжении всего курса лечения. К 8-му дню активность ГП во второй группе достигла (95,23 ± 5,63) ед/мл. Общее снижение за период

В е с т н и к Кр а с ГА У. 2026. № 7 (232) составило 57,98 ед/мл, или 37,8 % от исходного уровня.

К концу наблюдения (8-й день) разница между группами составила 7,35 ед/мл в абсолютных значениях. При этом показатель во 2-й группе ((95,23 ± 6,98) ед/мл) приблизился к верхней границе диапазона контрольных значений ((77,23 ± 6,36)–(83,62 ± 7,32) ед/мл), тогда как в первой группе активность фермента ((102,58 ± 10,36) ед/мл) все еще оставалась заметно выше контрольного уровня.

При пиометре усиление перекисных процессов приводит к повышенному расходу GSH. Динамика его концентрации отражает эффективность терапии в восстановлении редокс-баланса.

На рисунке 6 показано изменение уровня GSH у собак с пиометрой на фоне лечения.

Рис. 6. Уровень восстановленного глутатиона в сыворотке крови у собак с пиометрой в ходе консервативного лечения, мкмоль/мл Reduced glutathione level in the blood serum of dogs with pyometra during conservative treatment, μmol/ml

Исходно (1-й день) уровень восстановленного глутатиона в обеих группах больных животных (0,051 и 0,052 мкмоль/мл) был несколько повышен по сравнению с контрольной группой ((0,045 ± 0,0003) мкмоль/мл). Это может отражать начальную стадию компенсаторной мобилизации низкомолекулярных антиоксидантов в ответ на развивающийся оксидативный стресс, хотя прирост (примерно 13–16 %) был существенно менее выраженным, чем активация ферментных систем (СОД и ГП).

В процессе лечения в обеих группах наблюдалась устойчивая тенденция к постепенному снижению концентрации восстановленного глутатиона, приближающемуся к контрольным значениям. Ключевое отличие заключается в скорости и степени этого снижения.

В группе монотерапии (1-я группа) снижение происходило медленно: с (0,051 ± 0,003) до (0,045 ± 0,002) мкмоль/мл к 8-му дню. При этом к концу наблюдения уровень глутатиона в этой группе стабилизировался на отметке (0,045 ±

0,002) мкмоль/мл, что совпадает с верхней границей контрольных значений, но все же выше их медианы.

Во 2-й группе (комбинированная терапия) снижение было более выраженным и быстрым. Уже на 4-й день лечения показатель достиг контрольного уровня ((0,044 ± 0,002) мкмоль/мл). С 4-го по 8-й день концентрация глутатиона во второй группе колебалась в диапазоне (0,043 ± 0,002)-(0,044 ± 0,002) мкмоль/мл, практически полностью совпадая с контрольными значениями ((0,041 ± 0,001)-(0,045 ± 0,002) мкмоль/мл).

К 8-му дню разница, хотя и небольшая в абсолютных цифрах (0,001 мкмоль/мл), между группами является показательной в контексте динамики. Уровень во 2-й группе ((0,044 ± 0,002 мкмоль/мл) соответствовал среднему контрольному значению, в то время как в 1-й группе он оставался на верхней границе нормы ((0,045 ± 0,001) мкмоль/мл).

Таким образом, динамика уровня восстановленного глутатиона дополняет картину, полу- ченную при анализе ферментативных маркеров. Более быстрое и полное возвращение этого ключевого низкомолекулярного антиоксиданта к физиологическим значениям во 2-й группе свидетельствует о более эффективном устранении оксидативного дисбаланса при использовании комбинированной терапии с клопросте-нолом. Это указывает на комплексное положительное влияние данной схемы не только на ферментативное, но и на неферментативное звено антиоксидантной защиты организма.

Динамика уровня общего белка в процессе лечения служит важным критерием адекватности терапии и восстановления гомеостаза. Его повышение свидетельствует о нормализации синтетической функции печени и преобладании анаболических процессов.

На рисунке 7 отражена динамика концентрации общего белка у собак с открытой формой пиометры на фоне консервативной терапии.

