Динамика морфологических и биохимических показателей крови цыплят-бройлеров при использовании комплекса органических кислот

Использование различных биологически активных веществ в рационах птицы, а также целенаправленная, научно обоснованная фармакологическая коррекция продуктивности должны стать неотъемлемыми звеньями в общей цепочке зоотехнических и ветеринарных мероприятий при производстве птицеводческой продукции.

В этой связи особого внимания заслуживает использование в птицеводстве некоторых органических кислот – средств малотоксичных, безопасных в экологическом плане и обладающих достаточно высокой биологической активностью.

Одним из индикаторов физиологического состояния живого организма является кровь, при непосредственном участии которой, осуществляется обмен веществ – доставка клеткам питательных веществ и кислорода, с одной стороны, и удаление продуктов обмена и углекислого газа, с другой.

Гематологические показатели весьма чувствительны к воздействию изменяющихся эндогенных и экзогенных факторов, в том числе обусловленных характером питания. Состояние системы красной крови позволяет дать объективную оценку физиологического статуса организма в целом [2, 5, 8].

Цель настоящего исследования – определить влияние комплекса органических кислот «БиСАлТек» на морфологические и биохимические показатели крови цыплят-бройлеров.

Материал и методы исследований. Исследования проводили на цыплятах-бройлерах кросса Cobb-500 от рождения до убоя (38 суток) в условиях учебно-научной птицеводческой фабрики БелГАУ им. В.Я. Горина. Вместимость птичника – 2000 голов, содержание напольное, доступ к воде и кормам свободный. По принципу параналогов из суточных цыплят было сформировано 2 группы, по 100 голов в каждой: I – контрольная, II – опытная. В качестве основного рациона (ОР) птица обеих групп получала комбикорм, соответствующий периодам выращивания, а цыплята II группы – помимо ОР – подкислитель «БиСАлТек». Его введение осуществляли путём добавления препарата в индивидуальные поилки из расчета 2,5 л на тонну воды курсами: с 1 по 10 и с 34 по 38 сутки.

Для биохимических и морфологических исследований отбор крови (от 3 голов каждой группы) проводили в 1-е сутки посредством декапитации, на 20-е – из подкрыльцовой вены и на 38-е сутки – через надрез яремной вены

В образцах цельной крови определяли: гемоглобин – гемиглобин-цианидным методом, лейкоциты и эритроциты – методом подсчета в камере Горяева, среднее содержание гемоглобина в эритроците (ССГЭ) – расчетным путём, скорость оседания эритроцитов (СОЭ) – микрометодом Панченкова, а в сыворотке:

содержание общего белка – рефрактометрическим методом; альбуминов и белковых фракций – методом электрофореза, активность АсАТ и АлАТ – динитрофенилгидрозоновым методом (Рейтмана-Френкеля), щелочной фосфатазы – по гидролизу β-глицерофосфата (метод Бодански), билирубина – по диазореакции (метод Ендрассика-Клеггорна-Грофа).

Обработку полученных данных проводили статистически с использованием программы Microsoft Excel, с вычислением коэффициента достоверности по Стьюденту. Результаты считали достоверными со значений р<0,05.

Результат исследований.

Анализируя полученные нами данные по показателям цельной крови у цыплят-бройлеров «Cobb-500», можно сделать вывод, что имеют место изменения значений всех показателей, как в возрастном, так и в физиологическом аспектах, а также в положительной зависимости от применения комплекса органических кислот «БиСАлТек».

Анализ показателей крови, контролируемых и полученных в нашем эксперименте, представлен в таблицах 1 и 2.

Таблица 1 – Динамика морфологических показателей крови цыплят-бройлеров на фоне применения подкислителя «БиСАлТек»

Показатель	Возраст 1 сутки	Возраст 22 сутки		Возраст 38 суток
		I-К	II	I-К	II
Гемоглобин, г/л	101,83±0,87	95,60±1,12▲	111,17±2,22**▲	87,00±0,57▲▲	93,10±0,24***▲▲
Эритроциты, млн/мкл	2,32±0,14	2,33±0,19	2,48±0,11	3,05±0,13▲	3,25±0,22▲
ССГЭ, пг	43,89±3,02	41,03±3,83	44,83±2,88	28,52±1,45▲	28,65±2,01▲▲
СОЭ, мм/час	1,25±0,04	2,30±0,19▲▲	2,53±0,05▲▲▲	4,30±0,07▲▲▲	5,00±0,71▲
Лейкоциты, тыс/мкл	29,87±0,83	27,17±0,23▲	26,50±0,07*▲	25,63±1,27	24,30±1,59

Примечание: *p<0,05; ** p<0,01; *** p<0,001 – статистически значимые различия результатов опытной группы по сравнению с контрольной группой; ▲ p<0,05; ▲▲ p<0,01; ▲▲▲ p<0,001 – различия по отношению к предыдущему исследуемому возрасту

В таблице 1 нами показана тенденция к увеличению количества эритроцитов с возрастом у цыплят II – опытной группы на 6,9 % на 22 сутки жизни, относительно первых (исходных) и отсутствие изменений в их количестве в контроле.

