Доказательная нутритивная коррекция антиоксидантного статуса и факторов риска атеросклероза у здоровых и больных лиц трудоспособного возраста

Хорошо известно, что гиперактивация перекисного окисления липидов, избыточное накопление свободных радикалов, нарушение проницаемости сосудистой стенки, а также дисфункция эндотелия [1, 2] прямо ведут к снижению энергообразования в митохондриях, психофизической деадаптации и раннему старению организма [3]. В то же время высокий окислительный стресс и низкая антиоксидантная защита обусловливают преждевременное развитие ишемической болезни сердца и артериальной гипертензии (АГ) [1]. В этой связи ранняя оценка антиоксидантной защиты и ее коррекции особенно актуальны. Публикации последних лет установили, что метаболиты перекисного окисления липидов (ПОЛ) имеют четкую взаимосвязь с уровнем антиоксидантов липопротеинов низкой плотности (ЛПНП), независимую ассоциацию с содержанием общего холестерина (ОХС), триглицеридов (ТГ), липопротеинов высокой плотности (ЛПВП), курением и систолическим АД (САД) [4]. При этом у больных сердечно-сосудистыми заболеваниями (ССЗ) выявлена прямая корреляция уровня реактивных кислородных метаболитов и диеновых конъюгатов в ЛПНП [5]. Кроме того, доказано: среди причин низкой антиоксидантной защиты наиболее значимой и легко корригируемой является дефицит антиоксидантов в пище. Так, на Европейском конгрессе кардиологов в 2004 г. низкий уровень потребления фруктов и овощей был назван одним из девяти факторов риска инфаркта миокарда [6]. Помимо собственных антиоксидантных систем в организм должны поступать экзогенные антиоксиданты – витамины А, С и Е, дефицит которых всегда выявляется у больных ИБС [7]. В связи с этим большие надежды возлагались на их цитопротектор-ную эффективность. Но результаты рандомизированного многоцентрового исследования Heart Protection

Study не подтвердили таких свойств [цит. по 8]. В итоге сделан вывод о том, что доказательная медицина требует перевода больных ССЗ с бесплодных попыток лечения витаминами на терапию статинами [9]. Тем не менее, сегодня, установлено – более выраженными антиоксидантными эффектами по сравнению с витаминами обладают фитонутриенты из овощей/ фруктов: многочисленные каротиноиды, флавоноиды, альфа-липоевая кислота и др. [10, 11]. Именно их повышенное содержание в средиземноморской диете, богатой жирными кислотами класса омега-3 из морепродуктов и оливкового масла, а также полифенолами красного вина, способствует предупреждению ССЗ [12]. Что подтверждено в исследовании PREDMED (Prevencion con Dieta Mediterranea) с участием 772 испанцев от 55 до 80 лет с сахарным диабетом и другими факторами риска ССЗ. Пациентам рандомизированно назначали либо низкожировую пищу (контроль), либо средиземноморскую диету: 1 л оливкового масла в неделю или 30 г грецких орехов. Уже через 3 месяца такая диета приводила к значимому снижению уровня глюкозы в крови, систолического АД и соотношения общего холестерина и ЛПВП [13].

В настоящей работе мы предложили с помощью специального подбора витаминно-антиоксидантных БАД воспроизвести главные компоненты средиземноморской диеты для получения корригирующих эффектов на антиоксидантную защиту, окислительный стресс, липидный спектр, а также уровни других факторов риска развития атеросклероза (ФРА) у лиц трудоспособного возраста с позиций доказательной медицины.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Было выполнено рандомизированное когортное слепое исследование-испытание в трудовом коллективе из 450 сотрудников со сравнительно однородным образовательным уровнем. Отклик на добровольное участие в исследовании составил 32,2% (145 человек). Рандомизацию осуществляли методом случайных чисел: из 145 включено 45 работников. Репрезентативность выборки составила 10% (45 человек) от общего числа служащих. Для получения информированного согласия проведены беседы о цели испытания. Скрининг и забор крови из вены выполнен до и после 8-недельного использования антиоксидантных БАД. В это время испытуемые вели обычный образ жизни, не придерживаясь каких-либо диетических ограничений. Для повышения достоверности результатов работы проводился «тройной слепой» контроль: 1) скрининг и обработку клинического материала проводила одна группа ученых; 2) обработку результатов биохимического тестирования – другая группа; 3) статистический анализ выполнялся третьей группой специалистов.