Рис. 7. Концентрация общего белка в сыворотке крови у собак с пиометрой в ходе консервативного лечения, г/л Total protein concentration in blood serum of dogs with pyometra during conservative treatment, g/l

Исходно (1-й день) у животных обеих экспериментальных групп отмечалась умеренная гипопротеинемия. Уровень общего белка составил (59,3 ± 1,36) г/л в 1-й группе и (58,9 ± 3,01) г/л во 2-й при контрольных значениях около (65,3 ± 3,98) г/л. Это характерно для системного воспалительного процесса, сопровождающего пиометру, и может быть связано с потерей белка с экссудатом, снижением синтеза альбумина и повышенным катаболизмом.

В 1-й группе (монотерапия аглепристоном) в течение первой недели наблюдался незначительный, но стабильный рост уровня общего белка: с (59,3 ± 3,57) до (63,2 ± 5,00) г/л к 6-му дню. К концу наблюдения (8-й день) показатель несколько снизился (до (61,3 ± 4,26) г/л), но оставался выше исходного. Однако он так и не достиг значений контрольной группы, оставаясь в среднем на 3-4 г/л ниже.

Во 2-й группе (комбинированная терапия), после начального роста до (62,0 ± 4,39) г/л к 5-му дню, на 6-й день фиксируется заметное снижение до (58,1 ± 1,67) г/л. Этот спад нарушает общую тенденцию к восстановлению и может указывать на отсроченную стресс-реакцию, индивидуальные колебания или временное ухудшение состояния части животных в группе. В последующие дни (7-й и 8-й) показатель вновь повышается до (60,4 ± 2,36) и (60,8 ± 4,71) г/л соответственно, демонстрируя способность к восстановлению, однако конечный результат к 8-му дню ((60,8 ± 4,26) г/л) оказывается ниже, чем в 1-й группе ((61,3 ± 4,26) г/л).

Динамика концентрации альбумина в ходе терапии является важным прогностическим и оценочным критерием. Ее повышение свидетельствует о положительной клинической тенденции: снижении интенсивности воспаления, восстановлении белково-синтетической функции печени и нормализации обменных процессов.

На рисунке 8 представлена динамика концентрации альбумина в сыворотке крови у собак с открытой формой пиометры в процессе консервативного лечения.

Рис. 8. Концентрация альбумина в сыворотке крови у собак с пиометрой в ходе консервативного лечения, г/л Albumin concentration in blood serum of dogs with pyometra during conservative treatment, g/l

Исходно (1-й день) у животных обеих групп отмечалась гипоальбуминемия: (29,8 ± 0,97) г/л в 1-й группе и (30,0 ± 1,33) г/л во 2-й против контрольных значений около (33,2 ± 1,83) г/л. Это характерно для воспалительного процесса и может быть связано со снижением его синтеза в печени на фоне системной воспалительной реакции, а также с потерей белка.

В первой группе в первые дни (1–3-й дни) наблюдалось дальнейшее снижение уровня альбумина до минимального значения ((27,6 ± 1,06) г/л) на 3-й день. Это может отражать пик катаболических процессов и угнетения синтетической функции печени. Однако начиная с 4-го дня зафиксирован устойчивый рост показателя до (31,8 ± 2,57) г/л к 8-му дню. Несмотря на положительную динамику, к концу наблюдения уровень альбумина оставался на 5,5 г/л ниже контрольного ((37,3 ± 2,54) г/л), что свидетельствует о незавершенности процессов восстановления.

Во 2-й группе динамика была иной. После незначительного повышения до (31,2 ± 2,47) г/л на 2-й день, уровень альбумина оставался относительно стабильным, колеблясь в диапазоне от (29,9 ± 1,57) до (32,3 ± 1,68) г/л. Ключевым отличием от 1-й группы является отсутствие выраженного падения показателя в первые дни. К 8-му дню уровень альбумина составил (32,1 ± 2,54) г/л. Это значение также ниже контрольного (разница 5,2 г/л), но сама динамика восстановления была более плавной, без периода выраженного ухудшения.