На 38-е сутки разница относительно 22-х суток в обеих группах достигла достоверных величин и составила в контроле 30,9 % (р<0,05), а в опытной группе – 31,0 % (р<0,05). Необходимо отметить, что количество эритроцитов во II группе на протяжении наблюдений превышало (на уровне тенденции) таковое в контрольной: на 22-е сутки – на 6,4 % (р>0,05) и на 38-е сутки – на 6,6 % (р>0,05).

Несмотря на стабильный уровень эритроцитов, показанный нами в I группе цыплят к 22-суточному возрасту относительно суточного, мы отметили снижение концентрации гемоглобина в их крови на 6,1 % (р<0,05). При этом, во II группе показан недостоверный рост количества эритроцитов и достоверное увеличение концентрации гемоглобина в их крови на 9,2 % (р<0,05).

К концу выращивания (на 38-е сутки) мы наблюдали достоверное снижение концентрации гемоглобина относительно предыдущего периода в обеих группах на 9,0 % (р<0,01) в I и 16,3 % (р<0,01) во II.

В целом, концентрация гемоглобина в крови цыплят находилась в пределах физиологической нормы на всех этапах выращивания. Однако, на 22-е и 38-е сутки в опытной группе она достоверно превышала таковую в контрольной на 16,3 % (р<0,01) и на 7,0 % (р<0,001) соответственно периодам наблюдений, что, по нашему мнению, должно способствовать более высокой активности обменных процессов.

По сравнению с суточным возрастом, на 22-е сутки, среднее содержание гемоглобина (ССГЭ) в эритроците оставалось практически неизменным, хотя в контрольной группе оно снизилось на уровне тенденции на 6,5 % (р>0,05), а в опытной – увеличилось на 2,1 % (р>0,05). В 22-суточном возрасте ССГЭ в эритроците цыплят опытной группы превышало таковое в контроле на 9,3 % (р>0,05).

На 38-е сутки, по сравнению с предыдущим периодом, мы наблюдали достоверное снижение данного показателя на 30,5 % (р<0,05) в контрольной и на 36,1 % в опытной группах (р<0,01). При этом, в конце выращивания, разница между показателями опытной и контрольной групп нивелировалась.

Анализ скорости оседания эритроцитов (СОЭ) показал её увеличение по сравнению с исходной к 22-суточному возрасту на 84,0 % (р<0,01) в I группе и на 102,4 % (р<0,001) во II. К убою, показатель СОЭ повысился в сравнении с предыдущим периодом на 87,0 % (р<0,001) в контрольной и на 97,6 % в опытной группе (р<0,05).

В 1-е и 22-е сутки уровень СОЭ в обеих группах соответствовал физиологической норме. Однако, на 38-е сутки данный показатель превышал таковой в I – контрольной группе на 43,3 % и во II – на 66,7 %.

Анализируя изменения в уровне СОЭ в опытной группе, мы отметили тенденцию к её увеличению по сравнению с контролем, в возрасте 22 суток на 10,0 %, а 38 суток – на 16,3 % (р>0,05).

Лейкоциты обладают фагоцитарной активностью и формируют гуморальный иммунитет организма. Повышение количества лейкоцитов свидетельствуют о патологических процессах в организме. По сведениям В.П. Быкова (2002), И.А. Болотникова, Ю.В. Конопатова (1987), А.Н. Маянского (1989; 2000), З.С. Баркаган (2001), Л.В. Клетиковой (2012), уменьшение количества лейкоцитов в крови у цыплят-бройлеров, связано с быстрым увеличением массы, интенсивным метаболизмом, с повышением депонированной фракции лейкоцитов миграцией их из крови в ткани. Полученные нами результаты согласуются с литературными данными, поскольку по нашим данным, в возрастном аспекте содержание лейкоцитов в крови цыплят (по сравнению с таковым в суточном возрасте) достоверно уменьшалось: на 22-е сутки в контрольной группе на 9,0 % (р<0,05) и на 11,3 % (р<0,05) в опытной. На 38-е сутки относительно 22-х дней, закономерность сохранилась при недостоверной разнице и составила 5,7 и 8,3 % по группам соответственно (р>0,05).