Таким образом, обследовано 45 мужчин и женщин от 25 до 62 лет (средний возраст 44,6±9,1 лет) с ФРА и ССЗ. В основную группу включено 30 человек, из них в подгруппу А вошли 16 здоровых участников с ФРА (9 мужчин и 7 женщин, средний возраст 43,9±10,7 лет): низкий уровень употребления фруктов и овощей обнаружен у 16 (100%); высокое нормальное АД (ВНАД) – у 16 (100%); дислипидемия (ДЛП) – у 12 (75%); курение – у 10 (62,5%), избыточная масса тела (ИМТ) – у 9 (56,2%) человек. В подгруппу Б включено 14 больных (8 мужчин и 6 женщин, средний возраст 47,3±10,0): Гипертоническая болезнь II стадии в сочетании с ожирением II степени обнаружена у 11 (78,5%) пациентов; ИБС: стенокардия напряжения II ФК, постинфарктный кардиосклероз на фоне Гипертонической болезни II стадии выявлены у 3 больных. Среди основных ФРА в подгруппе Б отмечались: ДЛП – у 14 (100%); курение у 7 (50,0%) пациентов; низкий уровень потребления фруктов и овощей – у 14 пациентов (100%). В контрольную группу включили 15 здоровых лиц с ФРА (9 мужчин и 6 женщин, средний возраст 45,8±8,5). При этом низкий уровень потребления фруктов и овощей был выявлен у 15 (100%), ВНАД – у 12 (80%), ДЛП – у 12 (80%), курение – у 11 (73,3%), ИМТ – у 8 (53,3%) добровольцев. Сформированные подгруппы и группа контроля были сопоставимыми по полу, возрасту и ФРА.

Образцы ЭДТА-плазмы крови, взятой у испытуемых до и после использования БАД, для повышения точности измерений, были заморожены при t=-20°С. Далее, следуя предписанной инструкции, в том числе измерение в дубликатах, образцы ЭДТА-плазмы были подвергнуты одномоментному исследованию. Уровень ОАС при значениях <1,0 ммоль/л считался низким, при 1-1,3 ммоль/л принимался умеренно низким, при значениях >1,3 ммоль/л – достаточным. Нормальным уровнем УСП у здоровых лиц считались величины <400,0 мкмоль/л. Уровень употребления фруктов и овощей был низким, если ежедневно съедалось меньше 5 яблок или 5 порций овощей [14].

Для воспроизведения основных компонентов и эффектов средиземноморской диеты применялся специальный подбор БАД «Фарманекс» (NSE products Inc., USA), включенных в РЛС России [15]. «Лайф-Пак®» [14] – источник каротиноидов бета-каротина, лютеина, ликопина, а также альфа-липоевой кислоты, использовался по 1 тавлиоте утром и вечером. «Ма-ринеОмега®» – масло криля, как источник кислот омега-3, каротиноида астаксантина и витамина Е, применялась по 1 капсуле утром; «Ти-грин97®» сухой экстракт зеленого чая, как источник катехинов и полифенолов, применялся по 1 капсуле утром через день. Таким образом, лица основной группы ежедневно, в течение 8 недель, добавляли в свое питание «тройной набор»: «ЛайфПак®», «Ти-грин97®» и «МаринеОме-га®». Группа контроля БАД не принимала, поскольку была сформирована для оценки эффективности корригирующего влияния, воспроизведенных с помощью БАД, компонентов средиземноморской диеты.