Таким образом, обе схемы терапии не обеспечили полной нормализации уровня альбумина к 8-му дню наблюдения, что указывает на дли- тельность процессов восстановления белкового синтеза после пиометры. Однако комбинированная терапия, судя по динамике, позволила избежать фазы значительного усугубления ги-поальбуминемии в первые дни лечения, которая наблюдалась в группе монотерапии.

При пиометре изменение активности АЛТ может служить индикатором не только цитолиза, но и степени метаболической дисфункции печени. Восстановление нормальной или повышенной активности фермента на фоне лечения может свидетельствовать о репаративных процессах и возобновлении синтетической активности.

На рисунке 9 отображена динамика активности АЛТ у собак с открытой формой пиометрой в процессе консервативной терапии.

Рис. 9. Динамика активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови у собак с пиометрой в ходе консервативного лечения, ед/л

Dynamic of alanine aminotransferase activity in the blood serum of dogs with pyometra during conservative treatment, u/l

Исходно (1-й день) у животных обеих групп с пиометрой активность АЛТ была низкой – (9,36 ± 0,58) ед/л в 1-й группе и (9,78 ± 0,37) ед/л во 2-й при контрольных значениях около (24,69 ± 1,13) ед/л. Это может свидетельствовать о глубоком угнетении метаболических процессов, в т. ч. белкового синтеза в печени, на фоне тяжелого системного воспаления, интоксикации.

На фоне лечения в обеих группах наблюдался постепенный рост активности фермента, что можно интерпретировать как признак восстановления метаболической и синтетической функций печени. Однако характер этого роста существенно различался.

В 1-й группе (монотерапия) рост активности АЛТ был плавным и умеренным: с (9,36 ± 0,83) ед/л на 1-й день до (11,99 ± 1,10) ед/л на 8-й день. Несмотря на положительную динамику, к концу наблюдения показатель оставался более чем в два раза ниже контрольного уровня

((26,13 ± 1,20) ед/л), что указывает на неполное восстановление печеночной функции к моменту овариогистерэктомии.

Во 2-й группе (комбинированная терапия) активность АЛТ возрастала более интенсивно: с (9,78 ± 0,85) до (18,98 ± 1,13) ед/л к 8-му дню. Ключевой особенностью является ускорение роста в последние дни наблюдения (резкий подъем с (13,65 ± 0,68) ед/л на 6-й день до (18,98 ± 1,06) ед/л на 8-й день. Хотя конечное значение также не достигло контрольного диапазона, оно оказалось значительно выше (на 7 ед/л), чем в 1-й группе.

Монотерапия аглепристоном ассоциировалась с медленным и неполным восстановлением активности АЛТ. Комбинированная схема с клопростенолом стимулировала более быстрое возвращение показателя к физиологической норме, что свидетельствует о более эффективном восстановлении метаболического статуса и функций печени.

Системное воспаление и сопутствующий ему холестаз являются ключевыми патогенетическими компонентами пиометры, определяющими тяжесть состояния животного и прогноз. Для объективной оценки интенсивности этих процессов и эффективности проводимой терапии используется комплекс биохимических маркеров.

В таблице представлены результаты динамического контроля указанных биохимических показателей в сыворотке крови собак с открытой формой пиометры на фоне консервативного лечения.

Динамика биохимических показателей маркеров холестаза и воспаления у собак с открытой формой пиометры на фоне различных схем консервативной терапии (M ± m)

Dynamics of biochemical parameters of cholestasis and inflammation markers in dogs with open pyometra against the background of various conservative therapy regimens (M ± m)