Содержание лейкоцитов в обеих группах находилось в пределах референтных значений во время всего периода выращивания. Вместе с тем, применение «БиСАлТек», вероятно, оказывало профилактическое бактерицидное действие, которое косвенно подтверждается снижением показателя количества лейкоцитов на 2,5 % (р<0,05)

на 22-е сутки и на 5,2 % – на 38-е сутки.

Изменения концентрации общего белка и соотношения его фракций в сыворотке крови цыплят-бройлеров на фоне выпаивания добавки «БиСАлТек» представлены в таблице 2.

Таблица 2 – Динамика биохимических показателей крови цыплят-бройлеров на фоне применения подкислителя «БиСАлТек»

Показатель	Возраст 1 сутки	Возраст 22 сутки		Возраст 38 суток
		I-К	II	I-К	II
Общий белок, г/л	23,12±0,19	32,13±2,87▲	35,83±0,26▲▲▲	32,07±0,28	33,03±0,17*▲▲▲
Альбумины, %	61,37±0,13	57,63±0,29▲▲▲	54,16±0,65*▲▲▲	52,67±1,24▲	47,57±2,12▲
Глобулины, %	38,63	42,37	45,84	47,63	52,58
-α	14,68±0,93	16,63±0,30▲	18,17±0,29*▲	17,00±1,41	21,53±0,60*▲▲
-β	7,82±0,31	7,67±0,45	8,00±0,14	9,63±0,05	9,58±0,05▲▲▲
-γ	16,13±0,53	18,07±0,16▲	19,67±0,42**▲▲	21,00±2,45	21,67±6,03
Коэффициент А/Г	1,59	1,36	1,18	1,11	0,91
АсАТ, ед/л	327,00±11,05	369,63±7,19▲	357,93±24,85	381,80±10,36	362,90±16,08
АлАТ, ед/л	2,12±0,01	2,68±0,04▲▲▲	2,45±0,06*▲▲	3,17±0,10▲	2,93±0,11▲
Билирубин, мкмоль/л	4,13±0,38	2,63±0,07▲	1,27±0,05***▲▲	2,20±0,07▲	2,13±0,08▲▲▲
Щелочная фосфатаза, ед/л	5872,00±212,50	5436,00±238,10	5675,45±154,10	3953,33±100,20▲▲	3988,33±61,41▲▲▲

Следует отметить, что на 22-е сутки, по сравнению с началом наблюдений, произошло увеличение концентрации общего белка в контрольной группе на 39 % (р<0,05) и на 55 % (р<0,001) в опытной, тогда как на 38-е сутки (по сравнению с возрастным периодом в 22 дня) в I группе уровень общего белка остался без изменения, а во II – снизился на 7,8 % (р<0,001), что, учитывая более интенсивный рост цыплят этой группы, может свидетельствовать о некотором дефиците белка в рационе при данных условиях.

В таблице 2 видна тенденция к увеличению концентрации общего белка в опытной группе по сравнению с контрольной на 11,5 % (р>0,05) на 22-е сутки и достоверное увеличение на 3,0 % (р<0,05) – на 38-е сутки, что, по нашему мнению, способствовало синтезу белка в организме и, в конечном итоге, могло повлиять на прирост живой массы цыплят в опытной группе на 7,7 %, отмеченный нами в конце эксперимента.

Наблюдалось снижение содержания основных белков плазмы крови – альбуминов у цыплят в возрастном аспекте: на 22-е сутки по сравнению с предыдущим периодом на 3,7 % (р<0,001) в контрольной группе и на 7,2 % (р<0,001) в опытной. К убою, уровень альбуминов, в сравнении с предыдущим возрастным периодом, сохранил отмеченную выше направленность изменений: на 5,0 % и на 6,6 % (р<0,05) по группам соответственно.

В то же время, содержание доли альбуминов в сыворотке крови цыплят, на протяжении всего периода выращивания, превышало физиологическую норму. На 22-е сутки значения показателя альбуминов в опытной группе были ниже, чем в контрольной группе на 3,5 % (р<0,05), а на 38-е – на 5,1 % (р>0,05).

Учитывая преобладание по живой массе цыплят опытной группы над контрольной на 7,7 % в конце выращивания, снижение доли лабильных белков с возрастом (альбуминов) можно объяснить более интенсивным расходованием этой фракции на прирост массы тела. Иными словами, по нашему мнению, использование альбуминов, как пластического материала в синтезе белков различных органов и тканей, в опытной группе цыплят происходило с большей интенсивностью.

Для характеристики обменных процессов в организме птицы, состояния ее здоровья и физиологического статуса важное значение имеет показатель глобулиновых фракций общего белка.