Таблица 1

Антропометрические данные, липидный спектр, антиоксидантный/оксидантный статус у лиц основной (подгруппы А и Б) и контрольной группы до коррекционных мероприятий (M±m)

Показатель	Подгруппа А (n=16)	Подгруппа Б (n=14)	Группа контроля (n=15)	Уровень значимости между А и Б
Возраст, лет	43,9±10,7	47,3±10,0	45,8±8,5	0,19
Рост, см	171,2±8,6	168,3±10,3	170,7±8,3	0,41
Вес, кг	75,4±11,6	83,0±10,8	82,9±15,8	0,18
Индекс Кетле, кг/м2	25,5±3,1	29,5±1,3	28,5±6,0	0,04
САД, мм рт.ст.	138,9±5,0	146,1±12,2	134,0±4,1	0,12
ДАД, мм рт.ст.	81,8±2,7	84,8±12,4	85,0±8,5	0,33
ЧСС, уд./мин	84,0±2,9	80,0±9,0	78,8±9,3	0,28
ОХС, ммоль/л	5,7±0,3	5,8±0,3	5,7±0,4	0,69
ТГ, ммоль/л	1,35±0,14	1,45±0,21	1,54±0,22	0,28
ЛПНП, ммоль/л	3,73±0,3	3,82±0,24	3,76±0,28	0,26
ЛПВП, ммоль/л	1,28±0,1	0,97±0,09*	1,31±0,1	0,005
Индекс атерогенности	3,42±0,4	4,71±0,6*	3,48±0,36	0,002
ОАС, ммоль/л	1,02±0,07	1,09±0,07	1,12±10,0	0,36
УСП, мкмоль/л	364,3±32,8	333,6±38,5	328,5±37,2	0,52

Примечание: (*) – уровень значимости <0,05 между подгруппой Б и группой контроля. Значимых различий между подгруппой А и группой контроля не отмечалось.

Здесь и в табл. 2, 3 показатель ОАС отражает общую антиоксидантную способность плазмы крови, а УСП – уровень содержания перекиси в плазме крови.

Таблица 2

Антропометрические данные, липидный спектр, антиоксидантный/оксидантный статус у здоровых лиц с ФРА (подгруппа А) после коррекционных мероприятий (M±m)

Показатель	До коррекции (n=16)	После коррекции (n=16)	Группа контроля (n=15)	Уровень значимости (до и после)
Возраст, лет	43,9±10,7	43,9±10,7	45,8±8,5	-
Рост, см	171,2±8,6	171,2±8,6	170,7±8,3	-
Вес, кг	75,4±11,6	74,5±10,8	82,9±15,8	0,72
Индекс Кетле, кг/м2	25,5±3,1	25,2±2,9	28,5±6,0	0,77
САД, мм рт.ст.	138,9±5,0	121,3±2,7*	134,0±4,1	0,01
ДАД, мм рт.ст.	81,8±2,7	78,2±1,6	85,0±8,5	0,11
ЧСС, уд./мин	84,0±2,9	77,2±4,6	78,8±9,3	0,11
ОХС, ммоль/л	5,7±0,3	5,0±0,3*	5,7±0,4	0,04
ТГ, ммоль/л	1,35±0,14	1,19±0,12*	1,54±0,22	0,12
ЛПНП, ммоль/л	3,73±0,3	3,32±0,23	3,76±0,28	0,22
ЛПВП, ммоль/л	1,28±0,1	1,34±0,1	1,31±0,1	0,31
Индекс атерогенности	3,54±0,4	3,17±0,38	3,48±0,36	0,54
ОАС, ммоль/л	1,02±0,07	1,39±0,07*	1,12±10,0	0,005
УСП, мкмоль/л	364,3±32,8	235,8±22,3*	328,5±37,2	0,01

Примечание: (*) – уровень значимости <0,05 между подгруппой А после коррекционных мероприятий и группой контроля.