День	Щелочная фосфатаза, ед/л	С-реактивный белок, мг/л	Амилоид-А, мг/л	Гаптоглобин, г/л
Контрольная группа
1	36,65±1,25	9,21±0,89	6,25±0,32	0,98±0,09
2	45,25±3,64	9,21±0,81	5,69±0,13	1,00±0,10
3	37,98±3,00	9,12±1,00	7,00±0,25	1,11±0,12
4	41,25±3,28	9,25±0,67	6,21±0,36	1,03±0,05
5	42,25±2,98	7,36±0,59	6,25±0,46	1,58±0,13
6	43,00±1,98	8,65±0,71	7,36±0,63	0,96±0,08
7	41,25±2,19	8,21±0,69	7,21±0,54	1,36±0,16
8	43,62±3,16	8,23±0,58	7,33±0,65	1,06±0,09
1-я группа
1	83,63±5,69*	17,26±0,25*	12,36±0,65*	2,36±1,05
2	82,52±4,98*	16,99±0,68*	11,02±0,54*	3,65±1,13*
3	73,68±5,28*	17,36±1,00*	11,69±1,03*	3,02±1,09*
4	72,56±5,19*	11,36±1,03*	9,25±0,59*	3,58±0,96*
5	65,36±4,01*	12,01±1,54*	8,23±0,36*	3,00±1,16*
6	64,32±3,67*	13,64±1,63*	8,14±0,84*	2,36±1,00*
7	62,25±3,57*	14,52±2,09*	8,03±0,77	1,87±1,10*
8	60,21±3,49*	14,00±1,13*	8,00±0,65	1,52±1,16*
2-я группа
1	82,95±4,57*	16,98±1,02*	11,25±0,95*	3,62±1,05*
2	74,36±3,97*	18,25±0,98*	12,36±0,98*	3,59±1,23*
3	72,58±4,00*	19,36±1,26*	10,96±0,56*	3,58±0,53*
4	70,36±3,19*	16,87±1,36*	9,25±1,00*	2,69±1,21*
5	69,12±3,58*	15,54±1,25*	8,69±0,75*	2,00±0,99*
6	59,21±4,01*	14,36±1,45*	8,03±0,93	1,36±1,14*
7	55,98±2,39*	13,54±2,00*	7,54±0,84*	1,97±1,09*
8	54,01±2,37*	12,36±1,03*	7,66±0,56*	1,13±1,10*

* р ≤ 0,05 – достоверность различий относительно контрольной группы животных.

Исходные показатели в 1-й день у всех животных с пиометрой были сходными и достоверно отличались от контрольных, что подтверждает сопоставимость групп и наличие тяжелого воспалительного процесса с выраженным холестатическим компонентом. Активность щелочной фосфатазы была повышена более чем в два раза, а уровни белков острой фазы – С-реактивного белка, амилоида-А и гаптоглобина также значительно превышали норму.

На фоне проводимого лечения в обеих группах отмечалась положительная динамика по всем исследуемым параметрам, однако ее выраженность и характер существенно различа- лись. В группе монотерапии аглепристоном наблюдалось плавное и статистически значимое снижение активности щелочной фосфатазы в течение восьми дней с 83,63 до 60,21 ед/л, что составило 28 % от исходного уровня. При этом показатели воспаления демонстрировали разнонаправленную динамику. Уровень амилоида-А устойчиво снижался на 35,3 %, достигнув 8,00 мг/л к концу наблюдения. Однако динамика С-реактивного белка была менее выраженной. После незначительных колебаний в течение 1-й недели его концентрация снизилась лишь на 18,9 % к 8-му дню. Уровень гаптоглобина в этой группе показал наибольшую вариабельность: поднявшись с исходных 2,36 г/л до пика 3,58 г/л на четвертый день, к восьмому дню он снизился до 1,52 г/л, что все еще превышало контрольные значения. Такая неоднородная картина свидетельствует о медленном и неполном купировании системного воспаления при использовании только аглепристона.

Во 2-й группе, где к аглепристону был добавлен клопростенол, динамика всех маркеров была более быстрой, выраженной и синхронной. Активность щелочной фосфатазы снижалась более интенсивно, на 34,9 %, достигнув к 8-му дню 54,01 ед/л, что было на 10 % ниже, чем в группе монотерапии. Показатели воспалительного ответа также демонстрировали четкую положительную тенденцию. Уровень С-реактив-ного белка начал снижаться с 3–4-го дня и к 8-му дню уменьшился на 27,2 %, что превышало темпы снижения в 1-й группе. Концентрация амилоида-А снизилась на 31,9 %, что сопоставимо с результатами в 1-й группе. Наиболее показательной была динамика гаптоглобина, который во 2-й группе продемонстрировал самое быстрое и значимое падение – на 68,8 % от исходного уровня, достигнув к 8-му дню значения 1,13 г/л, что практически соответствовало верхней границе контрольного диапазона. Это указывает на мощный и комплексный противовоспалительный эффект комбинированной схемы.