Из полученных в результате экспериментов данных, представленных также в таблице 2, следует отметить увеличение содержания а-глобулиновой фракции в содержании глобулинов общего белка крови цыплят контрольной и опытной групп с возрастом: на 22-е сутки (относительно исходной) на 2,0 % (р<0,05) и на 3,5 % (р<0,05) соответственно и к концу выращивания в опытной группе (по сравнению с предыдущим возрастным периодом) на 3,4 % (р<0,01). В целом, процентное содержание а-глобулинов на 22-е и 38-е сутки в опытной группе превосходили таковые в контрольной на 1,5 % (р<0,05) и 4,5 % (р<0,05) соответственно.

Из a i -глобулинов в сыворотке крови обнаруживают два белка: а 1 -антитрипсин (ингибитор ряда протеаз) и а 1 -гликопротеин (участвует в транспорте прогестерона и тестостерона). Фракция а 1 -глобулинов на 90 % представлена a i -антитрипсином, при недостатке которого могут развиваться ранние формы поражения печени. Протеолитические ферменты лейкоцитов и патогенных микроорганизмов при воспалении активно воздействуют на ткани, защита которых при низком содержании а 1 -антитрипсина ослабляется. В опытной группе, мы наблюдали большую концентрацию а-глобулинов, что может свидетельствовать о достаточном количестве а 1 -антитрипсинов, блокирующих действие протеаз на фоне патологических процессов, неизбежно возникающих в организме птиц [3].

Данные таблицы 2 свидетельствуют, что доля в-глобулиновой фракции в содержании глобулинов к середине опыта, относительно стартового периода, в обеих группах животных оставалась без изменений. На 38-е сутки, нами отмечено увеличение (с разной степенью достоверности) относительно предыдущего периода, уровня в-глобулинов в контрольной группе на 2,0 % (р>0,05), а в опытной - на 1,6 % (р<0,001). При этом, видно изменение содержания в-глобулинов в меньшую сторону от физиологической нормы (1113 %) в обеих группах на протяжении всего периода выращивания цыплят, что относится к положительным изменениям в биохимии крови по мнению ряда авторов и может отражать их расходование на обезвреживание токсинов, транспорт железа, фосфолипидов, холестерина [8]. Тенденция к увеличению относительного содержания в-глобулинов в сыворотке крови цыплят в опытной группе прослеживалась на 22-е стуки, а в контрольной - на 38-е сутки.

С другой стороны, на протяжении всего периода наблюдений, доля Y-глобулинов в сыворотке крови экспериментальной птицы увеличивалась на: 1,9 % на 22-е сутки (р<0,05) в контрольной группе и 3,5 % (р<0,01) - у цыплят II группы. На 38-е сутки, по сравнению с предыдущим периодом, нами отмечена тенденция к увеличению доли этого показателя в I и II группах на 2,9 и 2,0 % по группам соответственно (р>0,05).

Процентное содержание

Y-глобулинов в обеих группах было несколько ниже физиологической нормы, что можно связать со стимуляцией белоксинтезирующей функции печени и повышением в сыворотке альбуминов. В то же время, этот показатель в опытной группе на 22-е сутки превысил таковой в контрольной на 1,6 % (р<0,01). Впоследствии, данная закономерность отмечалась на уровне тенденции.

Таким образом, применение подкислителя «БиСАлТек» способствовало увеличению Y-глобулинов в сыворотке крови, что играет огромное значение для повышения иммунного статуса и защиты молодого развивающегося организма от инфекций.

Изменение белковых фракций обуславливает диспротеинемию, выражением которой является белковый коэффициент (отношение количества альбуминов к сумме глобулинов). В норме оно составляет 0,9:1,4. В наших исследованиях, белковый коэффициент незначительно превышал физиологическую норму в 1-е сутки жизни цыплят, далее он соответствовал таковой. Существенной разницы между группами не наблюдалось.

Оценивая активность ферментов аспартатаминотрансферазы (АсАТ) и аланинаминотрансферазы (АлАТ), мы наблюдали более низкие их уровни (тенденции к изменению) у цыплят, получавших подкислитель «БиСАлТек». При этом, на 22-е сутки активность АсАТ во II группе была ниже на 3,2 %, чем в контрольной, а на 38-е - на 5,0 %. В то же время, по отношению к исходным данным, отмечено увеличение активности этого фермента (АсАт) у цыплят в возрасте 22-х суток на 13,0 % (р<0,05) в I группе и однонаправленная тенденция у животных II группы (на 9,5 %, р>0,05). К концу опыта, по сравнению с предыдущим периодом активность фермента, практически, не изменялась.