Статистический анализ показателей групп наблюдений включал: среднее значение, среднеквадратическое отклонение, ошибка среднеарифметической/ коэффициент вариации. Сравнение средних значений в группах выполняли непараметрическим критерием Ван дер Вардена [16], т.к. признаки не имели нормального распределения. Оценка интенсивности корреляционной связи осуществлялась ранговым коэффициентом корреляции Спирмана. Критический уровень статистической значимости принимали р=0,1. Полученные в работе значения параметров представлены как M±m. Статистический анализ выполнялся Центром БИОСТАТИСТИКА (E-mail: point@stn. tomsk.ru) с применением пакетов SAS 9 и SPSS 15.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Данные антропометрии, липидный спектр, анти-оксидантный/оксидантный статус у лиц основной (подгруппы А и Б) и контрольной группы до применения БАД приведены в табл. 1. Обнаружено, что у здоровых лиц с ФРА как в подгруппе А, так и в контроле выявлялись однотипные сдвиги, характерные для ДЛП: повышение уровней ОХС, ЛПНП, но при нормальных уровнях ЛПВП, индекса атерогенности (ИА). Показатели АД отвечали уровню ВНАД. На фоне нормального содержания перекиси в подгруппе А и контрольной группе уровень ОАС был низким. Аналогичная картина выявлена в подгруппе Б: уровни ОАС, САД, ЛПНП, ЛПВП и ИА, за исключением ТГ, были отклонены от нормы.

Данные антропометрии, липидный спектр, анти-оксидантный/оксидантный статус у лиц с ФРА подгруппы А после применения БАД отражены в табл. 2. Обнаружено, что уровень ОАС возрос на 36,4% (p=0,005), а УСП снизился на 35,3% (p=0,01). При этом на 12,7% (p=0,01), 12,2% (p=0,04) снизились, соответственно, уровни САД и ОХС. Подобные сдвиги после применения БАД выявлены в подгруппе Б (табл. 3). Показатель ОАС возрос на 30,3% (p=0,008), а ИА снизился на 30,1% (p=0,002). На 32,4% (p=0,009), 13,7% (p=0,02) и 11,0% (p=0,04), соответственно, понизились уровни ТГ, ОХС и САД. Содержание ЛПВП увеличилось на 32,8% (p=0,02) на фоне не значимого повышения УСП.

Известно, что активные формы кислорода (АФК) возникают в клетке как результат химических реакций О2 с ферментами дыхательной цепи или ферментными системами. Выделяют три категории АФК [17]: первичные, вторичные и третичные. К первичным АФК относят супероксидный анион, который далее преобразуется в перекись водорода, гипохлорную кислоту и гипохлорит. При слабой нейтрализации супероксида его избыток, взаимодействуя с NO, образует пероксинитрит или переводит Fe3+ в F2+, которое при соединении с H2O2 и НCIO образует гидроксильный радикал (ОН*) и/или, соединяясь с липоперекисями, - липоксильный радикал (LO*). Именно эти АФК являются вторичными радикалами, способными повреждать мембраны липидов, молекулы ДНК, белки и углеводы. Антиоксидантная система организма состоит из ферментов и низкомолекулярных веществ. Супероксиддисмутаза – первое звено защиты, переводящее супероксид в H2O2. Перекись водорода электронейтральна и может либо покинуть

Таблица 3

Антропометрические данные, липидный спектр и антиоксидантный/оксидантный статус у больных лиц (подгруппа Б) после коррекционных мероприятий (M±m)

Показатель	До коррекции (n=14)	После коррекции (n=14)	Группа контроля (n=15)	Уровень значимости (до и после)
Возраст, лет	47,3±10,0	47,3±10,0	45,8±8,5	-
Рост, см	168,3±10,3	168,3±10,3	170,7±8,3	-
Вес, кг	83,0±10,8	81,7±11,5	82,9±15,8	0,58
Индекс Кетле, кг/м2	29,5±1,3	28,7±1,4	28,5±6,0	0,67
САД, мм рт.ст.	146,1±12,2	130,0±10,5	134,0±4,1	0,04
ДАД, мм рт.ст.	84,8±12,4	85,6±2,9	85,0±8,5	0,44
ЧСС, уд./мин	80,0±9,0	76,1±9,0	78,8±9,3	0,19
ОХС, ммоль/л	5,8±0,3	5,0±0,9 *	5,7±0,4	0,02
ТГ, ммоль/л	1,45±0,21	0,98±0,14*	1,54±0,22	0,009
ЛПНП, ммоль/л	3,82±0,24	3,49±0,26	3,76±0,28	0,23
ЛПВП, ммоль/л	0,97±0,09*	1,26±0,11*	1,31±0,1	0,02
Индекс атерогенности	4,71±0,6*	3,22±0,26	3,48±0,36	0,002
ОАС, ммоль/л	1,09±0,07	1,42±0,06*	1,12±10,0	0,008
УСП, мкмоль/л	333,6±38,5	370,9±41,9	328,5±37,2	0,15

Примечание: (*) – уровень значимости <0,05 между подгруппой Б после коррекционных мероприятий и группой контроля.