Таким образом, сравнительный анализ показывает, что добавление клопростенола к терапии аглепристоном приводит к более быстрому и значимому снижению как холестатического синдрома, так и системной воспалительной реакции, что особенно наглядно видно на примере синхронной нормализации ключевых белков острой фазы. В то время как монотерапия обеспечивает постепенное, но неполное купирование воспаления, комбинированная терапия демонстрирует более выраженную эффективность, способствуя ускоренному восстановлению гомеостаза у животных с открытой формой пиометры.

Заключение. Таким образом, полученные результаты демонстрируют, что обе схемы лечения оказывают положительное воздействие, однако характеризуются различной эффективностью в отношении отдельных звеньев патогенеза. Комбинированная терапия показала выраженное преимущество в коррекции состояния оксидативного стресса. Более быстрое и значимое снижение активности супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы, а также более полная нормализация уровня восстановленного глутатиона свидетельствуют о мощном антиоксидантном эффекте схемы с добавлением кло-простенола. Этот эффект, вероятно, обусловлен более активной эвакуацией маточного содержимого и, как следствие, более быстрым устранением основного источника персистирующего воспаления и генерации активных форм кислорода.

Анализ маркеров системного воспаления также выявил преимущество комбинированного подхода. Терапия аглепристоном в сочетании с клопростенолом привела к более раннему, устойчивому и синхронному снижению концентраций ключевых белков острой фазы – С-реактивного белка, амилоида-А и, что особенно показательно, гаптоглобина, уровень которого практически достиг физиологической нормы к концу наблюдения. Более выраженная положительная динамика щелочной фосфатазы в этой группе указывает на лучшее купирование холестатического компонента воспаления и более быстрое восстановление функции печени. В группе монотерапии противовоспалительный эффект был менее выраженным и нестабильным, о чем говорит слабая динамика С-реактив-ного белка и вариабельный уровень гаптоглобина, что свидетельствует о более медленном разрешении системного воспалительного ответа.

Восстановление синтетической функции печени и белкового обмена, оцененное по уровням общего белка, альбумина и аланинаминотрансферазы (АЛТ), носило более сложный характер. Комбинированная терапия способствовала более быстрому возвращению активности АЛТ к норме, что указывает на ускоренную нормализацию метаболизма гепатоцитов. Однако по параметрам общего белка и альбумина преимущество одной схемы над другой было не столь очевидным. Монотерапия характеризовалась более стабильной положительной динамикой общего белка, в то время как в комбинированной группе наблюдался эпизод его снижения в середине курса, что может отражать индивидуальные реакции или более интенсивную нагрузку на организм. Уровень альбумина к 8-му дню в обеих группах оставался сниженным, что подчеркивает длительность восстановительных процессов и, возможно, недостаточность 8дневного курса для полной коррекции глубоких нарушений белкового обмена.

Таким образом, результаты исследования позволяют заключить, что комбинированная терапия открытой формы пиометры аглепристо-ном и клопростенолом превосходит монотера- пию аглепристоном по способности быстрее и эффективнее купировать системное воспаление и оксидативный стресс, являющиеся основными патогенетическими факторами заболевания. Это выражается в более благоприятной динамике большинства исследованных биохимических маркеров. Однако для полного восстановления гомеостаза, в частности белковосинтетической функции печени, может требоваться более продолжительный курс лечения или дополнительная поддерживающая терапия. Полученные данные обосновывают целесообразность применения комбинированной схемы с клопростенолом для повышения эффективности консервативного лечения открытой формы пиометры у собак.