Ряд авторов считают, что повышение активности АсАТ свыше 300 Ед/л и АлТ свыше 40 Ед/л, очевидно, является компенсаторным механизмом при нарушении обмена аминокислот, белков, энергетического обмена у цыплят-бройлеров.

В наших исследованиях, установлено, что на протяжении всего периода жизни цыплят, показатель активности АсАт превышал физиологическую норму. Однако, у цыплят опытной группы, показана тенденция к снижению данного значения, т.е. применение добавки «БиСАлТек» сдерживало повышение активности аспартатаминотрансферазы в опытной группе.

Активность фермента АлАТ показала тенденцию к повышению у цыплят I группы относительно таковой во

II группе в возрасте 22-х дней на 8,6 % (р<0,05) и на 7,6 % (р>0,05) в 38-суточном возрасте. В целом, активность фермента на 22-е сутки по отношению к исходному периоду в I группе увеличилась на 26,4 % (р<0,001), а во II – на 15,6 % (р<0,01). К убою, активность названной трансферазы в контрольной группе возросла на 18,3 % (р<0,05) и на 19,6 % (р<0,05) в опытной группе по отношению к предыдущему возрастному периоду.

Таким образом, мы предполагаем, что снижение уровня трансфераз в опытной группе может свидетельствовать о гепатопротекторном действии данного комплекса органических кислот.

Уровень билирубина у цыплят в суточном возрасте был наивысшим за весь период эксперимента и составил 4,13± 0,38 мкмоль/л. В последующем, он снижался: на 22-е сутки в контрольной группе до 2,63±0,07 мкмоль/л (на 36,3 %, р<0,05 – при физиологической норме в возрасте 15 суток, равной 1,8 мкмоль/л, а в опытной – до 1,27±0,05 мкмоль/л (на 69,2 %, р<0,01). К концу выращивания, значение показателя в контрольной группе снизилось до 2,20±0,07 мкмоль/л (на 16,3 %, р<0,05), а в опытной группе – увеличилось до 2,13±0,08 (67,7 %, р<0,001). При этом, благодаря выпаиванию подкислителя, уровень билирубина у цыплят II группы был ниже, чем в I на 51,7 % (р<0,001) на 22-е сутки и на 3,2 % (р>0,05) в заключительные 38-е сутки.

Активность щелочной фосфатазы в сыворотке крови коррелирует (rконтроль= -0,96; rопыт= -0,93) со скоростью роста цыплят. Об этом свидетельствуют показатели активности фермента, отмеченные на 22-е и 38-е сутки. В таблице 2 показана тенденция к снижению на 22-е сутки на 7,4 % (р>0,05) в контрольной и на 3,3 % (р>0,05) в опытной, что, вероятнее всего, связано с развитием костной системы у молодой птицы. На 38-е сутки активность фермента снижалась на 27,3 % в контрольной (р<0,01) и 29,7 % в опытной (р<0,001). Щелочная фосфатаза не является строго органоспецифическим ферментом. Значительное повышение ее активности отмечают при холангитах, холецистите, желчекаменной болезни, рахите, остеодистрофии [5].

Заключение. Комплексное определение морфологических и биохимических показателей крови цыплят-бройлеров свидетельствует об отсутствии негативного влияния добавки органических кислот «БиСАлТек» на исследованные параметры.

Включение в рацион цыплят-бройлеров подкислителя «БиСАлТек» способствовало увеличению количества эритроцитов, более высокому уровню обменных процессов в организме, оказывало противовоспалительное (по изменению лейкопоэза) и гепатопротекторное действие на организм птицы.

Подкислитель «БиСАлТек» способствовал приросту живой массы цыплят благодаря использованию основных белков плазмы крови – альбуминов, как пластического материала в синтезе белков различных органов и тканей.

В данной работе изучено влияние комплекса органических кислот «БиСАлТек» на морфологические и биохимические показатели крови цыплят-бройлеров. Установлено положительное влияние подкислителя на увеличение эритроцитов крови, а также на уровень обменных процессов, благодаря чему происходил более интенсивный прирост живой массы. Добавка оказывала противовоспалительное (по изменению лейкопоэза) и гепатопротекторное действие на организм птицы.

Taldykina A.A., Semenyutin V.V. Summary

In this work, the influence of the complex of organic acids "BiSAlTek" on the morphological and biochemical parameters of the blood of poultry was studied. The positive effect of the acidifier on the increase in red blood cells, as well as on the level of metabolic processes, due to which there was a more intense increase in body weight. The supplement had an antiinflammatory (by changing leukopoiesis) and hepatoprotective effect on the poultry body.