клетку, либо под влиянием фермента каталазы превращаться в Н2О и О2. Кроме ферментных систем в мембранах синтезируется антиоксидант - убихинон. Вместе с тем мощным антиоксидантным свойством обладают различные каротиноиды и флавоноиды, находящиеся в овощах, фруктах и красном вине. Приведенный экскурс позволяет понять, что использование в работе тест-систем по оценке ОАС и УСП как нельзя точно позволило оценить общий антиоксидантный/ оксидантный статус как у лиц с ФРА, так и больных ССЗ до и после применения БАД. Подтверждением тому оказались довольно тесные обратные корреляции между уровнем ОАС и УСП у лиц с ФРА (r=-0,58; p=0,02) и пациентов ССЗ (r=-0,62; p=0,001). При этом корреляции оказались более сильными у женщин, особенно после использования БАД: (у женщин с ФРА до коррекции r=-0,76; p=0,04, после коррекции r=-0,94; p=0,001; у женщин с ССЗ до коррекции r=-0,95; p=0,04, после коррекции r=-0,97; p=0,001). Показательно, что у мужчин эти связи были и слабее, и отмечены до применения БАД: у лиц с ФРА (r=-0,66; p=0,05), у больных (r=-0,76; p=0,02). Найденные различия, на наш взгляд, объясняются тем, что в подгруппе Б были мужчины с выраженной кардиальной патологией, у которых после применения БАД было повышение уровня перекиси в крови. Данный факт расценивается нами, безусловно, как положительный. Поскольку у лиц с ССЗ уровень антиоксидантной защиты был низким, можно допустить, что у них имел место дефицит и ферментативных, и не ферментативных антиоксидантных систем, что и создавало условия для избыточного образования АФК. В этой связи можно с определенной уверенностью предположить, что позитивная динамика со стороны уровня ОАС была обусловлена, в первую очередь, за счет высокоэффективных антиоксидантных добавок «Фарманекс». Естественно, что в этой ситуации нейтрализация избытка АФК могла привести к небольшому росту уровня перекиси. Вполне вероятно, что на фоне восстановленной антиоксидантной активности крови у лиц с ССЗ требуется больше времени, чем 8 недель, чтобы избыток Н2О2 нейтрализовался до Н2О и О2. Что касательно другой причины найденных различий по взаимосвязям ОАС и УСП, то она, по-видимому, может объясняться тем, что женщины больше следуют рекомендациям по диете, обладают более широким перечнем навыков здорового поведения, а также больше ответственны в вопросах сохранения и укрепления здоровья. Кроме того, в работе были получены другие корреляционные взаимосвязи, которые лишь подтверждают данные других исследований относительно высокой эффективности как отдельно взятых БАД, так и средиземноморской диеты в частности. К примеру, в подгруппе А до применения БАД была выявлена прямая корреляция между ОАС и ЛПВП (r=0,67; p=0,005). А у лиц подгруппы Б была обнаружена обратная взаимосвязь УСП с ЛПВП (r=-0,71; p=0,02) и прямая связь УСП с ИА (r=0,74; p=0,01). Таким же показательным оказался анализ корреляционных связей в зависимости от пола. Так, у мужчин с ССЗ до использования БАД наблюдалась прямая корреляция УСП с ИА (r=0,85; p=0,03) и обратная связь УСП с ЛПВП (r=-0,89; p=0,01), тогда как, после применения БАД прямая взаимосвязь выявлена между УСП и ЛПНП (r=0,79; p=0,01), а также обратная взаимосвязь между ОАС и САД (r=-0,91; p=0,01). Что касается женщин, то в подгруппе А еще до применения

БАД также выявлены прямые связи УСП с ИА (r=0,76; p=0,04), УСП с ЛПНП (r=0,79; p=0,006) и обратная связь УСП с ЛПВП (r=-0,81; p=0,01). Характерно, что у больных женщин с ССЗ также наблюдалась обратная взаимосвязь между УСП и ЛПВП (r=-0,91; p=0,01) и также до использования антиоксидантных БАД.

В связи с изложенным следует подчеркнуть, что нам удалось продемонстрировать практически все воспроизведенные с помощью БАД антиатеросклеротические эффекты средиземноморской диеты. Более того, было установлено, что антиоксидантная активность «Лайф-Пак®» распространяется не только в отношении здоровых некурящих людей [14], не только в отношении здоровых с комбинированными ФРА, но и в отношении больных лиц с ССЗ. Другими словами, доказано, что каротиноиды, входящие в состав «ЛайфПак®», являются важнейшим классом антиоксидантов-нутриентов, положительно влияющими на функцию сердца и сосудов. Причем антиоксидантная активность «Лайф-Пак®», усиленная назначением «МаринеОмега®», не только уменьшала окисляемость липидов [14], но также вызывала липидкорректирующие эффекты, непосредственно влияя на интенсивность ПОЛ [7]. Другим ключевым моментом использования «Ма-ринеОмега®», был дополнительный гипотензивный эффект. К примеру, показано, что снижение АД до оптимального уровня было возможным не только у здоровых лиц с ВНАД, но также у больных с АГ. При этом следует оговориться, что пациенты с АГ до начала и во время испытания продолжали (не регулярно!) использовать гипотензивные препараты. Но поскольку уровень САД у них до и после использования БАД отличался, то обоснованным было бы считать, что снижение САД произошло за счет гипотензивного эффекта последних. Это полностью согласуется с мнением других авторов, полагающих, что модифицирующее влияние метаболитов ПОЛ на констрикцию артериол и повышение общего периферического сопротивления является главным звеном участия ПОЛ в прогрессировании АГ [18]. Поэтому использование «Ти-грин97®» с высоким уровнем полифенолов, из которых 65% представлены катехинами, эту точку зрения лишь подкрепляет. Исследования Канзасского Университета (in vitro, 1997 г.) [19] установили, что антиоксидантная способность «Ти-грин97®», благодаря содержанию катехина-антиоксиданта эпигаллокатехин-3-галлата в эквивалентных дозах в несколько раз сильнее, чем активность витамина С, Е, а также полифенолов вина. А если учесть, что «Ти-грин97®» не содержит кофеина, преимущества и перспективы его применения более чем очевидны. Данное обстоятельство позволило не только назначать «Ти-грин97®» лицам с АГ, но и ожидать усиления антиоксидантного, липидкорректирующего и гипотензивного эффектов за счет доказанного влияния полифенолов на активность NO-синтазы [20].

Таким образом, предложен по сути новый подход к эффективному использованию БАД не только с профилактической, но и лечебной целью. Получен- ные данные позволяют обосновано заключить, что применение «ЛайфПак®», «МаринеОмега®» и «Ти-грин97®» способно не только улучшить нутриентно-витаминный пищевой статус неблагополучных в этом отношении регионов, включая Россию, не только способно воспроизвести эффекты средиземноморской диеты, но и позволяет предложить использование «тройного набора» «Фарманекс» как нового нутритивного способа профилактики и лечения атеросклероза с позиции доказательной медицины.

ВЫВОДЫ

• 1.    Комплексное применение «ЛайфПак®», «Ма-ринеОмега®» и «Ти-грин⁹⁷®» эффективно повышает антиоксидантный статус и у здоровых лиц с ФРА, и у больных ССЗ.

• 2.    Применение «тройного набора» «ЛайфПак®», «МаринеОмега®» и «Ти-грин⁹⁷®» у лиц с ФРА и больных ССЗ вызывает липидкорректирующий и гипотензивный эффект.

• 3.    Комплексное использование «ЛайфПак®», «МаринеОмега®» и «Ти-грин⁹⁷®» является эффективным способом активной профилактики и лечения атеросклероза.